สารบัญ

Kategori Beta-lactamaseinhibitor.

Clavulanatkalium indeholder ækvivalenter af mindst 75,5 procent og højst 92,0 procent af C8H9NO5, beregnet på vandfri basis.

Pakning og opbevaring Clavulanatkalium skal opbevares i tæt lukkede beholdere og opbevares ved en temperatur mellem 2º og 8º.

Mærkning Mærkningen på beholderen angiver (1) opbevaringsbetingelse; (2) parenteral eller ikke-parenteral kvalitet.

Identifikation
A. Kromatogrammet af assaypræparatet, der er fremstillet som angivet i assayet, udviser en hovedtop for clavulansyre, hvis retentionstid svarer til den, der er vist i kromatogrammet af standardpræparatet, der er fremstillet som angivet i assayet.
B. Det giver de reaktioner, der er karakteristiske for kaliumsalte (tillæg 5.1).

pH 5,5 til 8,0 i en 1,0 % w/v-opløsning (tillæg 4.11).

Vand Ikke mere end 1,5 % w/w (Karl Fischer-metode, tillæg 4.12).

Limit for clavam-2-carboxylatkalium Ikke mere end 0,01 %. Bestemmelsen foretages som beskrevet i “High-pressure Liquid Chromatography” (tillæg 3.5).
Mobil fase Tilbered 0,1 M natriumdihydrogenphosphat, juster med fosforsyre til en pH-værdi på 4,0 ± 0,1, og filtrer gennem et membranfilter med en porøsitet på 0,5 μm eller finere. Der foretages om nødvendigt justeringer. Standardopløsning Clavam-2-carboxylatkalium RS opløses i vand for at opnå en opløsning med en kendt koncentration på ca. 40 μg pr. ml.
Testopløsning Overfør ca. 100 mg Clavulanatkalium, nøjagtigt afvejet, til en 10 ml målekolbe, opløses i og fortyndes med vand til volumen, og blandes.
Opløsningsopløsning Opløs en passende mængde clavulanatkalium i standardopløsning for at opnå en opløsning, der indeholder ca. 1 mg clavulanatkalium og 30 μg clavam-2-carboxylatkalium pr. ml.
Kromatografisk system Den kromatografiske procedure kan udføres ved hjælp af a) en kolonne af rustfrit stål (30 cm × 4 mm) pakket med octadecylsilan kemisk bundet til porøse silica- eller keramiske mikropartikler (3 til 10 μm), b) mobil fase med en strømningshastighed på 0,5 ml pr. minut og c) et ultraviolet fotometer indstillet på 210 nm.
For at bestemme det kromatografiske systems egnethed kromatograferes standardopløsningen, og topresponserne registreres som angivet under Procedure: Symmetrifaktoren er ikke over 1,5, og den relative standardafvigelse for gentagne injektioner er ikke over 2,0 %. Kromatografér opløsningsopløsning, og registrer topresponserne som angivet under Procedure: Opløsningsfaktoren mellem clavam-2-carboxylsyre- og clavulansyretoppene er ikke mindre end 1,0.
Procedure Injicer separat lige store mængder (ca. 20 μl) af standardopløsning og testopløsning i kromatografen, registrer kromatogrammerne, og mål responserne for de vigtigste toppe. De relative retentionstider er ca. 0,7 for clavam-2-carboxylsyre og 1,0 for clavulansyre. Beregn procentdelen af clavam-2-carboxylatkalium

Grænseværdi for methanol og tert-butylamin Ikke over 0,1 vægtprocent methanol eller ikke over 0,2 vægtprocent tert-butylamin. Bestemmelsen foretages som beskrevet i “Gaskromatografi” (tillæg 3.4).
Standardopløsning Til en 100 ml målekolbe indeholdende 50,0 ml 3 M natriumhydroxid tilsættes ca. 6 ml methanol og 12 ml tert-butylamin, begge nøjagtigt afvejet, fortyndes med 3 M natriumhydroxid til
volumen, og blandes. 10,0 ml af denne stamopløsning overføres til en anden 100 ml målekolbe, der fortyndes med 3 M natriumhydroxid til rumfang, og der blandes. 10,0 ml af denne opløsning overføres til en tredje 100 ml målekolbe, der fortyndes med 3 M natriumhydroxid til rumfang, og der blandes. 7,0 ml af denne opløsning overføres til en fjerde 100 ml målekolbe, der tilsættes 3,0 ml 3 M natriumhydroxid, der fortyndes med 4-methyl-2-pentanon, indtil der er plads, og der blandes. Lad faserne adskille sig, og det klare lag af methylisobutylketon anvendes som standardopløsning. Denne opløsning indeholder ca. 36,6 μg methanol og 63,8 μg tertbutylamin pr. ml. Denne opløsning skal anvendes inden for 5 timer.
Testopløsning Overfør ca. 3 g Clavulanatkalium, nøjagtigt afvejet, til en 100 ml målekolbe, tilsæt 10,0 ml 3 M natriumhydroxid, og omryst, indtil opløsningen er sket. Kolben afkøles i et koldt vandbad, der fortyndes med 4-methyl-2-pentanon til rumfang, kolben lukkes, og der rystes kraftigt i 3 minutter med lejlighedsvis udluftning. Lad faserne adskille sig, og det klare lag af methylisobutylketon anvendes som testopløsning. Kromatografisk system Den kromatografiske procedure kan udføres ved hjælp af a) en glassøjle (30 m × 0,32 mm) belagt med stationær fase af dimethylpolysiloxanolie, der holdes ved 40º, derefter programmeres til at stige med 55º pr. minut til 200º og holdes ved denne temperatur i 4 minutter, b) injektionsåbningen og detektorboksen holdes ved 150º, c) nitrogen som bæregas og d) en flammeioniseringsdetektor. For at bestemme det kromatografiske systems egnethed kromatograferes standardopløsningen, og topresponserne for methanol, tert-butylamin og methylisobutylketon registreres som angivet for Procedure: Symmetrifaktoren er ikke over 1.6 for methanol- og tert-butylamintoppene; kolonneeffektiviteten er mindst 25 000 teoretiske plader; opløsningsfaktoren mellem methanoltoppen og tert-butylamintoppen er mindst 20 og mellem tert-butylamintoppen og 4-methyl-2-pentanontoppen er mindst 10; og den relative standardafvigelse for gentagne injektioner er højst 10 %.

Fremgangsmåde Der injiceres hver for sig lige store mængder (ca. 1 μl) af standardopløsning og testopløsning i kromatografen, kromatogrammerne registreres, og arealerne af responserne for methanol- og tert-butylamintoppene måles.
Beregning Beregnes procentdelen af methanol og tert-butylamin i Clavulanatkalium.
Kromatografisk renhed Bestemmelsen foretages som beskrevet i “High-pressure Liquid Chromatography” (tillæg 3).5).
Løsning A Tilbered en opløsning af 0,05 M natriumdihydrogenphosphat, juster med fosforsyre til en pH på 4,0 ± 0,1, og filtrer gennem et filter med en porøsitet på 0,5 μm eller finere.
Løsning B Tilbered en blanding af lige store mængder af opløsning A og methanol.
Mobil fase Anvend variable blandinger af opløsning A og opløsning B som anvist til det kromatografiske system. Foretag justeringer af begge opløsninger efter behov.
Standardopløsning Tilbered en opløsning af Clavulanate Lithium RS i opløsning A med en kendt koncentration på ca. 0,1 mg pr. ml.
Testopløsning Tilbered en opløsning af Clavulanate Potassium i opløsning A indeholdende 10.0 mg pr. ml.
Opløsningsopløsning Tilbered en opløsning af Clavulanate Lithium RS og amoxicillin i opløsning A indeholdende 0,1 mg af hver af dem pr. ml.
Kromatografisk system Den kromatografiske procedure kan udføres ved hjælp af (a) en kolonne af rustfrit stål (10 cm × 4.6 mm) pakket med octadecylsilan kemisk bundet til porøse silica- eller keramiske mikropartikler (3 til 10 μm) og holdes ved en konstant temperatur på ca. 40º, (b) mobil fase ved en strømningshastighed på ca. 1 ml pr. minut og (c) et ultraviolet fotometer indstillet på 230 nm.
Systemet er programmeret til at tilvejebringe en mobil fase bestående af variable blandinger af opløsning A og opløsning B. Systemet afbalanceres i 15 minutter med 100 % opløsning A og holdes på denne sammensætning i 4 minutter efter injektion af den testede opløsning, hvorefter andelen af opløsning B øges lineært fra 0 til 50 % over en periode på 11 minutter. Systemet holdes ved denne sammensætning i 3 minutter, hvorefter der skiftes til 100 % opløsning A i 6 minutter. For at bestemme det kromatografiske systems egnethed kromatograferes opløsningsopløsningen, og topresponserne registreres som angivet for Procedure: de relative retentionstider er ca. 2,5 for amoxicillin og 1,0 for clavulansyre; symmetrifaktoren for clavulansyretoppen er ikke over 2,0; kolonneeffektiviteten, bestemt ud fra clavulansyretoppen, er ikke under 2 000 teoretiske plader; og opløsningsfaktoren mellem clavulansyretoppen og amoxicillintoppen er ikke under 13. Kromatografér standardopløsningen, og registrer topresponserne som angivet i Procedure: Den relative standardafvigelse for gentagne injektioner er ikke over 2 %.
Procedure Injicer hver for sig lige store mængder (ca. 20 μl) standardopløsning og testopløsning i kromatografen, registrer kromatogrammerne og mål topresponserne.
Beregning Beregn procentdelen, udtrykt i clavulanatkaliumækvivalent, af hver urenhed i clavulanatkalium ud fra udtrykket:

10(237.3/205,1)(C)(ri/rS),

hvor 237,3 er clavulanatkaliums molekylvægt; 205.1 er molekylvægten af clavulanatlithium; C er koncentrationen i mg pr. ml af clavulanatkalium RS i standardopløsningen; ri er topresponset for en enkelt urenhedstop i kromatogrammet fra testopløsningen; og rS er topresponset for clavulansyretoppen i kromatogrammet fra standardopløsningen. Summen af alle urenhedstoppene er ikke over 2 %.

Analyse Bestemmelsen udføres som beskrevet i “Højtryksvæskekromatografi” (tillæg 3.5).
pH 4,4 Natriumphosphatbuffer Opløses 7.8 g natriumdihydrogenphosphat opløses i 900 ml vand, der justeres med fosforsyre eller 10 M natriumhydroxid til en pH-værdi på 4,4 ± 0,1, fortyndes med vand til 1000 ml og blandes.
Mobil fase Der fremstilles en passende blanding af 95 volumener pH 4,4 natriumphosphatbuffer og 5 volumener methanol. Der foretages om nødvendigt justeringer.
Standardpræparat Opløs en nøjagtigt afvejet mængde Clavulanate Lithium RS i vand for at opnå en opløsning med en kendt koncentration på ca. 250 μg pr. ml.
Assaypræparat Overfør ca. 50 mg Clavulanatkalium, nøjagtigt afvejet, til en 200 ml målekolbe, opløs i og fortyndes med vand til volumen, og bland.
Opløsningsopløsning Opløs en passende mængde amoxicillin i standardpræparatet for at opnå en opløsning, der indeholder ca. 0,5 mg amoxicillin og 250 μg clavulanatlithium pr. ml.
Kromatografisk system Den kromatografiske procedure kan udføres ved hjælp af (a) en kolonne af rustfrit stål (30 cm × 4 mm) pakket med octadecylsilan kemisk bundet til porøse silica- eller keramiske mikropartikler (3 til 10 μm), (b) mobil fase med en strømningshastighed på ca. 2 ml pr. minut og (c) et ultraviolet fotometer indstillet på 220 nm.
For at bestemme det kromatografiske systems egnethed kromatograferes opløsningsopløsningen, og topresponserne registreres som angivet under Procedure: opløsningsfaktoren mellem amoxicillin- og clavulansyretoppene er ikke mindre end 3,5, og de relative retentionstider er ca. 0,5 for clavulansyre og 1,0 for amoxicillin. Kromatograf standardpræparatet, og topresponserne registreres som angivet under Procedure: Symmetrifaktoren for clavulansyretoppen er ikke over 1,5, og den relative standardafvigelse for gentagne injektioner er ikke over 2,0 %.
Procedure Der injiceres hver for sig lige store mængder (ca. 20 μl) af standardpræparatet og assaypræparatet i kromatografen, kromatogrammerne registreres, og svarene for de vigtigste toppe måles.
Beregning Beregn indholdet af C8H9NO5 i den udtagne Clavulanatkalium ved hjælp af det oplyste indhold af C8H9NO5 i Clavulanatlithium RS.