Membran-Antikörper-Arrays

Vorteile von membranbasierten Zytokin-Arrays und Antikörper-Arrays für andere Zielmoleküle

Antikörper-Arrays werden verwendet, um viele Proteine gleichzeitig in einem Experiment zu messen, und zwar mit deutlich weniger Zeit, Aufwand und Kosten als die Durchführung vieler ELISAs oder Western Blots, die für die gleiche Anzahl von Analyten erforderlich sind. Im Vergleich zu anderen Multiplex-Immunoassays, wie z. B. Assays auf Bead-Basis, sind Membran-Antikörper-Arrays sehr einfach einzurichten und wesentlich kostengünstiger, wenn es darum geht, viele Proteine in einer kleinen Anzahl von Proben zu vergleichen.

Antikörper-Arrays bieten mehrere Vorteile:

  • Keine spezielle Ausrüstung erforderlich
    • Chemilumineszenz-Detektionsmethode ist die gleiche wie bei einem Western Blot
  • Geeignet für jedes Chemilumineszenz-Blot-Dokumentationssystem
    • Film Entwickler oder Tischdunkelkammer
  • Kostenlose Software für Densitometer und Fleckenerkennung
    • Kostenlos zum Download bei NIH erhältlich
  • Geeignet für die Verwendung mit dem Li-Cor® Detektionssystem angepasstes Array-Protokoll für Li-Cor®
  • großer Detektionsbereich
    • Bereich von 10,000-fache Detektion (in pg/mL)
  • Doppelte Antikörperspots
    • Die gefangenen Antikörper werden in doppelter Ausführung gespottet.
  • Optimierter Kit
    • Unser Antikörper-Array-Kit enthält Puffer, Nachweisantikörper und Membranen.

Wie funktionieren membranbasierte Antikörper-Arrays?

Antikörper-Arrays sind ein auf Antikörperpaaren basierender Assay, der dem ELISA ähnelt, jedoch eine Membran als Substrat und keine Platte verwendet. Die Capture-Antikörper werden in Form von Arrays/Flecken auf einer Membran geliefert, wobei jedes Fleckenpaar für einen anderen Analyten steht. Die Probe wird zugegeben (0,2-1 ml einer Probe auf jede Membran), dann gepaarte biotinylierte Detektorantikörper und Streptavidin-HRP.

Der Array wird mit denselben Methoden wie ein chemilumineszenter Western Blot analysiert. Der Vergleich zwischen den Proben kann nach Augenmaß oder mit Hilfe einer Densitometriesoftware für einen halbquantitativen Vergleich erfolgen. Der gesamte Assay kann an einem einzigen Tag oder mit Inkubation über Nacht durchgeführt werden.

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