Abstract
IgG kann durch ein einfaches einstufiges Ionenaustausch-Chromatographie-Verfahren aus Serum gereinigt werden. Die Methode ist weit verbreitet und beruht auf dem Prinzip, dass IgG einen höheren oder basischeren isoelektrischen Punkt hat als die meisten Serumproteine. Wird daher der pH-Wert unter dem isoelektrischen Punkt der meisten Antikörper gehalten, binden die Immunglobuline nicht an einen Anionenaustauscher und werden von der Mehrheit der an die Säulenmatrix gebundenen Serumproteine getrennt. Die hohe Kapazität von Anionenaustauschersäulen ermöglicht die Reinigung von IgG aus Serum in großem Maßstab. Die reaktive Anionenaustauschergruppe Diethylaminoethyl (DEAE), die kovalent an Sepharose gebunden ist (z. B. DEAE Sepharose CL-6B, Pharmacia, Uppsala, Schweden), ist für diesen Zweck nützlich. Sie wird vorgequollen und fertig zum Packen in eine Säule geliefert, ist robust und hat eine hohe Bindungskapazität. Außerdem ist es relativ stabil gegenüber Änderungen der Ionenstärke und des pH-Werts. Andere Matrizes (z. B. DEAE-Zellulose) werden als Feststoffe geliefert und müssen daher vorbereitet und äquilibriert werden (1).