Los mutantes met son auxótrofos de Met, lo que significa que son incapaces de crecer en medios que no contengan Met. Los auxótrofos son microorganismos que no pueden sintetizar un nutriente esencial debido a una mutación genética. Muchas cepas de laboratorio son portadoras de múltiples mutaciones que interfieren en la síntesis de nutrientes esenciales. Por ejemplo, como la cepa BY4742 lleva mutaciones en los genes HIS3, LEU2, LYS2 y URA3, la cepa sólo crecerá en medios que contengan histidina, leucina, lisina y uracilo. Las cepas auxotróficas tienen muchos usos en genética. Los investigadores suelen utilizar las cepas auxotróficas como huéspedes para la transformación de plásmidos (capítulo 12). Los plásmidos utilizados para la transformación llevan alelos funcionales de un gen que es defectuoso en la cepa huésped, lo que permite seleccionar transformantes por su capacidad de crecer en medios que carecen del nutriente esencial.
Los medios sintéticos son una herramienta esencial para cultivar y estudiar las cepas auxótrofas, porque todos los componentes están definidos. Los investigadores de levaduras han desarrollado una variedad de formulaciones diferentes para los medios sintéticos. Todos los medios sintéticos contienen una fuente de carbono (normalmente D-glucosa), una fuente de nitrógeno y vitaminas y minerales esenciales. Las vitaminas y los minerales suelen comprarse
en una formulación conocida como base nitrogenada de levadura (YNB). Los suplementos que se añaden a los medios sintéticos pueden adaptarse para apoyar o seleccionar el crecimiento de determinados genotipos. En este curso, utilizaremos el medio Yeast Complete (YC) que favorece el crecimiento de la mayoría de las cepas de S. cerevisia. La tasa de crecimiento de las cepas de tipo salvaje en YC es algo más lenta que en medios ricos como el YPD, pero las cepas son viables durante largos períodos de tiempo. La tabla de la página siguiente muestra la composición del YC, que incluye un rico suministro de aminoácidos y bases de nucleótidos. Además del medio YC completo, también utilizaremos medios selectivos en los que se han omitido algunos componentes. Por ejemplo, en este laboratorio, utilizaremos el medio YC-Met «drop-out», que contiene todos los componentes del YC de la siguiente tabla, excepto la metionina.
