Corriente de Na en las burbujas de la membrana: implicaciones para la movilidad del canal y el registro de la pinza de parche

Cuando se aplicó la succión a las pipetas de pinza de parche sueltas mientras se registraba de las fibras musculares disociadas enzimáticamente, se formaron grandes burbujas de la membrana dentro de las pipetas. Iniciamos un estudio de estas burbujas inducidas por la succión porque los canales de iones en las burbujas complicarían o posiblemente invalidarían las mediciones de pinzas de tensión de parche suelto de la densidad de corriente de membrana. La baja movilidad lateral (Stühmer y Almers, 1982) y los pronunciados gradientes de los canales de Na en la placa terminal y el tendón (Caldwell et al., 1986) implican una estrecha unión de los canales de Na a los elementos del citoesqueleto y nos llevaron a esperar pocos canales de Na en las burbujas, si es que hay alguno. La formación de blebs produjo un aumento de la capacitancia de la membrana, como se esperaba por el aumento del área de la membrana. La formación de los blebs también aumentó la corriente de Na, lo que indica que los blebs contenían canales de Na. Suponiendo que el aumento de la capacitancia y de la corriente de Na se debiera al desplazamiento de lípidos y canales de Na desde la membrana hacia el exterior de la pipeta, se esperaba que la expulsión de la burbuja de la pipeta devolviera la capacitancia y la corriente de Na a sus valores originales. La capacitancia volvió a su valor original, pero la corriente de Na fue menor de lo esperado. La disminución de la corriente de Na se explica por el desplazamiento de los canales de Na de la membrana del parche a la ampolla. La normalización de la corriente de Na de la ampolla y del parche a sus respectivas capacitancias reveló que la membrana de la ampolla tenía una densidad de canales de Na de casi el 50% de la membrana superficial normal. Por lo tanto, la membrana de la mancha no está desprovista de proteínas ni es realmente representativa de la membrana de superficie normal de la que surgió. Está enriquecida en lípidos de membrana y es relativamente pobre en proteínas. Se pueden extraer dos conclusiones (RESUMEN TRUNCADO A 250 PALABRAS)

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