Aposyniini estää NADPH-oksidaasia fagosyyteissä, mutta stimuloi ROS-tuotantoa ei-fagosyyttisissä soluissa

Aposyniini on luonnossa esiintyvä metoksisubstituutioitu katekoli, jota käytetään kokeellisesti NADPH-oksidaasin estäjänä. Koska se toimii voimakkaana inhibiittorina neutrofiileillä ja makrofageilla tehdyissä tutkimuksissa, ei inhiboivaa vaikutusta useinkaan havaita muissa kuin fagosyyttisoluissa. Kokeissamme aposyniini jopa stimuloi verisuonten fibroblastien reaktiivisten happilajien (ROS) tuotantoa. Jopa makrofageihin lisättynä aposyniini aiheutti aluksi ROS-tuotannon lisääntymisen. ROS:n muodostumisen estyminen seurasi, mikä viittaa siihen, että leukosyyttien myeloperoksidaasin ja vetyperoksidin läsnä ollessa aposyniini muuntuu toiseksi yhdisteeksi. H2O2:lla ja piparjuuriperoksidaasilla (HRP) esiaktivoitu aposyniini esti ROS-tuotannon välittömästi. Ei-fagosyytteissä aposyniini stimuloi ROS-tuotantoa, eikä estoa havaittu edes 60 minuutin kuluttua. H2O2:lla ja HRP:llä käsitelty aposyniini vähensi kuitenkin ROS-tuotantoa samalla tavalla kuin makrofageissa. ROS-tuotantoa stimuloiva vaikutus voidaan kumota tironilla ja superoksididismutaasilla (SOD), mikä viittaa siihen, että tuotettu laji oli superoksidi. Aposyniinin vaikutusta esti difenyleenijodinium (DPI), joka ei ole skavenging NADPH-oksidaasin estäjä. Voidaan tiivistää, että aposyniini stimuloi solujen superoksidin tuotantoa. Peroksidaasin ja vetyperoksidin läsnä ollessa se kuitenkin muuttuu toiseksi yhdisteeksi, joka toimii superoksidin tuotannon estäjänä. Se viittaa vahvasti siihen, että in vivo -olosuhteissa aposyniinillä voi olla vastakkaisia vaikutuksia fagosyytteihin ja muihin kuin fagosyyttisoluihin. Se toimii fagosyyttien NADPH-oksidaasin estäjänä mutta myös ROS-tuotantoa stimuloivana aineena muissa kuin fagosyyttisoluissa.

Jätä kommentti