Abstract
IgG voidaan puhdistaa seerumista yksinkertaisella yksivaiheisella ioninvaihtokromatografialla. Menetelmä on laajalti käytetty, ja se toimii sillä periaatteella, että IgG:llä on korkeampi tai emäksisempi isoelektrinen piste kuin useimmilla seerumin proteiineilla. Jos pH pidetään useimpien vasta-aineiden isoelektrisen pisteen alapuolella, immunoglobuliinit eivät sitoudu anioninvaihtajaan ja ne erotetaan suurimmasta osasta pylväsmatriisiin sitoutuneita seerumin proteiineja. Anioninvaihtokolonnien suuri kapasiteetti mahdollistaa IgG:n laajamittaisen puhdistuksen seerumista. Anioninvaihtajan reaktiivinen ryhmä, dietyyliaminoetyyli (DEAE), joka on kovalenttisesti sidottu Sepharoseen (esim. DEAE Sepharose CL-6B, Pharmacia, Uppsala, Ruotsi), on hyödyllinen tähän tarkoitukseen. Se toimitetaan esipölytettynä ja valmiina kolonniin pakkaamista varten, ja se on kestävä ja sillä on suuri sitoutumiskyky. Lisäksi se on suhteellisen stabiili ionivahvuuden ja pH:n muutoksille. Muut matriisit (esim. DEAE-selluloosa) toimitetaan kiinteinä aineina, joten ne vaativat valmistelua ja tasapainottamista (1).
.