Longanin siemenistä eristetyt kaksi uutta ACE:tä estävää peptidiä: puhdistus, estokinetiikka ja mekanismit – RSC Advances (RSC Publishing)

Angiotensiinikonvertaasientsyymin (ACE) esto tarjoaa hyödyllisen keinon verenpainetaudin hallintaan, koska ACE:n estäjien (ACEI:t) tiedetään toimivan aineina, joilla on verenpainetaudin vastaisia ominaisuuksia sen lisäksi, että ne tuottavat myönteisiä metabolisia ja sydäntä suojaavia tuloksia. Nykyisiin ACEI-inhibiittoreihin liittyy kuitenkin haitallisia seurauksia, joten tarvitaan tehokkaita mutta turvallisempia yhdisteitä, jotka voitaisiin saada aikaan kemiallisella synteesillä tai eristämällä luonnosta saatuja bioaktiivisia molekyylejä. ACEI-aktiivisia proteiinihydrolysaatteja voidaan valmistaa longansiemenproteiinista yhdistetyllä pepsiini- ja pankreatiiniproteolyysillä (ruoansulatuskanavan ruoansulatuksen jäljittelemiseksi). Tässä tutkimuksessa tutkittiin longansiemenproteiinihydrolysaatteja, jotka saatiin 3 tunnin peräkkäisestä pilkkomisesta pepsiinillä ja sitten pankreatiinilla. Tuloksena saadulle hydrolysaatille tehtiin peräkkäinen ultrasuodatuskalvofraktiointi 10, 5 ja 3 kDa:n molekyylipainon raja-arvoilla (MWCO). Permeaatti, joka on peräisin <3 kDa MWCO:sta, osoitti korkeinta ACEI-aktiivisuutta. Tämä permeaatti erotettiin sen jälkeen käänteisfaasimenetelmällä korkean suorituskyvyn nestekromatografialla, jolloin saatiin pääfraktiot erilaisten eluutioaikojen perusteella. Tämän jälkeen määritettiin näiden fraktioiden ACEI-IC50-arvot. Pääpiikin (F5) peptidimassan määrittämiseksi käytettiin kvadrupoli-aikavalon tandem-massaspektrometriaa. Peptidimassan todettiin olevan Glu-Thr-Ser-Gly-Met-Lys-Pro-Thr-Glu-Leu (ETSGMKPTEL) ja Ile-Ser-Ser-Met-Gly-Ile-Leu-Val-Cys-Leu (ISSMGILVCL). Nämä kaksi peptidiä olivat stabiileja 60 minuutin ajan lämpötilan ja pH:n vaihteluvälillä -20-90 °C:n ja 2-12 °C:n välillä. Lineweaver-Burk-kaavion perusteella molemmat peptidit estivät ACE:tä ei-kompetitiivisesti. Peptidien ja ACE:n välinen molekulaarinen telakointisimulaatio tuki peptidien vetysidosten muodostumista ACE:n aktiivisten taskujen kanssa. Tämä tutkimus osoittaa, että voi olla mahdollista käyttää näitä molempia peptidejä tai longansiemenproteiinihydrolysaatteja funktionaalisten elintarvikkeiden ainesosien luomiseksi tai sellaisten lääkevalmisteiden tuottamiseksi, jotka kykenevät alentamaan verenpainetautia.

Jätä kommentti