Immunocytochimie dans la néoplasie intraépithéliale et le cancer invasif
Pour classer la néoplasie cervicale intraépithéliale, cytopathologistes s’appuient sur des critères cytomorphologiques tels que l’hyperchromasie nucléaire, les atypies nucléaires et les rapports nucléocytoplasmiques. Cette forme de classification ne permet pas de prédire le comportement biologique des lésions CIN. Un grand nombre de marqueurs biologiques ou de biomarqueurs de substitution, largement applicables aux tissus cervicaux histologiques, ont été développés. Ces marqueurs sont généralement présentés comme « très prometteurs » pour prédire correctement le comportement régressif ou progressif des lésions cervicales. Dans la pratique quotidienne, l’applicabilité de ces marqueurs est plutôt décevante. Comme les premières observations suggèrent que la CIN implique un dysfonctionnement progressif de l’activité proliférative des cellules épithéliales cervicales, la plupart des marqueurs biologiques développés sont des protéines qui jouent un rôle crucial dans les voies de régulation du cycle cellulaire. Nous renvoyons au chapitre 1 pour une présentation détaillée de ces marqueurs biologiques, spécialement équipés pour l’histologie cervicale. En cytologie cervicale, le choix des marqueurs biologiques est historiquement beaucoup plus limité, puisque le dépistage se fait à partir des frottis colorés par Papanicolaou et qu’il n’y a généralement pas de matériel restant pour des recherches supplémentaires. En outre, si l’on veut que l’immunocytochimie sur des échantillons cytologiques humides directs, comme la cytologie en milieu liquide, soit couronnée de succès, une fixation légère et brève dans des alcools ou de l’acétone est nécessaire. Ce n’est que dans les laboratoires hautement qualifiés et bien contrôlés que cette fixation légère peut être effectuée correctement, de sorte que des résultats reproductibles de coloration immunocytochimique puissent être obtenus. Ce problème ne se pose pas en histologie en raison de la fixation de routine robuste des tissus dans le formol.
Le développement d’anticorps monoclonaux (mAbs) spécifiques des chaînes de kératines individuelles permet la distinction immunocytochimique entre les cellules de réserve, la métaplasie pavimenteuse immature et mature, et l’épithélium cylindrique pavimenteux et endocervical normal, ainsi qu’entre les différents types d’anomalies épithéliales (CIN grades 1, 2 et 3).123,228-230
En utilisant plusieurs anticorps monoclonaux dirigés contre différents épitopes du même polypeptide de kératine (par exemple, différents AcM contre la kératine 18), il est possible de détecter des altérations structurelles résultant d’une activité biologique ou d’une transformation néoplasique. Le degré de différenciation d’un cancer épidermoïde peut être déterminé par l’utilisation d’anticorps dirigés contre la kératine 10 ou 13. La kératine 10 est un marqueur de la kératinisation. Elle peut être exprimée dans les cellules des couches les plus superficielles de l’épithélium pavimenteux, même lorsqu’aucun signe de kératinisation n’est détectable au microscope optique.
Les AcM à réaction croisée large donnent des réactions positives dans pratiquement tous les tissus épithéliaux et les cancers épithéliaux primaires et métastatiques, y compris les carcinomes épidermoïdes de différents grades de différenciation et les carcinomes anaplasiques à petites cellules. Les anticorps dirigés contre la kératine 18 peuvent, entre autres, reconnaître les adénocarcinomes mais ne réagissent normalement pas avec les carcinomes épidermoïdes.231 Les adénocarcinomes sont presque toujours négatifs pour les kératines 5, 10, 13 et 16. Les carcinomes épidermoïdes sont presque toujours positifs pour les kératines 5, 10 et 13. L’expression de la kératine 16 est limitée aux carcinomes épidermoïdes kératinisants. Les AcM de la kératine 7 ne donnent en général aucune réaction de coloration avec les épithéliums pavimenteux (kératinisation). Cet anticorps réagit avec les cellules cylindriques du col de l’utérus.232
Moll et ses collaborateurs ont montré la présence des cytokératines 5, 7, 8, 17, 18 et 19 dans la métaplasie pavimenteuse immature et un schéma modifié d’expression des kératines dans l’épithélium pavimenteux mature et la dysplasie légère233 (Fig. 8.125). Ils ont trouvé un schéma similaire dans le carcinome invasif et dans l’épithélium pavimenteux mature.
Smedts et ses collègues, dans l’épithélium cervical anormal, ont trouvé que les cytokératines 10, 11, 13 et 16 étaient distribuées de façon irrégulière dans les CIN de grade 3.234,235 Ils ont noté un schéma de distribution de la positivité parcellaire. Les zones de positivité alternaient avec des zones négatives. Ils n’ont pas pu mettre en évidence un changement cohérent et progressif du contenu en cytokératine de l’épithélium normal aux grades 1 et 2 de CIN. Leurs observations suggèrent qu’un changement brutal s’est produit au moment du développement de la lésion morphologiquement décrite comme une CIN de grade 3. Les lésions CIN de grade 2 dans les invaginations du canal endocervical présentaient un profil identique aux lésions de la surface du canal. La coloration des CIN de grade 3 était comparable à celle des carcinomes épidermoïdes invasifs. Puts et ses collaborateurs ont utilisé des anticorps anti-cytokératine contre les kératines et n’ont trouvé aucune différence qualitative dans les réactions de coloration entre les lésions épithéliales de différents degrés de gravité.236 Ils ont trouvé un nombre variable de cellules de Langerhans dans 32 lésions dysplasiques mais aucun modèle spécifique de distribution entre les lésions de différents degrés de gravité.6 Ils ont émis l’hypothèse que les différences dans le nombre de cellules de Langerhans pourraient être corrélées à des différences dans les processus dysplasiques, ainsi qu’à des différences dans la réponse de l’hôte, et pourraient donc potentiellement être un indicateur d’une tendance à la régression ou à la progression.
Smedts et ses collaborateurs ont étudié l’expression des kératines dans les épithéliums cervicaux normaux, l’épithélium métaplasique et les CIN de grades 1, 2 et 3, à l’aide d’un panel d’AcM spécifiques de la chaîne237,238. Cela a permis de détecter les kératines individuelles 4, 5, 7, 8, 10, 13, 14, 18 et 19 au niveau de la cellule unique. Les résultats ont montré que pendant la transformation des cellules de réserve en métaplasie pavimenteuse immature, cet épithélium a acquis des kératines typiques de l’épithélium pavimenteux ectocervical, tandis que les kératines typiques des cellules de réserve et des cellules cylindriques ont été perdues. Ce changement s’est poursuivi au cours de la différenciation ultérieure en métaplasie pavimenteuse mature. La transformation prémaligne a entraîné une perte partielle des kératines typiques de l’épithélium pavimenteux et l’acquisition de kératines atypiques des épithéliums simples.
Au cours de l’augmentation des atypies épithéliales à travers les grades 1 à 3 des néoplasies intraépithéliales, les kératines caractéristiques des épithéliums simples apparaissent dans les lésions dysplasiques (Fig. 8.126). Dans les CIN de grade 1, environ la moitié et dans les CIN de grade 2 (dysplasie modérée), un tiers des cas présentent une certaine positivité dispersée pour les kératines 8 et 18, tandis que la kératine 19, qui dans l’épithélium pavimenteux mature tache les couches basales, présente maintenant une perte de polarité et tache une partie croissante de l’épaisseur totale de l’épithélium dysplasique, souvent selon un schéma irrégulier.
Par rapport à l’épithélium pavimenteux mature, l’expression des kératines 4, 5, 13 et 14 a diminué et le motif de coloration est devenu variable (Figs 8.127 et 8.128). Cela indiquait que l’épithélium dysplasique lié à la progression de la gravité de l’anomalie perdait progressivement son phénotype kératinique squameux et acquérait les caractéristiques kératiniques de l’épithélium simple.
Ces changements étaient encore plus évidents dans les cas de CIN de grade 3 ; dans tous les cas, l’expression des kératines 8 et 18 était abondante et l’expression des kératines 13 et 14 diminuait, devenant complètement absente dans certaines zones. Cela soulignait l’expression accrue d’un motif de kératine caractéristique d’un épithélium simple avec un changement dysplasique croissant.
Les kératines 8, 18 et 19 ont été trouvées dans les carcinomes épidermoïdes cervicaux ainsi que dans les adénocarcinomes. L’expression de ces kératines dans les cellules de réserve pourrait indiquer que ces cellules sont les cellules progénitrices communes avec un double potentiel de différenciation, d’une part par une phase de métaplasie en anomalies épithéliales squameuses et, d’autre part, par une différenciation en anomalie de type cellule colonnaire. La double expression des kératines de type spinocellulaire et de type cylindrique dans la métaplasie squameuse immature semble soutenir cette hypothèse228,229
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