Abstract
L’IgG peut être purifiée à partir du sérum par une procédure simple de chromatographie d’échange d’ions en une étape. Cette méthode est largement utilisée et fonctionne sur le principe que l’IgG a un point isoélectrique plus élevé ou plus basique que la plupart des protéines sériques. Par conséquent, si le pH est maintenu en dessous du point isoélectrique de la plupart des anticorps, les immunoglobulines ne se lient pas à un échangeur d’anions et sont séparées de la majorité des protéines sériques liées à la matrice de la colonne. La grande capacité des colonnes échangeuses d’anions permet la purification à grande échelle des IgG à partir du sérum. Le groupe réactif d’échange d’anions, le diéthylaminoéthyle (DEAE) lié de manière covalente au Sepharose (par exemple, le DEAE Sepharose CL-6B, Pharmacia, Uppsala, Suède) est utile à cette fin. Elle est fournie pré-gonflée et prête à être introduite dans une colonne, elle est robuste et possède une grande capacité de liaison. En outre, elle est relativement stable aux changements de force ionique et de pH. D’autres matrices (par exemple, la DEAE cellulose) sont fournies sous forme de solides, et nécessiteront donc une préparation et une équilibration (1).