Kategória béta-laktamáz gátló.
A klavulanát kálium legalább 75,5 százalék és legfeljebb 92,0 százalék C8H9NO5 egyenértéket tartalmaz, vízmentes anyagra számítva.
Kiszerelés és tárolás A klavulanát káliumot szorosan zárt tartályban kell tartani, és 2º és 8º közötti hőmérsékleten kell tárolni.
Címkézés A tartályon lévő címkén fel kell tüntetni (1) a tárolási állapotot; (2) parenterális vagy nem parenterális minőséget.
Identifikáció
A. Az Assay-készítmény kromatogramja, amelyet az Assay utasításai szerint kapott, a klavulánsav fő csúcsát mutatja, amelynek retenciós ideje megegyezik az Assay utasításai szerint kapott Standard-készítmény kromatogramján láthatóval.
B. A káliumsókra jellemző reakciókat ad (5.1. függelék).
pH 5,5-8,0, 1,0 tömegszázalékos oldatban (4.11. függelék).
Víz Legfeljebb 1,5 tömegszázalék (Karl Fischer-módszer, 4.12. függelék).
Klavam-2-karboxilát kálium Legfeljebb 0,01 százalék. Végezzük el a meghatározást a “Nagynyomású folyadékkromatográfia” (3.5. függelék) pontban leírtak szerint.
Mobil fázis Készítsünk 0,1 M nátrium-dihidrogén-foszfátot, állítsuk be foszforsavval 4,0±0,1 pH-ra, és szűrjük 0,5 μm-es vagy finomabb porozitású membránszűrőn keresztül. Szükség esetén végezze el a beállításokat. Standard oldat Oldjuk fel a Clavam-2-karboxilát kálium RS-t vízben, hogy olyan oldatot kapjunk, amelynek ismert koncentrációja kb. 40 μg/ml.
Vizsgálati oldat Adjunk kb. 100 mg pontosan lemért Clavulanát káliumot egy 10 ml-es mérőlombikba, oldjuk fel és hígítsuk vízzel térfogatig, majd keverjük össze.
Megoldó oldat Oldjunk fel megfelelő mennyiségű klavulanát-káliumot standard oldatban, hogy olyan oldatot kapjunk, amely kb. 1 mg klavulanát-káliumot és 30 μg klavam-2-karboxilát-káliumot tartalmaz ml-enként.
Kromatográfiás rendszer A kromatográfiás eljárás elvégezhető a) egy rozsdamentes acél oszlop (30 cm × 4 mm) segítségével, amelyet kémiailag porózus szilícium-dioxid vagy kerámia mikroszemcsékhez (3-10 μm) kötött oktadecilszilánnal töltöttek meg, b) 0,5 ml/perc áramlási sebességű mobil fázis és c) 210 nm-re beállított ultraibolya fotométer segítségével.
A kromatográfiás rendszer alkalmasságának meghatározásához kromatografáljuk a standard oldatot, és rögzítsük a csúcsválaszokat az Eljárás pontban leírtak szerint: a szimmetriatényező nem több mint 1,5 és a relatív standard eltérés az ismétlődő injekciók esetében nem több mint 2,0 százalék. Kromatografáljuk a felbontó oldatot, és jegyezzük fel a csúcsválaszokat az eljárás szerint: a felbontási tényező a klavam-2-karbonsav és a klavulánsav csúcsok között nem kisebb, mint 1,0.
Eljárás Külön-külön azonos mennyiségű (kb. 20 μl) standard oldatot és tesztoldatot injektálunk a kromatográfba, rögzítjük a kromatogramokat, és megmérjük a fő csúcsok válaszait. A relatív retenciós idők a klavam-2-karbonsav esetében körülbelül 0,7, a klavulánsav esetében pedig 1,0. Számítsa ki a klavam-2-karboxilát kálium százalékos arányát
A metanol és a tert-butil-amin határértéke Legfeljebb 0,1 tömegszázalék metanol vagy legfeljebb 0,2 tömegszázalék tert-butil-amin. Végezzük el a meghatározást a “Gázkromatográfia” című fejezetben (3.4. függelék) leírtak szerint.
Standard oldat Egy 100 ml-es mérőlombikba, amely 50,0 ml 3 M nátrium-hidroxidot tartalmaz, adjunk kb. 6 ml metanolt és 12 ml tert-butil-amint, mindkettőt pontosan mérjük meg, hígítsuk 3 M nátrium-hidroxiddal térfogatra, és keverjük össze. Vigyünk át 10,0 ml-t ebből a törzsoldatból egy második 100 ml-es mérőlombikba, hígítsuk 3 M nátrium-hidroxiddal térfogatra, és keverjük össze. Vigyünk át 10,0 ml-t ebből az oldatból egy harmadik 100 ml-es mérőlombikba, hígítsuk 3 M nátrium-hidroxiddal térfogatra, és keverjük össze. Vigyünk át 7,0 ml-t ebből az oldatból egy negyedik 100 ml-es mérőlombikba, adjunk hozzá 3,0 ml 3 M nátrium-hidroxidot, hígítsuk 4-metil-2-pentanonnal térfogatig, és keverjük össze. Hagyjuk a fázisokat elválni, és a tiszta metil-izobutil-keton réteget használjuk Standard oldatként. Ez az oldat kb. 36,6 μg metanolt és 63,8 μg tertbutilamint tartalmaz ml-enként. Ezt az oldatot 5 órán belül használja fel.
Tesztoldat Adjon kb. 3 g pontosan lemért klavulanát-káliumot egy 100 ml-es mérőlombikba, adjon hozzá 10,0 ml 3 M nátrium-hidroxidot, és rázza, amíg feloldódik. Hagyjuk hideg vízfürdőben lehűlni, hígítsuk 4-metil-2-pentanonnal térfogatig, zárjuk le a lombikot, és rázzuk erőteljesen 3 percig, időnként szellőztetve. Hagyjuk a fázisokat szétválni, és a tiszta metil-izobutil-keton réteget használjuk tesztoldatként. Ezt az oldatot 5 órán belül használjuk fel.
Kromatográfiás rendszer A kromatográfiás eljárás elvégezhető a) dimetil-polisziloxán olaj állófázissal bevont üvegoszlop (30 m × 0,32 mm) használatával, amelyet 40º-on tartunk, majd percenként 55º-os sebességgel 200º-ra programozzuk, és 4 percig ezen a hőmérsékleten tartjuk, b) az injekciós nyílást és a detektorblokkot 150º-on tartjuk, c) nitrogén mint vivőgáz, és d) lángionizációs detektor. A kromatográfiás rendszer alkalmasságának meghatározásához kromatografálja a standard oldatot, és rögzítse a metanol, a tert-butil-amin és a metil-izobutil-keton csúcsválaszait az eljáráshoz előírtak szerint: a szimmetriatényező nem több, mint 1.6 a metanol- és a tert-butil-amin-csúcsok esetében; az oszlop hatékonysága nem kevesebb, mint 25 000 elméleti lemez; a felbontási tényező a metanol-csúcs és a tert-butil-amin-csúcs között nem kevesebb, mint 20, valamint a tert-butil-amin-csúcs és a 4-metil-2-pentanon-csúcs között nem kevesebb, mint 10; és a relatív standard eltérés az ismételt injekciók esetében nem több, mint 10 százalék.
Eljárás Külön injektáljunk azonos térfogatú (kb. 1 μl) standard oldatot és tesztoldatot a kromatográfba, rögzítsük a kromatogramokat, és mérjük meg a metanol és a tert-butilamin csúcsok válaszainak területét.
Kalkuláció Számítsuk ki a metanol és a tert-butilamin százalékos arányát a klavulanát-káliumban.
Kromatográfiás tisztaság Végezzük el a meghatározást a “Nagynyomású folyadékkromatográfia” című fejezetben leírtak szerint (3. függelék.5).
A oldat Készítsen 0,05 M nátrium-dihidrogén-foszfát oldatot, állítsa be foszforsavval 4,0±0,1 pH-ra, és szűrje át 0,5μm-es vagy finomabb porozitású szűrőn.
B oldat Készítse el az A oldat és a metanol azonos térfogatú keverékét.
Mobil fázis Használja az A és B oldat változó keverékeit a kromatográfiás rendszerhez előírtak szerint. Szükség szerint módosítsa bármelyik oldatot.
Standard oldat Készítse el a Clavulanate Lithium RS oldatát az A oldatban, amelynek ismert koncentrációja kb. 0,1 mg/ml.
Tesztoldat Készítse el a Clavulanate Kálium oldatát az A oldatban, amely 10 mg/ml koncentrációjú.0 mg/ml.
Rezolúciós oldat Készítsük el a klavulanát-lítium RS és az amoxicillin oldatát A oldatban, amely mindegyikből 0,1 mg/ml-t tartalmaz.
Kromatográfiás rendszer A kromatográfiás eljárás elvégezhető a) rozsdamentes acél oszlop (10 cm × 4 cm) használatával.6 mm), amelyet kémiailag porózus szilícium-dioxid vagy kerámia mikroszemcsékhez (3-10 μm) kötött oktadecilszilánnal töltöttek meg, és amelyet állandó, kb. 40º-os hőmérsékleten tartanak, (b) mozgófázis kb. 1 ml/perc áramlási sebességgel, és (c) 230 nm-re beállított ultraibolya-fotométer.
A rendszer úgy van programozva, hogy A és B oldat változó keverékeiből álló mobilfázist biztosítson. A rendszert 15 percig 100 százalékos A oldattal egyensúlyban tartják, és a vizsgált oldat befecskendezése után 4 percig tartják ebben az összetételben, majd a B oldat arányát 11 perc alatt lineárisan növelik 0-ról 50 százalékra. A rendszert 3 percig tartjuk ezen az összetételen, majd 6 percig 100 százalékos A oldatra váltunk. A kromatográfiás rendszer alkalmasságának meghatározásához kromatografálja a felbontó oldatot, és rögzítse a csúcsválaszokat az eljárásra vonatkozó utasítás szerint: a relatív retenciós idők az amoxicillin esetében körülbelül 2,5 és a klavulánsav esetében 1,0; a klavulánsav-csúcs szimmetriatényezője nem több mint 2,0; a klavulánsav-csúcsból meghatározott oszlophatékonyság nem kevesebb, mint 2000 elméleti lemez; és a felbontási tényező a klavulánsav-csúcs és az amoxicillin-csúcs között nem kevesebb, mint 13. A kromatográfiás rendszer kromatográfiáját a következő módon végezzük el: az amoxicillin és a klavulánsav-csúcs relatív retenciós ideje nem kevesebb, mint 1,0. Kromatografálja a standard oldatot, és rögzítse a csúcsválaszokat az eljárásra vonatkozó utasítás szerint: az ismétlődő injektálások relatív standard eltérése nem több mint 2 százalék.
Eljárás Külön-külön azonos térfogatú (kb. 20 μl) standard oldatot és tesztoldatot injektáljon a kromatográfba, rögzítse a kromatogramokat, és mérje a csúcsválaszokat.
Kalkuláció Számítsa ki az egyes szennyeződések százalékos arányát, klavulanát kálium-egyenértékben kifejezve, a vett klavulanát káliumban a következő kifejezéssel:
10(237.3/205,1)(C)(ri/rS),
melyben 237,3 a klavulanát-kálium molekulatömege; 205.1 a klavulanát-lítium molekulatömege; C a klavulanát-kálium RS koncentrációja mg/ml-ben a standard oldatban; ri az egyedi szennyeződéscsúcs csúcsválasza a tesztoldatból kapott kromatogramon; és rS a klavulánsav csúcsválasza a standard oldatból kapott kromatogramon. Az összes szennyezőanyag-csúcsok összege nem haladja meg a 2 százalékot.
Vizsgálat Végezze el a meghatározást a “Nagynyomású folyadékkromatográfia” (3.5. függelék) című fejezetben leírtak szerint.
pH 4,4 Nátrium-foszfát puffer Oldja fel a 7. sz.8 g nátrium-dihidrogén-foszfátot 900 ml vízben, állítsuk be foszforsavval vagy 10 M nátrium-hidroxiddal 4,4±0,1 pH-értékre, hígítsuk vízzel 1000 ml-re, és keverjük össze.
Mobil fázis Készítsünk megfelelő keveréket 95 térfogat pH 4,4 nátrium-foszfát pufferből és 5 térfogat metanolból. Szükség esetén végezzünk módosításokat.
Szokásos készítmény Oldjunk fel pontosan lemért mennyiségű Clavulanate Lithium RS-t vízben, hogy olyan oldatot kapjunk, amelynek ismert koncentrációja kb. 250 μg/ml.
Próbakészítmény Vigyen át kb. 50 mg pontosan lemért klavulanát-káliumot egy 200 ml-es mérőlombikba, oldja fel és hígítsa fel vízzel térfogatig, majd keverje össze.
Megoldó oldat Oldjon fel megfelelő mennyiségű amoxicillint a Standard készítményben, hogy olyan oldatot kapjon, amely kb. 0,5 mg amoxicillint és 250 μg klavulanát-lítiumot tartalmaz ml-enként.
Kromatográfiás rendszer A kromatográfiás eljárás elvégezhető a) egy rozsdamentes acél oszlop (30 cm × 4 mm) használatával, amelyet kémiailag porózus szilícium-dioxid vagy kerámia mikroszemcsékhez (3-10 μm) kötött oktadecilszilánnal töltöttek meg, b) kb. 2 ml/perc áramlási sebességű mobil fázis és c) 220 nm-re beállított ultraibolya fotométer segítségével.
A kromatográfiás rendszer alkalmasságának meghatározásához kromatografálja a felbontó oldatot, és rögzítse a csúcsválaszokat az Eljárás pontban leírtak szerint: az amoxicillin és a klavulánsav csúcsok közötti felbontási tényező nem kevesebb, mint 3,5, és a relatív retenciós idők körülbelül 0,5 a klavulánsav és 1,0 az amoxicillin esetében. Kromatografálja a standardkészítményt, és rögzítse a csúcsválaszokat az Eljárás pontban leírtak szerint: a klavulánsav-csúcs szimmetriatényezője nem több mint 1,5, és az ismétlő injekciók relatív standard eltérése nem több mint 2,0 százalék.
Eljárás Külön injektáljunk azonos térfogatú (kb. 20 μl) standard készítményt és vizsgálati készítményt a kromatográfba, rögzítsük a kromatogramokat, és mérjük meg a fő csúcsok válaszait.
Kalkuláció Számítsuk ki a C8H9NO5-tartalmat a Clavulanate Potassiumban a Clavulanate Lithium RS-ben megadott C8H9NO5-tartalom alapján.
Meghatározzuk a C8H9NO5-tartalmat a Clavulanate Lithium RS-ben.