A mikrokefália ASPM génje proliferáló szövetekben expresszálódik és egy mitotikus orsó fehérjét kódol

Az elsődleges autoszomális recesszív mikrokefália (MCPH) leggyakoribb oka a neurogenezis szabályozásában részt vevő ASPM gén mutációja. Az előre jelzett géntermék két feltételezett N-terminális kalponin-homológia (CH) domént és egy blokk feltételezett kalmodulin-kötő IQ-domént tartalmaz, amely közös az aktinkötő citoszkeletális és jelátviteli fehérjékben. Korábbi, egéren végzett vizsgálatok arra utalnak, hogy az ASPM előnyösen kifejeződik a fejlődő agyban. Elemzéseink azt mutatják, hogy az ASPM széles körben kifejeződik magzati és felnőtt szövetekben, és malignus sejtekben felszabályozott. Több alternatív splicelt változatot azonosítottunk, amelyek feltételezett ASPM izoformákat kódolnak különböző számú IQ-motívummal. A fő ASPM transzkriptum 81 IQ domént tartalmaz, amelyek többsége magasabb rendű ismétlődő (HOR) szerkezetbe szerveződik. Egy másik kiemelkedő spliced forma a 18. exon in-frame delécióját tartalmazza, és 14 IQ-domént kódol, amelyek nem HOR-ba szerveződnek. Ez a változat egérben konzerválódott. Más splicing-változatokat is kimutattak, amelyekből mind a CH-domének, mind az IQ-motívumok egy része hiányzik, ami potenciálisan eltérő funkciójú izoformák létezésére utal. A humán ASPM biokémiai funkciójának tisztázása érdekében peptidspecifikus antitesteket fejlesztettünk ki az ASPM N- és C-terminálisához. A tenyésztett humán és egér sejtekből származó fehérjék Western analízise során az antitestek a prediktált ASPM izoformáknak megfelelő mozgékonyságú sávokat detektáltak. A tenyésztett emberi sejtek antitestekkel történő immunfestése kimutatta, hogy az ASPM a mitózis során az orsópólusokban lokalizálódik. Ez az eredmény arra utal, hogy az MCPH a mitotikus orsószabályozás károsodásának következménye az ASPM mutációi miatt a kérgi progenitorokban.

Szólj hozzá!