Autoradiográfia

Autoradiography

Autoradiográfia egy Southern Blot

Az autoradiográfia a technikák azon csoportja, amelyben a radioizotóppal jelölt biológiai anyag helyzete autoradiogramot (“önképet”) készít. Az olyan radioizotópok, mint a 14C, 32P, 35S olyan sugárzást bocsátanak ki, amely fényképészeti vagy röntgenfilmet exponál. A 32P-nek a DNS gerincébe vagy a 35S-nek a kéntartalmú aminosavakba történő behelyettesítésével a megjelölt molekulák kimutathatók..

Egy Southern Blot szűrőt egy fényálló kazettásdobozba (balra) helyeznek, és egy röntgenfilm lapot helyeznek rá. A kazettát lezárják, és néhány órától több napig hagyják állni. A radioizotóppal jelölt DNS exponálja a filmet, amely előhíváskor fekete sávok mintázatát mutatja, amelyek a jelölt DNS helyét jelzik a blotban. A négy sarok közül háromban speciális tintával, amely szintén exponálja a filmet, igazodási jelek készülnek. A folt a három indexjel segítségével igazítható a filmhez (a jelekkel csak egy igazítás lehetséges). Egyes kísérletek során az igazítás segítségével meg lehet találni egy adott DNS-sávot a folton, és azt ki lehet vágni, hogy a DNS-t további kísérletekhez visszanyerjük.

Szólj hozzá!