Az alfa/béta és gamma/delta kettős negatív (DN) T-sejtek termelődése és szerepük a terhesség fenntartásában

A hidrokortizon és dexametazon expozíciót követően a timociták apoptotikusak lesznek és sejthalált szenvednek . Azt, hogy a nemi szteroidok okoznak-e apoptózis útján timocita pusztulást, számos olyan vizsgálatban vizsgálták, amelyben az állatokat ösztrogén beadásának vetették alá. Az eredmények sajnos a konszenzus hiánya miatt voltak figyelemre méltóak. Az ösztrogénkezelés egyes vizsgálatokban a timociták apoptózisának növekedését eredményezte, míg más jelentésekben az ösztrogénkezelés az apoptotikus halálozásnak alig vagy egyáltalán nem volt nyoma. A jelenség egy további vizsgálatában Zoller és munkatársai azt találták, hogy a vemhes egereknél kiterjedt thymocyta-veszteség és thymikus involúció következik be anélkül, hogy a thymocyta apoptózisra valaha is sor kerülne. Vemhes egerekben az ösztrogénszint 7 ng/ml és 13 ng/ml között mozog . Azokban a vizsgálatokban, amelyek a timocita apoptózis nagy gyakoriságáról számoltak be, az állatokba ezeket az értékeket jóval meghaladó ösztrogénszintet fecskendeztek . Így, mivel nincs bizonyíték arra, hogy a fiziológiás ösztrogénszintek apoptózist okoznak, ez a folyamat kizárható a thymicus involúció és a thymocytavesztés okaként.

Egyes kutatók azt javasolták, hogy a thymocytavesztés azért következik be, mert az ösztrogén gátolja a T-sejtek termelődését a prekurzorok szintjén. Ez a feltevés egy olyan vizsgálatból származik, amelyben az ösztrogénkezelés a legkorábbi CD44+ progenitorok szintjének növekedését és a CD4+ és CD8+ T-sejtek valamennyi meghatározott thymocyta-alcsoportjának kimerülését eredményezte . Más kutatók azt javasolták, hogy a thymus involúciója a korai thymus progenitorok ösztrogén-indukált csökkenésének köszönhető . Ezek a vizsgálatok felvetik annak lehetőségét, hogy a timociták elvesztése a T-sejtek termelésének megváltozásából ered.

Martin és munkatársai fény- és elektronmikroszkópia segítségével ösztrogén-indukált timociták elvesztését figyelték meg a patkányok timuszának szubkapszuláris és mély kéregállományában. A medulláris régióban bizonyítékot találtak a kortikomedulláris csomópont közelében elhelyezkedő erek éráteresztő képességének növekedésére. Gyakran láttak limfocitákat vándorolni ezen erek megnagyobbodott falán keresztül. Arra a következtetésre jutottak, hogy “úgy tűnik, hogy a timuszból a limfociták felszabadulása a timusz involúciót kiváltó fő tényező”. Mások megfigyelték, hogy az involválódott thymusokban a nyirokerek tele vannak limfocitákkal (T-sejtekkel) .

Noha nem azonosították őket, ezek a nyirokerek efferens nyirokerek kell, hogy legyenek, mivel a thymusból hiányzik az afferens változat , ami fontos megkülönböztetés.

Oner és Ozan arról számolt be, hogy nőstény patkányok hosszan tartó kezelése (naponta 3 héten át) tesztoszteron vagy ösztrogénnel kiterjedt thymus involúciót okozott. Ezt az involúciót a thymocyták elvesztése kísérte a subcapsularis régióban, valamint a mély kéregben. Az erek a thymus medullában is megnagyobbodtak, amint azt a Martin és munkatársai jelentésében is megfigyelték. Oner és Ozan legjelentősebb megállapítása azonban a hízósejtek azonosítása volt a thymuskapszula kötőszövetében és a thyma medulla stromájában. A kezeletlen kontrollpatkányokban a hízósejtek ritkán voltak eloszolva, míg a szteroiddal kezelt állatokban számuk megnövekedett, és gyakran csomókban voltak megtalálhatók. Az a tény, hogy a hízósejtek vazodilatátorokat választanak ki, kevés kétséget hagy az érrendszeri permeabilitás növekedésének okát illetően; ez lehet az oka annak, hogy az involválódott thymusok tele voltak limfocitákkal . Ami ezeknek a limfocitáknak az azonosságát illeti, az ösztrogénnel injektált és tímuszimplantált meztelen egereken végzett vizsgálatok kimutatták, hogy a “tímuszimsejt-veszteség” a DN T-sejtek két alcsoportjának kiürülésének eredménye . Az egyik alcsoport tipikus αβ T-sejt-receptorral (TCR), a másik pedig egyedi γδ TCR-rel rendelkezett.

T-sejt-termelés

A tímuszmirigy két különálló lebenyből áll, amelyek egy központi medullából és egy külső kéregből állnak. Két kötőszöveti réteg, amelyeket egy sinus választ el egymástól, mindkét lebenyt beburkolja. A legtöbb fajban a kapszulából trabekulák erednek, amelyek áthatolnak a kéregállományon, és a kortikomedulláris átmenetben végződnek, ezáltal szerkezeti kapcsolatot biztosítanak a medullával. Az alapmembrán egy speciális lapított hámot támogat, amely a szubkapszulát és a trabeculákat béleli. Az artériák a kapszulán belül haladnak, majd vagy arteriolaként belépnek a kéregbe, vagy a trabeculákban haladnak tovább, amíg elérik a kortikomedulláris csomópontot, ahol átmennek a medullába. Az arteriolák fokozatosan kisebbek lesznek, és az egész thymusban kapillárisokként folytatódnak, majd végül vénás kapillárisokká alakulnak át, és ezt követően posztkapilláris vénákká (PCV-k) bővülnek. Ezek a venulák végül nagy erekhez vezetnek, amelyek visszavezetnek a trabeculákba, ahol a bejövő artériák közvetlen közelében távoznak .

A vér- és nyirokerek (LV) eloszlása nem egyenletes. Például a kéregből hiányoznak a PCV-k, míg a medulla nagy számban tartalmaz . Ezenkívül a kéreg tartalmaz egy kis kontingenst elágazó LV-ket, amelyek főként a szubkapszuláris régióban helyezkednek el . Ezek az erek a kapszulába és az extralobuláris régióba nyúlnak, és csatlakoznak az efferens nyirokerekhez (ELV-k) . A medullában az LV-k nagyobb számban fordulnak elő, és a kortikomedulláris átmenet régiójában lokalizálódnak. Ezek a trabeculákban csatlakoznak az ELV-khez. A hízósejtek hiányoznak a kéregből, de a közelben megtalálhatók a kapszula kötőszövetében . A medullában a hízósejtek az LV-k és a PCV-k közelében helyezkednek el .

A csontvelőben termelődő T-sejt-elődsejtek a keringési rendszer artériás ágán keresztül jutnak el a thymusba. A mirigybe jutva arteriolákon, valamint artériás és vénás kapillárisokon keresztül haladnak, amíg a PCV-kbe nem érkeznek. A progenitorok ezután egy extravasációnak vagy diapedézisnek nevezett folyamat segítségével jutnak a thymus stromába. A diapedézis olyan erekben zajlik, amelyek fala endotheliumból áll, és nincs izomrétegük, mint például a PCV-k és az LV-k. Az endotélsejtek egyedülállóak abban a tekintetben, hogy a limfociták képesek behatolni a sejtes kapcsolódási pontok közé, majd bejutni vagy a thymus stromába, vagy onnan ki. A limfociták mozgását az ösztrogén által aktivált hízósejtek segítik hisztamin és szerotonin termelésükkel, ami viszont az endotélsejtek sejtes kapcsolódási pontjainak kiszélesedését okozza . A diapedesis a PCV-kben egyirányú és a lymphocyták mozgására korlátozódik a lumenből a thymusba . A tímuszból való kilépéshez a T-sejtek az LV-ket használják, mivel ezek képesek a fordított diapedézisre.

Az 1. és 2. ábra grafikusan ábrázolja a tímociták fejlődését pre- és posztpubertális egerekben. Mindkét ábrán négy térben meghatározott fejlődési szakasz látható a kéregben, amelyeket Lind és munkatársai a CD117 és CD25 progenitor markerek segítségével térképeztek fel. E két marker differenciális expressziója tükrözi a timociták fejlődési változásait, ahogyan azok a kortikomedulláris csomópontból kifelé haladnak a kéregbe. Ebben a folyamatban a timociták mozgását nagymértékben segíti a kéreg meghatározott területein a kérgi hámsejtek által termelt kemokinek és a timocita kemokin receptorok közötti kölcsönhatás. Az 1. szakasz (CD117+CD25-) a kortikomedulláris kapcsolódási ponton kezdődik, és multilineáris potenciállal rendelkező timociták jellemzik. Ezek a sejtek amellett, hogy T-limfocitákat hoznak létre, B-limfocitákká, valamint dendritikus és NK-sejtekké is fejlődhetnek. A 2. stádiumot elérő sejtek (CD117+CD25+) már nem képesek B-limfocitákká és NK-sejtekké válni, de αβ T-sejteket, γδ T-sejteket és dendritikus sejteket hozhatnak létre. Ebben a stádiumban intracelluláris CD3ε fehérje mutatható ki . Ezenkívül a 2. stádiumban jelentős mennyiségű timocita proliferáció történik. A 3. stádiumot elérő sejtek (CD117-CD25+) elkötelezettek a T-sejt vonalra. Az intracelluláris CD3ε fehérjeszintézis változatlanul folytatódik. A TCR β fehérje először ebben a stádiumban mutatható ki. Azok a sejtek, amelyek a TCR β α-lánccal történő produktív átrendeződését expresszálják, kiválasztódnak a proliferációra és a 4. stádiumba jutnak, ezt a folyamatot nevezzük β-szelekciónak. A 4. stádiumban (CD117-CD25-) a timociták elérték a kéreg szubkapszuláris régióját, a TCR a helyén van, és a CD3-komplexhez γ és δ kötő komponensek adódtak hozzá. A legtöbb αβ TCR fejlődési útvonalon haladtak át, és αβ CD4-CD8- kettős negatív (DN) T-sejtként jellemezhetők. A γδ TCR-t kifejlesztett timocitákat γδ DN T-sejteknek nevezzük. Számuk az összes DN T-sejt 5-10%-át teszi ki .

DN T-sejt útvonal

Gamma/delta T-sejtek a fejlődés 4. szakaszán túl nem találhatók a timuszban . Ez azt sugallja : 1) a kifejezetten a kemokin által elősegített utazásuk folytatására szolgáló thymusszövet hiányát; és 2) annak nagy valószínűségét, hogy közvetlenül a termelődésük után elhagyják a thymust. A szubkapszuláris kéregben a közelben elhelyezkedő nyirokerek nagy valószínűséggel a kilépésük eszközei. Egerekben a DN-útvonal már röviddel a születés után működésbe lép, a DN T-sejtek a 4 napos állatok májában és lépében találhatók. Figyelemre méltó, hogy az αβ DN T-sejtek szintje 4:1-szeresen meghaladja a γδ DN T-sejtekét. Az 1. ábrán a γδ DN T-sejtek és az αβ DN T-sejtek javasolt kilépési útvonala látható prepubertális egerekben. Mint látható, a legtöbb T-sejt a medullában található ELV-ken keresztül hagyja el a tímuszt (tömör fekete nyilak). A posztpubertális egerekben (2. ábra) azonban nagyszámú γδ DN T-sejt és αβ DN T-sejt hagyja el a thymust a szubkapszuláris kéregben található ELV-ken keresztül (szolid piros nyilak) a thymus hízósejtjeinek szexszteroidok által kiváltott aktivációja következtében.

A hízósejtek ösztrogén-aktiválása egy membrán-asszociált (nem genomikus) ösztrogén receptor-α (ER-α) révén történik. Ez az aktiváció extracelluláris kalcium beáramlását, valamint hisztamin és szerotonin granulumok szintézisét és felszabadulását eredményezi . A hízósejtek aktiválása 10-11 M és 10-9 M közötti ösztrogénkoncentrációval érhető el (2,7 pg/ml és 270 pg/ml között) . A tesztoszteron aktiválásához az ösztrogén szintjének tízszerese szükséges . A gyenge androgén, a dehidroepiandroszteron (DHEA) aktiválásához az ösztrogén szintjének 1000-szerese szükséges. A dihidrotesztoszteron (DHT) szintén hízósejt-aktivátor . A progeszteron az ösztrogén aktiváció gátlója .

A posztpubertális állatokban az endogén nemi szteroidok olyan szintet érnek el, amely teljes mértékben képes a thymus hízósejtjeinek aktiválására. Például a keringő tesztoszteronszint hím egerekben és patkányokban átlagosan 18,7 ng/ml, illetve 5,8 ng/ml . A nem vemhes nőstény egerekben és patkányokban az ösztrogén szintje 66 pg/ml, illetve 30,6 pg/ml , és vemhes egerekben az ösztrogénszint 7 ng/ml és 13 ng/ml között mozog . Erős bizonyíték arra, hogy az ER-α szerepet játszik az ösztrogén indukálta thymus involúcióban, az ösztrogén receptor knockout egereken (ERKO) végzett vizsgálatok jelzik. Ezekben az állatokban az ER-α nem funkcionál; következésképpen a tímusz csak minimális ösztrogén-indukált involúción megy keresztül.

Klasszikus T-sejt útvonal

A γδ DN T-sejtek sorsával ellentétben az αβ DN T-sejtek megtartják a lehetőséget, hogy fejlődésüket a tímuszban folytassák. Ezt a választási lehetőséget a CD4 és CD8 markerek kifejeződésekor gyakorolják, és az αβ DN T-sejtek CD4+ CD8+ kettős pozitív (DP) T-sejtekké válnak. Ezzel a lehetőséggel élve a DP T-sejtek nyilvánvalóan elveszítik a DN útvonalhoz való hozzáférés képességét. Ez vagy azért van, mert ebben korlátozottak, vagy azért, mert elhagyták a szubkapszuláris LV-k területét. Abo csoportja a DP T-sejtek teljes hiányáról számol be az ösztrogénnel injektált egerek májában található SP T-sejtek és DN T-sejtek pooljában . A következő fejlődési szakaszban a DP T-sejtek pozitív szelekción mennek keresztül, ami az egypozitív (SP) MHC-korlátozott T-sejtek két alcsoportjának keletkezésével egyidejűleg zajlik. Ezek az alcsoportok CD4+ (II. osztályú MHC-korlátozott) és CD8+ (I. osztályú MHC-korlátozott) T-sejtek, és mint ilyenek, továbbhaladnak a medulla felé. Itt negatív deléciónak mennek keresztül, egy olyan folyamatnak, amelyben αβ TCR-jeik ektopikus önantigéneknek vannak kitéve. Ezeknek az antigéneknek a termelése az autoimmun szabályozó (Aire) promotor irányítása alatt áll. A teljesen érett CD4+ Helper, CD4+ CD25+ Foxp3+ szabályozó és CD8+ citotoxikus T-sejtek a medullában található LV-ken keresztül lépnek ki a thymusból (1. ábra, tömör fekete nyilak; 2. ábra, szaggatott piros nyilak).

A DN és SP útvonalak kölcsönhatása

Meg kell jegyezni, hogy valamennyi LV és PCV permeabilitása a szexszteroidok és hízósejtek együttes hatására megnő. Ez a T-sejt-elődsejtek fokozott bejutását és a DN T-sejtek kilépési sebességének fokozódását eredményezi. Ahhoz, hogy képet kapjunk a timuszból a DN útvonalon keresztül kilépő timsósejtek szintjéről, csak meg kell mérni a timsósejtek teljes számát a kasztráció előtt és után. Szerencsére ezt már számos kutató elvégezte. Pesic és munkatársai például arról számoltak be, hogy a thymocyta-szint kasztrált és ép 60 napos Albino-Oxford hím patkányokban 1050 × 106, illetve 650 × 106 volt. Ez arra utalna, hogy a hízósejtek aktivációja elősegítette az összes timocita 38 %-ának kilépését. A jelentések szerint ezek a timociták a kéregből származnak. Egy ép és kasztrált 60 napos nőstény Sprague-Dawley patkányokon végzett vizsgálatban az eredmények azt mutatták, hogy az ösztrogén hatására az összes timocita 44%-a a DN útvonalon keresztül távozott. Egy harmadik, hím és nőstény felnőtt Wistar-albino patkányokon végzett vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy a tesztoszteron és az ösztrogén az összes timocita 31, illetve 30 %-ának csökkenését okozta. Ezek a vizsgálatok bizonyítják a nemi szteroidok hatását a T-sejt-termelés dinamikájának megváltoztatásában. A kasztrált állatban a tímusz főleg SP T-sejteket termel. Termelési idejük 3-5 napot vesz igénybe a kéregben és 12-16 napot a medullában, ami összesen ~21 napot jelent. Az ép állatban jelentős számú DN T-sejt lép ki a tímuszból a DN útvonalon keresztül. Teljes termelődési idejük 3-5 nap. Ezekben az állatokban a thymocyta szint ~ 35%-os csökkenéséről szóló jelentések erősen jelzik, hogy a progenitorok pótlása nem tart lépést a DN T-sejt termeléssel.

Pesic és munkatársai szintén megmérték a thymocyta szinteket ép és kasztrált hím patkányok kéregében és medullájában. Ezen információk birtokában tudtuk megvizsgálni, hogy a DN T-sejtek ürítése milyen hatással van az SP T-sejtek szintjének változására. Például a kasztrált állatban (3. ábra) a thymocyta-szintek összehasonlítása a kéregben és a medullában azt mutatja, hogy az összes thymocyta 2 %-a távozik a DN útvonalon keresztül, és 11 %-a eléri a medullát, hogy SP T-sejtekké alakuljon. Kasztráció nélkül (4. ábra) hasonló összehasonlítás azt mutatja, hogy az összes timocita 38 %-a távozik a DN-úton, és csak 7 %-a éri el a medullát. A DN T-sejtek termelődése tehát a T-sejtek fejlődésének közmondásos “útelágazásának” eredménye. A timociták vagy DN T-sejtként hagyhatják el a tímuszt, vagy maradhatnak a klasszikus T-sejtes úton, és SP T-sejtként távozhatnak. Fejlődési útjukat a nemi szteroidok határozzák meg. Például terhesség alatt, amikor az ösztrogénszint a legmagasabb, nagyszámú T-sejt használja a DN útvonalat. Ennek következtében az SP T-sejtek termelődése a mélyponton van. Becsléseink szerint a vemhesség alatt az összes timocitának csak 2 %-a éri el a medullát.

DN T-sejtek

ADN T-sejtek nem mennek keresztül pozitív szelekción (1. és 2. ábra). Következésképpen hiányzik belőlük az MHC-korlátozás. Ez a tényező, egyedi TCR-ükkel kombinálva, a γδ DN T-sejtek számára olyan kötődési jellemzőket eredményez, amelyek lényegesen eltérnek az MHC-korlátozott αβ T-sejtekétől. Míg az utóbbiak az idegen antigénnek az I. vagy II. osztályú MHC-molekula hasadékában lévő fragmentumaihoz (epitópjaihoz) kötődnek, a γδ DN T-sejtek nem. Ehelyett az idegen antigénhez való kötődésük az ép antigén konformációs alakján alapul, hasonlóan az antitestekhez, és független az MHC részvételétől.

A γδ DN T-sejteknek három fő alcsoportja van, amelyek közül az egyik citolitikus. Emberben ezt az alcsoportot a TCR-en keresztül Vγ9Vδ2 T-sejtként jellemezték . Aktiváláskor interleukin-2-t (IL-2), interferon-γ-t (IFN-γ) és tumor nekrózis faktor-β-t (TNF-β) választanak ki. Ezek a citokinek elősegítik a gyulladást, a citotoxicitást és a késleltetett típusú túlérzékenységet (DTH) . A Vγ9Vδ2 T-sejtek nem hagyományosak, mivel nem fehérjék, például izoprenoidok és alkilaminok okozzák aktiválásukat . Immunológiai aktivitásuk helyszíne a perifériás véráramban van . Itt fontos szerepük van mind a tumorsejtek megfigyelésében, mind a fertőzésellenes immunitásban . A γδ DN T-sejtek második alcsoportja a Vγ9Vδ2 T-sejtek minden jellemzőjével rendelkezik, kivéve, hogy nem citolitikusak. Azért nem azok, mert egy köztes és hiányosan kifejezett TCR/CD3 kötő komplexszel rendelkeznek . A továbbiakban γδ DN (int TCR/CD3) T-sejteknek nevezzük őket. Ahelyett, hogy a véráramban lennének, ezek a T-sejtek bizonyos szövetek, például a bőr, a bél, a légutak és a méh intraepiteliális limfocita kompartmentumaiban tartózkodnak. A γδ DN T-sejtek harmadik alcsoportja a szabályozó sejtek. Egerekben Vγ6Vδ1 szabályozó T-sejtekként jellemzik őket. Ezeknek a γδ DN szabályozó T-sejteknek az aktiválása IL-10 és transzformáló növekedési faktor-β (TGF-β) termelését eredményezi. Ezek a citokinek szabályozzák a citotoxikus T-sejtek, NK-sejtek, makrofágok, dendritikus sejtek és B-sejtek működését . A γδ DN szabályozó T-sejtek szintén meghatározott szövetek intraepiteliális limfocita kompartmentjeire korlátozódnak . A méhben jelentős szerepet játszanak a terhesség fenntartásában.

Immunmoduláció, DN T-sejtek és a terhesség fenntartása

A terhesség fenntartása nagymértékben függ az anyai kilökődés elkerülésétől. Ezt egy immunológiai gát kiépítésével kezelik olyan sejtek felhasználásával, amelyek nem képesek a klasszikus HLA-A és HLA-B termékek kifejezésére . Ezáltal egy védőgubó (trofoblaszt) jön létre, amelyben az MHC I. és MHC II. osztályú molekulák vagy hiányoznak, vagy nem működnek ; ennek következtében az antigének MHC-molekulák általi feldolgozása és bemutatása nem történhet meg. Az SP T-sejtek mint kilökődési tényező így megszűnnek, és csak a γδ DN T-sejtek maradnak a trofoblasztra való válaszadásra. A kilökődés helyett azonban ezek a T-sejtek nélkülözhetetlenek a terhesség fenntartásához. Általános szerepük összetettsége és a koordináció szükségessége kiterjedt kommunikációt igényel a γδ DN T-sejtek, a decidua és a trofoblaszt között. A trofoblaszt például kemokinek termelésén és felszabadításán keresztül kezdeményezi a kapcsolatot a különböző immunsejtekkel. Ezek olyan kis fehérjék, amelyek az immunsejtek receptorainak ligandumaként működnek. Ezeknek az egyedi ligandumoknak a specifikus receptorokhoz való kötődése azt eredményezi, hogy a válaszadó sejtek adhéziós molekulákat termelnek, és ezáltal eszközt kapnak az erek endotheliumához való tapadáshoz. Ezzel a képességgel képesek követni a kemokin koncentrációs gradienst a forrásáig . A γδ DN T-sejtek által termelt citokinek ezzel szemben szélesebb körű alkalmazást foglalnak magukban, mint a kemokinek, mivel specifikus sejtpopulációk növekedését és befogadóképességét befolyásolják.

A trofoblaszt a CXCL12 és CXCL16 kemokinek termelésével vonzza az immunsejteket a magzat-anyai határfelületre. A CXCL12 például a CXCR3 és CXCR4 receptorokkal rendelkező NK sejteket toborozza , a CXCL16 pedig a CXCR6 receptorokkal való kölcsönhatása révén az αβ T-sejteket, a γδ DN T-sejteket és a monocitákat . A terhesség korai és középső szakaszában a decidua elemzése során a következő sejtek jelenlétét azonosították: 1) γδ DN szabályozó T-sejtek; 2) γδ DN (int TCR/CD3) T-sejtek; 3) CD8+ citotoxikus T-sejtek; 4) CD4+ CD25+ Foxp3+ szabályozó T-sejtek; 5) NK-sejtek; 6) dendritikus sejtek; 7) makrofágok; és 8) neutrofilek . Ezek a sejtek mind a kardiovaszkuláris rendszeren keresztül jutottak a deciduába, két kivétellel. A kivételek a γδ DN szabályozó T-sejtek és a γδ DN (int TCR/CD3) T-sejtek. Ez a két alcsoport egy olyan csoportba tartozik, amely a nyirokrendszeren keresztül jut el a célszöveteikhez .

Nem terhes nőknél, egereknél, patkányoknál és nyulaknál a nyirokrendszer nem terjed túl a myometriumon . Ezért a korai terhesség alatt a γδ DN szabályozó T-sejtek és a γδ DN (int TCR/CD3) T-sejtek nem képesek reagálni a CXCL16-ra mindaddig, amíg a lymphangiogenezis (nyirokér növekedése) nem kapcsolja össze az endometriumot a nyirokrendszerrel. Ennek következtében ezek a T-sejtek érik el utoljára a magzat-anyai határfelületet. Késői érkezésük azt jelzi, hogy a limfhangiogenezis valószínűleg nem igényli a bemenetüket, legalábbis ezen a ponton. A folyamatban való részvételük később következik be, és elengedhetetlen a terhesség fenntartásához.

Gamma/delta DN citolitikus T-sejtek találhatók a méhben a terhesség korai szakaszában . Jelenlétük ezen a helyen nagy valószínűséggel a CXCL16-nak köszönhető. E T-sejtek fő funkciója azonban a baktériumok felismerése és elpusztítása, és erősen citolitikusak. Így szokatlan, hogy ezek a sejtek a trofoblaszt közvetlen közelében legyenek anélkül, hogy annak pusztulását okoznák . A trofoblaszt védelme lehet az oka annak, hogy nagyszámú CD4+ CD25+ Foxp3+ szabályozó T-sejt tartózkodik a deciduában . Ezek a szabályozó T-sejtek teljes mértékben képesek a γδ DN citolitikus T-sejtek eliminálására . Figyelemre méltó, hogy a Foxp3+ szabályozó T-sejtek az első immunsejtek között vannak, amelyek belépnek a méhbe, ami azt jelzi, hogy a γδ DN citolitikus T-sejtek belépése előtt a helyükön vannak . A Foxp3+ szabályozó T-sejtek szintje jelentős növekedésen megy keresztül a terhesség alatt , és a decidua a fokozott termelésük fő befogadója . Meg kell jegyezni, hogy a trofoblaszt védelmének ez a formája felső határral rendelkezik, mivel a perifériás γδ DN citolitikus T-sejtek túlzott száma abortuszt okozhat . Ezekben a vizsgálatokban nem számoltak be arról, hogy a γδ DN citolitikus T-sejtek növekedése akut bakteriális fertőzésre vezethető-e vissza . A Foxp3+ szabályozó T-sejtek abortusz megelőzésében való részvételének feltételezett bizonyítékát jelzik azok a jelentések, amelyek szerint azok a nők, akiknek csökkent e T-sejtek szintje, visszatérő vetélésekben szenvednek .

A NK-sejtek jelentős szerepet játszanak a vér- és nyirokerek létrehozásában. Fő feladatuk nagyszámú citokin termelése. Ezek közé tartozik a vaszkuláris endotél növekedési faktor (VEGF), a fibroblaszt növekedési faktor (FGF), a TNF-β, az IFN-γ és az angiopoietinek, hogy csak néhányat említsünk . A vérben lévő NK-sejtek citolitikusak és teljes mértékben képesek elpusztítani a trofoblasztot . A γδ DN citolitikus T-sejtekkel ellentétben azonban nem eliminálódnak. Ehelyett nem citolitikus NK-sejtekké alakulnak át. Ez az átalakulás a TGF-β ellenőrzése alatt áll, és a citolitikus CD56dim CD16+ perifériás NK-sejtek (CD16+ pNK-sejtek) nem citolitikus CD56fényes CD16- méhbeli NK-sejtekké (CD16- uNK-sejtek) való átalakulását jelenti . A pNK sejtek átalakulásához szükséges TGF-β kezdeti forrását a hímivarsejtek biztosítják, és a TGF-β az ejakulátumon keresztül jut el a decidualis területre . A TGF-β-t a deciduális stromasejtek is termelik . A TGF-β általános ellátottsága azonban nem kimeríthetetlen. Az ejakulátumból származó TGF-β nyilvánvaló okokból korlátozott, és a stromasejtek citokintermelő képessége súlyosan veszélyeztetett. Ennek oka, hogy a TGF-β két egyidejű és egymásnak ellentmondó műveletben vesz részt. Amellett, hogy a pNK sejteket uNK sejtekké alakítja át, a TGF-β a beültetésben is részt vesz. Ebben a folyamatban az a szerepe, hogy elindítja a deciduális stromasejtek apoptotikus pusztulását.

Shooner és munkatársai megállapították, hogy a terhes patkány méh stromasejtjei a terhesség 5. és 14. napja között a TGF-β által indukált apoptózis növekedésen mennek keresztül. Ebben az időszakban a stromasejtek vesztesége a két izoforma, a TGF-β1 és a TGF-β2 csökkent termelésével korrelál. A 14. nap után már csak korlátozott mennyiségű TGF-β-t termelnek a stromasejtek túlélői. Pótlás nélkül a TGF-β csökkenése komoly hatással lehet a pNK sejtek uNK sejtekké való átalakulására. Red-Horse megjegyezte, hogy a vemhes egerek endometriumának területén a nyirokerek a 9,0. és a 9,5. embrionális nap között kezdik meg fejlődésüket. Ez azt jelezné, hogy ezeknek a nyirokereknek ~ 5 napjuk van arra, hogy befejezzék fejlődésüket, mielőtt a TGF-β komolyan kimerülne. Ez az időkeret kritikus, mivel a γδ DN szabályozó T-sejtek, a TGF-β fő forrása, csak az újonnan kialakult nyirokereken keresztül juthatnak el a magzat-anyai határfelületre.

A TGF-β-t pleiotróp citokinnak tekintik. Ez a tulajdonsága nyilvánvaló a terhesség fenntartása során. Itt a citokin a pNK sejtek szintjének szabályozásával jelentős hatást gyakorol a nyirokhangiogenezisre . Miközben azonban a TGF-α ezt a funkciót ellátja, önpusztításon megy keresztül a deciduális stromasejtek apoptózisának beindításával . Mindkét folyamat elengedhetetlen a terhesség fenntartásához. Az a kilátás, hogy a citokin a beültetés során kimerül, aggasztó. Olyan forgatókönyveket lehetne elképzelni, amelyekben a sztromasejtek szintje alacsonyabb a normálisnál, vagy ahol a TGF-β által indukált sztromasejt apoptózis gyorsabb ütemben zajlik. Ezekben az esetekben a beültetés sikeres lenne, míg a TGF-β hiánya megváltoztathatná a nyirokerek kialakulását. Ha ez bekövetkezne, ez megakadályozná, hogy a γδ DN szabályozó T-sejtek elérjék a magzat-anyai határfelületet. A TGF-β egyik fő forrásának elvesztése akadályozhatná a pNK sejtek uNK sejtekké való átalakulását. Figyelemre méltó, hogy számos tanulmány számolt be arról, hogy a pNK túlzott szintje a terhes nőkben erősen korrelál a visszatérő spontán vetéléssel .

.