Cél: A közelmúltban számos reverz transzkripciós-PCR technika bizonyult hasznosnak a keringő mikrometasztázisok kimutatására. Az állatkísérletekben prognosztikai értékkel bíró intakt sejtklasztereket azonban így nem lehetett kimutatni. Ebben a tanulmányban egy kereskedelmi forgalomban kapható, citokeratin-alapú, immunmágneses sejtszeparációs módszer értékelését és módosítását végeztük el a kolorektális karcinómás betegek intakt sejtklasztereinek kimutatására.
Kísérleti elrendezés: Harminckét vastagbélrákos beteget (6 volt a Dukes-féle B stádiumban, 13 a C stádiumban és 13 a D stádiumban) és 20 egészséges donor mintát vizsgáltak. A perifériás vérminták (20 ml) buffy coat-jából immunmágneses sejtszeparációt végeztünk a Carcinoma Cell Enrichment Kit (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Németország) segítségével, elkerülve minden szűrési lépést. A feldúsított sejtfrakciót citocentrifugáltuk és immuncitokémiailag megjelöltük pancytokeratin antitest (MNF116; Dako) használatával.
Eredmények: A 20 egészséges minta közül 2 tartalmazott egy citokeratin-pozitív sejtet. A rosszindulatú esetekből származó 32 egyedi minta közül 24 mutatott ki citokeratin-pozitív sejteket. A 24 betegből 22-ben tumorsejt-klasztereket, vegyes sejtkettőst (egy citokeratin-pozitív és -negatív sejt) és vegyes sejtklasztereket mutattak ki. Hat esetben citokeratin-pozitív dendritikus jellegű sejteket mutattak ki. A követéses adatok azt mutatják, hogy a kemoterápia nem képes elpusztítani az összes keringő tumorsejt-klasztert.
Következtetések: A bemutatott módszerekkel sikerült kimutatni a keringő vastagbélráksejteket és sejtklasztereket vastagbélrákos betegeknél. Hasonló sejtstruktúrákat korábban csak patkányokban írtak le. A jelen adatok bizonyítják, hogy ilyen struktúrák jelen vannak a humán vastagbélrákban is.