A membrán alapú citokin tömbök és az egyéb célpontok antitest tömbjeinek előnyei
Az antitest tömbökkel egy kísérletben sok fehérjét lehet egyszerre mérni, és ez jelentősen kevesebb időt, erőfeszítést és költséget jelent, mint az azonos számú analithez szükséges sok ELISA vagy Western blot elvégzése. Más multiplex immunvizsgálatokkal, például a gyöngyalapú vizsgálatokkal összehasonlítva a membrán antitest tömbök nagyon könnyen beállíthatók, és jelentősen olcsóbbak az összehasonlításhoz, ha sok fehérjét kell összehasonlítani kis számú mintán keresztül.
Az antitest tömbök számos előnyt kínálnak:
- Nincs szükség speciális felszerelésre
- A kemilumineszcens kimutatási módszer megegyezik a western blotéval
- Alkalmas bármely kemilumineszcens blot dokumentációs rendszerhez
- Filmes fejlesztő vagy asztali sötétkamra
- Ingyenes denzitométer és foltfelismerő elemző szoftver
- Az NIH-tól ingyenesen letölthető
- Alkalmas a Li-Cor® detektáló rendszerrel Adaptált tömbi protokoll a Li-Cor®
- Nagy detektálási tartomány
- Tartománya 10,000-szeres detektálási tartomány (pg/mL-ben)
- Duplikált antitestfoltok
- Az antitesteket duplikáltan foltozzuk.
- Optimalizált kit
- Az antitest array kit puffereket, detektáló antitesteket és membránokat tartalmaz.
Hogyan működnek a membránalapú antitest array-k?
Az antitest array-k az ELISA-val analóg, antitest-pár alapú vizsgálat, de lemez helyett membránt használunk szubsztrátként. A befogadó antitesteket a membránon elhelyezett tömbökben/pöttyökben szállítjuk, ahol minden egyes pöttyös pár egy másik analitot képvisel. Mintát adunk hozzá (0,2-1 ml 1 mintából minden egyes membránra), majd párosított biotinilált detektorantitesteket és sztreptavidin-HRP-t adunk.
A tömböt ugyanazokkal a módszerekkel elemezzük, mint a kemilumineszcens western blotot. A minták közötti összehasonlítás történhet szemmel vagy denzitometriás szoftver segítségével a félkvantitatív összehasonlításhoz. A teljes vizsgálat egyetlen nap alatt vagy egy éjszakán át tartó inkubációval is elvégezhető.