Categorie Beta-lactamase inhibitor.
Clavulanaatkalium bevat het equivalent van ten minste 75,5 procent en ten hoogste 92,0 procent C8H9NO5, berekend op basis van de watervrije stof.
Verpakking en opslag Clavulanate Potassium moet worden bewaard in goed gesloten recipiënten en bewaard bij een temperatuur tussen 2º en 8º.
Etikettering Op het etiket van de recipiënt staat vermeld (1) opslagconditie; (2) parenterale of niet-parenterale kwaliteit.
Identificatie
A. Het chromatogram van het Assay-preparaat, verkregen volgens de aanwijzingen in de Assay, vertoont een hoofdpiek voor clavulaanzuur, waarvan de retentietijd overeenkomt met die in het chromatogram van het Standaardpreparaat, verkregen volgens de aanwijzingen in de Assay.
B. Het levert de voor kaliumzouten karakteristieke reacties op (aanhangsel 5.1).
pH 5,5 tot 8,0, in een 1,0 procent w/v-oplossing (aanhangsel 4.11).
Water Niet meer dan 1,5 procent w/v (Methode Karl Fischer, aanhangsel 4.12).
Beperking van clavam-2-carboxylaat-kalium Niet meer dan 0,01 procent. Voer de bepaling uit zoals beschreven in “Hogedrukvloeistofchromatografie” (aanhangsel 3.5).
Mobiele fase Bereid 0,1 M natriumdiwaterstoffosfaat, breng met fosforzuur op een pH van 4,0±0,1 en filtreer door een membraanfilter van 0,5 μm of fijner porositeit. Pas zo nodig aan. Standaardoplossing Los Clavam-2-Carboxylate Potassium RS op in water tot een oplossing met een bekende concentratie van ongeveer 40 μg per ml.
Testoplossing Breng ongeveer 100 mg Clavulanate Potassium, nauwkeurig afgewogen, over in een maatkolf van 10 ml, los op in en verdun met water tot de streep, en meng.
Oplossingsoplossing Los een geschikte hoeveelheid clavulanaatkalium op in de standaardoplossing om een oplossing te verkrijgen die ongeveer 1 mg clavulanaatkalium en 30 μg clavam-2-carboxylaatkalium per ml bevat.
Chromatografisch systeem De chromatografische procedure kan worden uitgevoerd met gebruikmaking van a) een roestvrijstalen kolom (30 cm × 4 mm), gevuld met octadecylsilaan dat chemisch is gebonden aan poreuze silica of keramische microdeeltjes (3 tot 10 μm) b) mobiele fase met een stroomsnelheid van 0,5 ml per minuut, en c) een ultraviolet fotometer die is ingesteld op 210 nm.
Om de geschiktheid van het chromatografiesysteem te bepalen, wordt de standaardoplossing gechromatografeerd en worden de piekreacties geregistreerd zoals aangegeven onder Procedure: de symmetriefactor is niet groter dan 1,5 en de relatieve standaardafwijking voor herhaalde injecties is niet groter dan 2,0 procent. Chromatograaf de resolutieoplossing en registreer de piekresponsen zoals aangegeven onder Procedure: de resolutiefactor tussen de clavam-2-carboxylzuur- en clavulaanzuurpieken is minimaal 1,0.
Procedure Injecteer afzonderlijk gelijke volumes (ongeveer 20 μl) standaardoplossing en testoplossing in de chromatograaf, registreer de chromatogrammen en meet de responsen voor de belangrijkste pieken. De relatieve retentietijden zijn ongeveer 0,7 voor clavam-2-carboxylzuur en 1,0 voor clavulaanzuur. Bereken het percentage van clavam-2-carboxylaat kalium
Beperking van methanol en tert-butylamine Niet meer dan 0,1 procent w/w methanol of niet meer dan 0,2 procent w/w tert-butylamine. Voer de bepaling uit zoals beschreven in “Gaschromatografie” (aanhangsel 3.4).
Standaardoplossing Voeg aan een maatkolf van 100 ml met 50,0 ml 3 M natriumhydroxide ongeveer 6 ml methanol en 12 ml tert-butylamine toe, beide nauwkeurig afgewogen, verdun met 3 M natriumhydroxide tot
volume, en meng. Breng 10,0 ml van deze stockoplossing over in een tweede maatkolf van 100 ml, vul aan met 3 M natriumhydroxide tot het volume en meng. Breng 10,0 ml van deze oplossing over in een derde maatkolf van 100 ml, vul aan tot de streep met 3 M natriumhydroxide en meng. Breng 7,0 ml van deze oplossing over in een vierde maatkolf van 100 ml, voeg 3,0 ml 3 M natriumhydroxide toe, vul aan met 4-methyl-2-pentanon tot de streep en meng. Laat de fasen scheiden en gebruik de heldere methylisobutylketonlaag als de standaardoplossing. Deze oplossing bevat ongeveer 36,6 μg methanol en 63,8 μg tertbutylamine per ml. Gebruik deze oplossing binnen 5 uur.
Testoplossing Breng ongeveer 3 g Clavulanate Potassium, nauwkeurig afgewogen, over in een maatkolf van 100 ml, voeg 10,0 ml 3 M natriumhydroxide toe en schud tot het is opgelost. Laat afkoelen in een koud waterbad, verdun met 4-methyl-2-pentanon tot de streep, sluit de erlenmeyer af en schud krachtig gedurende 3 minuten, waarbij af en toe wordt geventileerd. Laat de fasen scheiden en gebruik de heldere methylisobutylketonlaag als de testoplossing. Gebruik deze oplossing binnen 5 uur.
Chromatografiesysteem De chromatografische procedure kan worden uitgevoerd met a) een glazen kolom (30 m × 0,32 mm), bekleed met dimethylpolysiloxaan als stationaire fase, die op 40 ºC wordt gehouden, vervolgens wordt geprogrammeerd om met een snelheid van 55 ºC per minuut te stijgen tot 200 ºC en gedurende 4 minuten op die temperatuur wordt gehouden, b) de injectiepoort en het detectorblok worden op 150 ºC gehouden, c) stikstof als draaggas en d) een vlamionisatiedetector. Om de geschiktheid van het chromatografiesysteem te bepalen, wordt de standaardoplossing gechromatografeerd en worden de piekresponsen van methanol, tert-butylamine en methylisobutylketon geregistreerd zoals aangegeven voor de procedure: de symmetriefactor is niet meer dan 1.6 voor de methanol- en tert-butylaminepieken; de kolomefficiëntie is ten minste 25.000 theoretische platen; de resolutiefactor tussen de methanolpiek en de tert-butylaminepiek is ten minste 20 en tussen de tert-butylaminepiek en de 4-methyl-2-pentanonpiek is ten minste 10; en de relatieve standaardafwijking voor replicaatinjecties is ten hoogste 10 procent.
Procedure Injecteer afzonderlijk gelijke volumes (ongeveer 1 μl) standaardoplossing en testoplossing in de chromatograaf, registreer de chromatogrammen en meet de oppervlakten van de responsen van de methanol- en tert-butylaminepieken.
Berekening Bereken de percentages methanol en tert-butylamine in het Clavulanaat-Kalium.
Chromatografische zuiverheid Voer de bepaling uit zoals beschreven in “Vloeistofchromatografie onder hoge druk” (aanhangsel 3.5).
Berekening Bereken de percentages methanol en tert-butylamine in het Clavulanaat-Kalium.
Chromatografische zuiverheid Voer de bepaling uit zoals beschreven in “Vloeistofchromatografie onder hoge druk” (aanhangsel 3.5).5).
Oplossing A Bereid een oplossing van 0,05 M natriumdiwaterstoffosfaat, breng met fosforzuur op een pH van 4,0±0,1 en filtreer door een filter van 0,5-μm of fijnere porositeit.
Oplossing B Bereid een mengsel van gelijke volumes van oplossing A en methanol.
Mobiele fase Gebruik variabele mengsels van oplossing A en oplossing B zoals aangegeven voor het chromatografiesysteem. Pas zo nodig beide oplossingen aan.
Standaardoplossing Bereid een oplossing van Clavulanaat-Lithium RS in oplossing A met een bekende concentratie van ongeveer 0,1 mg per ml.
Testoplossing Bereid een oplossing van Clavulanaat-Kalium in oplossing A met 10..0 mg per ml.
Oplossing Bereid een oplossing van Clavulanaat-lithium RS en amoxicilline in oplossing A met 0,1 mg van elk per ml.
Chromatografiesysteem De chromatografische procedure kan worden uitgevoerd met a) een roestvrijstalen kolom (10 cm × 4..6 mm) gevuld met octadecylsilaan dat chemisch is gebonden aan poreuze silica- of keramische microdeeltjes (3 tot 10 μm) en op een constante temperatuur van ongeveer 40º wordt gehouden, b) mobiele fase met een debiet van ongeveer 1 ml per minuut, en c) een ultraviolet fotometer die op 230 nm is ingesteld.
Het systeem is geprogrammeerd om een mobiele fase te leveren die bestaat uit variabele mengsels van oplossing A en oplossing B. Het systeem wordt gedurende 15 minuten met 100% oplossing A geëquilibreerd en na injectie van de te onderzoeken oplossing gedurende 4 minuten in deze samenstelling gehouden, waarna het aandeel oplossing B over een periode van 11 minuten lineair wordt verhoogd van 0 tot 50%. Het systeem wordt gedurende 3 minuten in deze samenstelling gehouden, waarna gedurende 6 minuten wordt overgeschakeld op 100% oplossing A. Om de geschiktheid van het chromatografiesysteem te bepalen wordt de resolutieoplossing gechromatografeerd en worden de piekreacties genoteerd zoals aangegeven voor de procedure: de relatieve retentietijden zijn ongeveer 2,5 voor amoxicilline en 1,0 voor clavulaanzuur; de symmetriecoëfficiënt voor de clavulaanzuurpiek is niet meer dan 2,0; het rendement van de kolom, bepaald op basis van de clavulaanzuurpiek, is niet minder dan 2000 theoretische platen; en de resolutiefactor tussen de clavulaanzuurpiek en de amoxicillinepiek is niet minder dan 13. Chromatograaf de standaardoplossing en registreer de piekresponsen zoals aangegeven voor Procedure: de relatieve standaardafwijking voor herhaalde injecties is niet meer dan 2%.
Procedure Injecteer afzonderlijk gelijke volumes (ongeveer 20 μl) standaardoplossing en testoplossing in de chromatograaf, registreer de chromatogrammen en meet de piekresponsen.
Berekening Bereken het percentage, in termen van clavulanaat kaliumequivalent, van elke onzuiverheid in de Clavulanate Potassium genomen door de uitdrukking:
10(237.3/205.1)(C)(ri/rS),
waarbij 237.3 het molecuulgewicht van clavulanaatkalium is; 205.1 het molecuulgewicht van clavulanaat-lithium is; C de concentratie, in mg per ml, van clavulanaat-kalium RS in de standaardoplossing is; ri de piekresponsie is van een afzonderlijke onzuiverheidspiek in het chromatogram, verkregen uit de testoplossing; en rS de clavulaanzuurpiekresponsie is in het chromatogram, verkregen uit de standaardoplossing. De som van alle onzuiverheidspieken is niet meer dan 2%.
Aanalyse Voer de bepaling uit zoals beschreven in “Hogedrukvloeistofchromatografie” (aanhangsel 3.5).
pH 4.4 Natriumfosfaatbuffer Los 7.8 g natriumdiwaterstoffosfaat op in 900 ml water, breng dit met fosforzuur of 10 M natriumhydroxide op een pH van 4,4±0,1, verdun met water tot 1000 ml en meng.
Mobiele fase Bereid een geschikt mengsel van 95 volumedelen pH 4,4 natriumfosfaatbuffer en 5 volumedelen methanol. Pas zo nodig aan.
Standaardbereiding Los een nauwkeurig afgewogen hoeveelheid Clavulanaat-Lithium RS in water op om een oplossing te verkrijgen met een bekende concentratie van ongeveer 250 μg per ml.
Assay-preparaat Breng ongeveer 50 mg nauwkeurig afgewogen Clavulanaat Kalium over in een maatkolf van 200 ml, los op in water, vul aan tot de streep en meng.
Oplossingsoplossing Los een geschikte hoeveelheid amoxicilline op in het standaardpreparaat om een oplossing te verkrijgen die ongeveer 0,5 mg amoxicilline en 250 μg clavulanaat lithium per ml bevat.
Chromatografisch systeem De chromatografische procedure kan worden uitgevoerd met behulp van a) een roestvrijstalen kolom (30 cm × 4 mm), gevuld met octadecylsilaan dat chemisch is gebonden aan poreuze silica of keramische microdeeltjes (3 tot 10 μm), b) mobiele fase met een stroomsnelheid van ongeveer 2 ml per minuut, en c) een ultraviolet fotometer die is ingesteld op 220 nm.
Om de geschiktheid van het chromatografiesysteem te bepalen, wordt een chromatograaf gemaakt van de resolutieoplossing en worden de piekreacties geregistreerd zoals aangegeven onder Procedure: de resolutiefactor tussen de amoxicilline- en de clavulaanzuurpiek is niet kleiner dan 3,5 en de relatieve retentietijden zijn ongeveer 0,5 voor clavulaanzuur en 1,0 voor amoxicilline. Chromatograaf Standaardbereiding, en registreer de piekreacties zoals aangegeven onder Procedure: de symmetrie factor voor clavulaanzuur piek is niet meer dan 1.5 en de relatieve standaardafwijking voor replicaat injecties is niet meer dan 2.0 procent.
Procedure Injecteer afzonderlijk gelijke volumes (ongeveer 20 μl) standaardpreparaat en analysepreparaat in de chromatograaf, registreer de chromatogrammen en meet de respons voor de belangrijkste pieken.
Calculatie Bereken het gehalte aan C8H9NO5 in het ingenomen Clavulanaat-Kalium aan de hand van het opgegeven gehalte aan C8H9NO5 in Clavulanaat-Lithium RS.