Doel: Recent zijn verschillende omgekeerde transcriptie-PCR technieken nuttig gebleken voor de detectie van circulerende micrometastasen. Op deze wijze konden echter intacte celclusters, die in dierexperimenten van prognostische waarde werden gevonden, niet worden opgespoord. In deze studie werd de evaluatie en modificatie van een commerciële, op cytokeratine gebaseerde, immunomagnetische celscheidingsmethode uitgevoerd voor de detectie van intacte celclusters in colorectaalcarcinoompatiënten.
Experimentele opzet: Tweeëndertig colonkankerpatiënten (6 waren in Dukes stadium B, 13 in stadium C, en 13 in stadium D) en 20 gezonde donormonsters werden geëvalueerd. Immunomagnetische celscheiding werd uitgevoerd uit de buffy coat van perifere bloedmonsters (20 ml) met behulp van de Carcinoma Cell Enrichment Kit (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Duitsland), waarbij filtratiestappen werden vermeden. De verrijkte celfractie werd cytocentrifugeerd en immunocytochemisch gelabeld met een pancytokeratine-antilichaam (MNF116; Dako).
Resultaten: Van 20 gezonde monsters, bevatten 2 één cytokeratine-positieve cel. Van 32 afzonderlijke monsters van kwaadaardige gevallen, 24 vertoonden cytokeratine-positieve cellen. Tumorcelclusters, gemengde-cel doublets (één cytokeratine-positieve en -negatieve cel), en gemengde-cel clusters werden gedetecteerd in 22 van 24 patiënten. In zes gevallen werden cytokeratine-positieve dendritine-achtige cellen gedetecteerd. Follow-up gegevens wijzen erop dat chemotherapie niet alle circulerende tumorcelclusters kan vernietigen.
Conclusies: Met behulp van de gepresenteerde methoden konden we circulerende darmkankercellen en celclusters detecteren bij coloncarcinoompatiënten. Soortgelijke cellulaire structuren werden eerder alleen bij ratten beschreven. De huidige gegevens bewijzen dat dergelijke structuren ook aanwezig zijn in menselijke colorectale kanker.