Abstract
IgG kan uit serum worden gezuiverd met behulp van een eenvoudige ionenwisselingschromatografieprocedure in één stap. De methode wordt op grote schaal gebruikt en berust op het principe dat IgG een hoger of basischer iso-elektrisch punt heeft dan de meeste serumeiwitten. Als de pH onder het iso-elektrisch punt van de meeste antilichamen wordt gehouden, binden de immunoglobulinen dus niet aan een anionenwisselaar en worden zij gescheiden van de meeste serumeiwitten die aan de kolommatrix gebonden zijn. De hoge capaciteit van anionenwisselingskolommen maakt grootschalige zuivering van IgG uit serum mogelijk. De anionenwisselingsreactiegroep, diethylaminoethyl (DEAE), covalent gekoppeld aan sepharose (bv. DEAE Sepharose CL-6B, Pharmacia, Uppsala, Zweden) is voor dit doel nuttig. Het wordt voorgeweekt geleverd, is klaar om in een kolom te worden verpakt, is robuust en heeft een hoge bindingscapaciteit. Bovendien is het relatief stabiel bij veranderingen in ionensterkte en pH. Andere matrices (b.v. DEAE-cellulose) worden als vaste stof geleverd en moeten derhalve worden voorbehandeld en geëquilibreerd (1).