Kategoria Inhibitor beta-laktamazy.
Clavulanate Potassium zawiera odpowiednik nie mniej niż 75,5% i nie więcej niż 92,0% C8H9NO5, w przeliczeniu na bezwodną masę.
Pakowanie i przechowywanie Potasu klawulanianu należy przechowywać w szczelnie zamkniętych pojemnikach i przechowywać w temperaturze od 2º do 8º.
Oznaczenie Etykieta na pojemniku podaje (1) warunki przechowywania; (2) klasę pozajelitową lub pozajelitową.
Identyfikacja
A. Chromatogram preparatu testowego otrzymanego zgodnie z zaleceniami zawartymi w teście wykazuje główny pik dla kwasu klawulanowego, którego czas retencji odpowiada czasowi retencji wykazanemu w chromatogramie preparatu wzorcowego otrzymanego zgodnie z zaleceniami zawartymi w teście.
B. Daje reakcje charakterystyczne dla soli potasowych (Dodatek 5.1).
pH 5,5 do 8,0, w roztworze 1,0 procent w/v (Dodatek 4.11).
Woda Nie więcej niż 1,5 procent w/w (Metoda Karla Fischera, Dodatek 4.12).
Limit klawamu-2-karboksylanu potasu Nie więcej niż 0,01 procent. Przeprowadzić oznaczenie w sposób opisany w „Wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej” (dodatek 3.5).
Faza ruchoma Przygotować 0,1 M diwodorofosforan sodu, doprowadzić kwasem fosforowym do pH 4,0±0,1 i przefiltrować przez filtr membranowy o porowatości 0,5 μm lub drobniejszej. W razie potrzeby dokonać korekty. Roztwór wzorcowy Rozpuścić RS klawulanianu-2-karboksylanu potasu w wodzie, aby otrzymać roztwór o znanym stężeniu około 40 μg na ml.
Roztwór badany Przenieść około 100 mg klawulanianu potasu, dokładnie odważonego, do kolby pomiarowej o pojemności 10 ml, rozpuścić w wodzie i rozcieńczyć wodą do kreski, a następnie wymieszać.
Roztwór rozpuszczający Rozpuścić odpowiednią ilość potasu klawulanianu w roztworze wzorcowym, aby otrzymać roztwór zawierający około 1 mg potasu klawulanianu i 30 μg potasu klawamu-2-karboksylanu w 1 ml.
Układ chromatograficzny Procedura chromatograficzna może być przeprowadzona przy użyciu (a) kolumny ze stali nierdzewnej (30 cm × 4 mm) wypełnionej oktadecylosilanem chemicznie związanym z porowatymi mikrocząsteczkami krzemionkowymi lub ceramicznymi (3 do 10 μm) (b) fazy ruchomej przy prędkości przepływu 0,5 ml na minutę oraz (c) fotometru ultrafioletowego ustawionego na 210 nm.
Aby określić przydatność systemu chromatograficznego, należy wykonać chromatografię roztworu wzorcowego i zapisać reakcje piku zgodnie z procedurą: współczynnik symetrii nie przekracza 1,5, a względne odchylenie standardowe dla powtórnych wstrzyknięć nie przekracza 2,0 %. Chromatograf Roztwór Rozdzielczy i zanotować reakcje na piki zgodnie z procedurą: współczynnik rozdzielczości między pikami kwasu klawaminowego-2-karboksylowego i kwasu klawulanowego jest nie mniejszy niż 1,0.
Procedura Oddzielnie wstrzyknąć równe objętości (około 20 μl) roztworu wzorcowego i roztworu badanego do chromatografu, zanotować chromatogramy i zmierzyć reakcje dla głównych pików. Względne czasy retencji wynoszą około 0,7 dla kwasu klawamowego-2-karboksylowego i 1,0 dla kwasu klawulanowego. Obliczyć procentową zawartość klawamu-2-karboksylanu potasu
Limit metanolu i tert-butyloaminy Nie więcej niż 0,1 % wagowych metanolu lub nie więcej niż 0,2 % wagowych tert-butyloaminy. Roztwór wzorcowy Do kolby miarowej o pojemności 100 ml zawierającej 50,0 ml 3 M wodorotlenku sodu dodać około 6 ml metanolu i 12 ml tert-butyloaminy, obydwa dokładnie odważone, rozcieńczyć 3 M wodorotlenkiem sodu do
objętości i wymieszać. Przenieść 10,0 ml tego roztworu podstawowego do drugiej kolby pomiarowej o pojemności 100 ml, rozcieńczyć 3 M wodorotlenkiem sodu do pełnej objętości i wymieszać. Przenieść 10,0 ml tego roztworu do trzeciej kolby pomiarowej o pojemności 100 ml, rozcieńczyć 3 M wodorotlenkiem sodu do pełnej objętości i zmieszać. Przenieść 7,0 ml tego roztworu do czwartej kolby pomiarowej o pojemności 100 ml, dodać 3,0 ml 3 M wodorotlenku sodu, rozcieńczyć 4-metylo-2-pentanonem do pełnej objętości i wymieszać. Pozostawić do rozdzielenia się faz, a klarowną warstwę ketonu metylowo-izobutylowego użyć jako roztwór wzorcowy. Roztwór ten zawiera około 36,6 μg metanolu i 63,8 μg tertbutyloaminy w 1 ml. Roztwór ten należy zużyć w ciągu 5 godzin.
Roztwór badany Przenieść około 3 g klawulanianu potasu, dokładnie odważonego, do kolby miarowej o pojemności 100 ml, dodać 10,0 ml 3 M wodorotlenku sodu i wstrząsać do rozpuszczenia. Pozostawić do schłodzenia w zimnej łaźni wodnej, rozcieńczyć 4-metylo-2-pentanonem do pełnej objętości, zamknąć kolbę korkiem i energicznie wstrząsać przez 3 minuty, od czasu do czasu odpowietrzając. Pozostawić do rozdzielenia faz i użyć klarownej warstwy ketonu metylowo-izobutylowego jako roztworu do badań. Roztwór ten należy zużyć w ciągu 5 godzin.
Układ chromatograficzny Procedura chromatograficzna może być przeprowadzona przy użyciu: a) kolumny szklanej (30 m × 0,32 mm) pokrytej fazą stacjonarną z oleju dimetylopolisiloksanowego i utrzymywanej w temperaturze 40º, następnie programowanej tak, aby wzrastała z szybkością 55º na minutę do 200º i utrzymywanej w tej temperaturze przez 4 minuty, b) portu wtryskowego i bloku detektora utrzymywanych w temperaturze 150º, c) azotu jako gazu nośnego, oraz d) detektora płomieniowo-jonizacyjnego. W celu określenia przydatności systemu chromatograficznego, chromatografować roztwór wzorcowy i zapisać reakcje pikowe metanolu, tert-butyloaminy i ketonu metylowo-izobutylowego zgodnie z procedurą: współczynnik symetrii nie jest większy niż 1.6 dla pików metanolu i tert-butyloaminy; sprawność kolumny jest nie mniejsza niż 25 000 płytek teoretycznych; współczynnik rozdzielczości między pikiem metanolu a pikiem tert-butyloaminy jest nie mniejszy niż 20, a między pikiem tert-butyloaminy a pikiem 4-metylo-2-pentanonu jest nie mniejszy niż 10; oraz względne odchylenie standardowe dla powtórnych wstrzyknięć jest nie większe niż 10 %.
Postępowanie Osobno wstrzyknąć równe objętości (około 1 μl) roztworu wzorcowego i roztworu badanego do chromatografu, zarejestrować chromatogramy i zmierzyć powierzchnie reakcji pików metanolu i tert-butyloaminy.
Obliczenia Obliczyć procentową zawartość metanolu i tert-butyloaminy w potasie klawulanianu.
Czystość chromatograficzna Przeprowadzić oznaczenie w sposób opisany w „Wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej” (dodatek 3.5).
Roztwór A Przygotować roztwór 0,05 M diwodorofosforanu sodu, doprowadzić kwasem fosforowym do pH 4,0±0,1 i przefiltrować przez filtr o porowatości 0,5 μm lub drobniejszy.
Roztwór B Przygotować mieszaninę równych objętości roztworu A i metanolu.
Faza ruchoma Stosować zmienne mieszaniny roztworu A i roztworu B zgodnie z zaleceniami dla układu chromatograficznego. Przygotować roztwór Clavulanate Lithium RS w roztworze A o znanym stężeniu około 0,1 mg na ml.
Roztwór testowy Przygotować roztwór Clavulanate Potassium w roztworze A zawierający 10.0 mg na ml.
Roztwór rozpuszczający Przygotować roztwór Clavulanate Lithium RS i amoksycyliny w roztworze A, zawierający 0,1 mg każdego z nich na ml.
Układ chromatograficzny Procedura chromatograficzna może być przeprowadzona przy użyciu a) kolumny ze stali nierdzewnej (10 cm × 4.6 mm) wypełnionej oktadecylosilanem chemicznie związanym z porowatymi mikrocząstkami krzemionkowymi lub ceramicznymi (3 do 10 μm) i utrzymywanej w stałej temperaturze około 40º, b) fazy ruchomej przy prędkości przepływu około 1 ml na minutę, oraz c) fotometru ultrafioletowego ustawionego na 230 nm.
Układ jest zaprogramowany tak, aby dostarczał fazę ruchomą składającą się ze zmiennych mieszanin roztworu A i roztworu B. Układ jest wyrównywany przez 15 minut 100-procentowym roztworem A i utrzymywany w tym składzie przez 4 minuty po wstrzyknięciu badanego roztworu, po czym udział roztworu B jest zwiększany liniowo od 0 do 50 procent w ciągu 11 minut. Układ jest utrzymywany w tym składzie przez 3 minuty, a następnie jest zmieniany na 100-procentowy roztwór A przez 6 minut. W celu określenia przydatności systemu chromatograficznego, chromatografować roztwór Roztwór Roztworu i zapisać reakcje pików zgodnie z procedurą: względne czasy retencji wynoszą około 2,5 dla amoksycyliny i 1,0 dla kwasu klawulanowego; współczynnik symetrii dla piku kwasu klawulanowego wynosi nie więcej niż 2,0; wydajność kolumny określona na podstawie piku kwasu klawulanowego jest nie mniejsza niż 2000 płytek teoretycznych; współczynnik rozdzielczości między pikiem kwasu klawulanowego a pikiem amoksycyliny jest nie mniejszy niż 13. Chromatografować roztwór standardowy i rejestrować reakcje piku zgodnie z procedurą: względne odchylenie standardowe dla powtórnych wstrzyknięć nie przekracza 2 procent.
Procedura Oddzielnie wstrzyknąć równe objętości (około 20 μl) roztworu standardowego i roztworu badanego do chromatografu, zarejestrować chromatogramy i zmierzyć reakcje piku.
Obliczenia Obliczyć procentową zawartość, w przeliczeniu na równoważnik potasu klawulanianu, każdego zanieczyszczenia w potasie klawulanianu, korzystając z następującego wyrażenia:
10(237.3/205.1)(C)(ri/rS),
w którym 237.3 stanowi masę cząsteczkową potasu klawulanianu; 205.1 to masa cząsteczkowa litu klawulanianu; C to stężenie RS klawulanianu potasu w roztworze wzorcowym, w mg na ml; ri to reakcja piku pojedynczego piku zanieczyszczenia na chromatogramie uzyskanym z roztworu badanego; a rS to reakcja piku kwasu klawulanowego na chromatogramie uzyskanym z roztworu wzorcowego. Suma wszystkich pików zanieczyszczeń nie przekracza 2 procent.
Postępowanie Przeprowadzić oznaczenie zgodnie z opisem w „Wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej” (dodatek 3.5).
pH 4,4 Bufor fosforanowy sodu Rozpuścić 7.8 g dwuwodorofosforanu sodu w 900 ml wody, doprowadzić kwasem fosforowym lub 10 M wodorotlenkiem sodu do pH 4,4±0,1, rozcieńczyć wodą do 1000 ml i wymieszać.
Faza ruchoma Przygotować odpowiednią mieszaninę 95 objętości buforu fosforanu sodu o pH 4,4 i 5 objętości metanolu. W razie potrzeby dokonać korekty.
Przygotowanie standardowe Rozpuścić dokładnie odważoną ilość Clavulanate Lithium RS w wodzie, aby uzyskać roztwór o znanym stężeniu około 250 μg na ml.
Preparat do badania Przenieść około 50 mg potasu klawulanianu, dokładnie odważonego, do kolby pomiarowej o pojemności 200 ml, rozpuścić w wodzie i rozcieńczyć wodą do pełnej objętości, a następnie wymieszać.
Roztwór rozpuszczający Rozpuścić odpowiednią ilość amoksycyliny w preparacie standardowym, aby otrzymać roztwór zawierający około 0,5 mg amoksycyliny i 250 μg litu klawulanianu na ml.
Układ chromatograficzny Procedura chromatograficzna może być przeprowadzona przy użyciu: a) kolumny ze stali nierdzewnej (30 cm × 4 mm) wypełnionej oktadecylosilanem chemicznie związanym z porowatymi mikrocząstkami krzemionkowymi lub ceramicznymi (3 do 10 μm), b) fazy ruchomej przy prędkości przepływu około 2 ml na minutę, oraz c) fotometru ultrafioletowego ustawionego na 220 nm.
Aby określić przydatność systemu chromatograficznego, chromatograf Roztwór rozdzielczy i zapisać reakcje piku zgodnie z procedurą: współczynnik rozdzielczości między pikami amoksycyliny i kwasu klawulanowego jest nie mniejszy niż 3,5, a względne czasy retencji wynoszą około 0,5 dla kwasu klawulanowego i 1,0 dla amoksycyliny. Chromatografować preparat wzorcowy i zapisać reakcje piku zgodnie z procedurą: współczynnik symetrii dla piku kwasu klawulanowego nie jest większy niż 1,5, a względne odchylenie standardowe dla powtórnych wstrzyknięć nie jest większe niż 2,0 %.
Procedura Oddzielnie wstrzyknąć równe objętości (około 20 μl) preparatu wzorcowego i preparatu do oznaczania do chromatografu, zapisać chromatogramy i zmierzyć reakcje dla głównych pików.
Obliczenia Obliczyć zawartość C8H9NO5 w pobranym klawulanie potasu, stosując deklarowaną zawartość C8H9NO5 w klawulanie litu RS.
.