Abstract
IgG może być oczyszczana z surowicy przy użyciu prostej jednoetapowej procedury chromatografii jonowymiennej. Metoda ta jest szeroko stosowana i działa na zasadzie, że IgG ma wyższy lub bardziej zasadowy punkt izoelektryczny niż większość białek surowicy. Dlatego, jeżeli pH jest utrzymywane poniżej punktu izoelektrycznego większości przeciwciał, immunoglobuliny nie wiążą się z wymieniaczem jonowym i są oddzielane od większości białek surowicy związanych z matrycą kolumny. Duża pojemność kolumn anionowymiennych pozwala na oczyszczanie IgG z surowicy na dużą skalę. Do tego celu przydatna jest grupa reaktywna wymieniacza anionowego, dietyloaminoetylu (DEAE), kowalencyjnie związana z sefarozą (np. DEAE Sepharose CL-6B, Pharmacia, Uppsala, Szwecja). Jest ona dostarczana jako wstępnie spęczniona i gotowa do umieszczenia w kolumnie, jest wytrzymała i ma wysoką zdolność wiązania. Ponadto jest ona stosunkowo stabilna na zmiany siły jonowej oraz pH. Inne matryce (np. celuloza DEAE) są dostarczane jako ciała stałe, a zatem wymagają przygotowania i wyrównania (1).
.