TEKST
Opis
Aktywacja limfocytów T, zarówno in vivo, jak i in vitro, indukuje ekspresję CD69. Cząsteczka ta, która wydaje się być najwcześniejszą indukowalną glikoproteiną powierzchniową komórki nabytą podczas aktywacji limfoidalnej, jest zaangażowana w proliferację limfocytów i funkcjonuje jako receptor przekazujący sygnał w limfocytach, komórkach naturalnych zabójców (NK) i płytkach krwi (Cambiaggi i in., 1992).
Klonowanie i ekspresja
Lopez-Cabrera i wsp. (1993) zidentyfikowali cDNA dla CD69 z otwartą ramką odczytu przewidującą 199-aminokwasowe białko o topologii błonowej typu II. Klon CD69 hybrydyzował do 1,7-kb mRNA, które było szybko indukowane i degradowane po stymulacji limfocytów, co jest zgodne z obecnością sygnałów szybkiej degradacji w 3-pierwszym nieulegającym translacji regionie. Poszukiwanie homologii sekwencji białek wykazało, że CD69 jest członkiem tej samej nadrodziny receptorów transmembranowych typu II, co naturalna lektyna komórek zabójczych (NKG2; 161555), która również mapuje się na chromosomie 12.
Funkcja genu
Shiow i wsp. (2006) wykazali, że leczenie induktorem interferonu alfa/beta (IFN-alfa/beta; 147660, 147640), kwasem polinozynowym policytydylowym, hamowało wydostawanie się limfocytów z narządów limfoidalnych za pomocą mechanizmu, który był częściowo wewnątrz limfocytowy. Transbłonowa lektyna typu C CD69 była szybko indukowana, a komórki CD69-null były słabo zatrzymywane w tkankach limfoidalnych po traktowaniu kwasem polinozynowym policytydylowym lub zakażeniu wirusem limfocytowego zapalenia opon mózgowych. Wyjście limfocytów wymaga receptora 1-fosforanu sfingozyny-1 (S1P1; 601974), a IFN-alfa/beta hamował reaktywność limfocytów na S1P1. W przeciwieństwie do tego, komórki CD69-null zachowały funkcję S1P1 po ekspozycji na IFN-alfa/beta. W eksperymentach z koekspresją, CD69 hamował funkcję chemotaktyczną S1P1 i prowadził do downmodulacji S1P1. W teście reporterowym, sieciowanie prowadziło do współsieciowania i aktywacji chimery CD69/CD3-eta. CD69 koimmunoprecypitował z S1P1, ale nie z pokrewnym receptorem S1P3 (601965). Shiow et al. (2006) stwierdzili, że CD69 tworzy kompleks z S1P1 i reguluje go ujemnie oraz że funkcjonuje on poniżej IFN-alfa/beta, i prawdopodobnie innych bodźców aktywujących, w celu promowania retencji limfocytów w narządach limfoidalnych.
Mapowanie
Cambiaggi et al. (1992) wyprodukowali i scharakteryzowali międzygatunkowe somatyczne hybrydy komórkowe pomiędzy ludzkimi aktywowanymi dojrzałymi komórkami T i mysimi komórkami grasiczaka BW5147. Zaobserwowano preferencyjną segregację ludzkich chromosomów w hybrydach. W klonach stwierdzono koekspresję antygenów CD4 (186940) i CD69. Badania molekularne i kariotypowe hybryd wykazały, że locus kodujący CD69 mapuje ludzki chromosom 12, podobnie jak locus dla CD4. Chociaż ekspresja antygenu CD69 jest wczesnym wydarzeniem po aktywacji limfocytów T i szybko spada w przypadku braku egzogennych bodźców, w stworzonych przez nich hybrydach ekspresja ta była konstytutywna, podobna do tej, która występuje we wczesnych prekursorach tymocytów i dojrzałych tymocytach. Odkrycie to sugeruje dominujący wpływ pochodzącego z grasicy genomu mysich komórek nowotworowych w kontrolowaniu konstytutywnej ekspresji CD69.
Poprzez analizę hybrydowego DNA komórek somatycznych i hybrydyzację fluorescencyjną in situ, Lopez-Cabrera i wsp. (1993) przypisali gen CD69 do 12p13-p12.
Model zwierzęcy
Sancho i wsp. (2003) przeanalizowali model zapalenia stawów wywołanego kolagenem u myszy typu dzikiego i myszy z niedoborem Cd69 i stwierdzili, że myszy Cd69 -/- wykazywały większą częstość występowania i ciężkość zapalenia stawów, z nasilonymi odpowiedziami immunologicznymi komórek T i B na kolagen typu II. Poziomy transformującego czynnika wzrostu-beta-1 (TGFB1; 190180) i TGFB2 (190220), które działają jako czynniki ochronne w zapaleniu stawów indukowanym kolagenem, były obniżone w ogniskach zapalnych myszy Cd69 -/-, co korelowało ze wzrostem cytokin prozapalnych. Miejscowe wstrzyknięcie przeciwciał blokujących anty-TGF zwiększyło nasilenie zapalenia stawów i poziom mRNA cytokin prozapalnych u myszy Cd69 wildtype, ale nie u myszy null. Sancho i wsp. (2003) stwierdzili, że CD69 jest negatywnym modulatorem reaktywności autoimmunologicznej i zapalenia poprzez syntezę TGFB1, cytokiny, która z kolei hamuje produkcję różnych mediatorów prozapalnych.
Esplugues et al. (2003) zaobserwowali znacznie zmniejszony wzrost guzów z niedoborem MHC klasy I u myszy Cd69 -/- w porównaniu z myszami wildtype. Wzmocniona odpowiedź przeciwnowotworowa była związana ze zwiększoną lokalną akumulacją limfocytów T i NK i cytokin prozapalnych oraz zmniejszoną produkcją Tgfb. Leczenie przeciwciałami przeciwko komórkom NK przywróciło zdolność do wzrostu guzów u myszy Cd69 -/-. Większe upośledzenie wzrostu guzów wystąpiło u myszy z niedoborem zarówno Cd69 jak i Rag2 (179616). Esplugues i wsp. (2003) stwierdzili, że CD69 jest negatywnym regulatorem odpowiedzi przeciwnowotworowej.