Prąd Na w krwawieniach membranowych: implikacje dla mobilności kanału i nagrywania patch clamp

Kiedy ssanie zostało zastosowane do luźnych pipet patch clamp podczas nagrywania z enzymatycznie zdysocjowanych włókien mięśniowych, duże krwawienia membranowe utworzone w pipetach. Rozpoczęliśmy badania nad tymi indukowanymi przez ssanie pęcherzami, ponieważ kanały jonowe w pęcherzach komplikowałyby lub prawdopodobnie unieważniałyby luźne pomiary gęstości prądu membranowego. Niska ruchliwość boczna (Stühmer i Almers, 1982) i strome gradienty kanałów Na na płycie końcowej i ścięgnie (Caldwell i in., 1986) sugerują ścisłe wiązanie kanałów Na z elementami cytoszkieletu i doprowadziły nas do tego, że spodziewaliśmy się niewielu, jeśli w ogóle, kanałów Na w pęcherzykach. Formowanie pęcherzyków spowodowało wzrost pojemności błony, jak oczekiwano na podstawie wzrostu powierzchni błony. Tworzenie się pęcherzyków spowodowało również wzrost prądu Na, co wskazuje, że pęcherzyki zawierały kanały Na. Zakładając, że zwiększona pojemność i prąd Na były spowodowane lipidami i kanałami Na przemieszczającymi się z błony na zewnątrz pipety, oczekiwano, że wyrzucenie pęcherzyka z pipety spowoduje powrót pojemności i prądu Na do ich pierwotnych wartości. Kapacytancja powróciła do pierwotnej wartości, ale prąd Na był niższy niż oczekiwano. Spadek prądu Na tłumaczy się tym, że kanały Na przemieszczają się z membrany łaty do pęcherzyka. Normalizacja prądu Na w błonie pęcherzyka i łaty do ich odpowiednich pojemności ujawniła, że błona pęcherzyka ma gęstość kanałów Na prawie 50% gęstości normalnej błony powierzchniowej. Tak więc, błona pęcherzyka nie jest ani pozbawiona białek, ani prawdziwie reprezentatywna dla normalnej błony powierzchniowej, z której powstała. Jest ona wzbogacona w lipidy błonowe i jest stosunkowo uboga w białka. Można wyciągnąć dwa wnioski.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)

Dodaj komentarz