Test wiązania dopełniacza

Układ dopełniacza jest układem białek surowicy, które reagują z kompleksami antygen-przeciwciało. Jeśli reakcja ta zachodzi na powierzchni komórki, prowadzi do powstania porów transbłonowych, a tym samym do zniszczenia komórki. Podstawowe etapy odczynu wiązania dopełniacza są następujące:

  1. Surowica jest oddzielana od pacjenta.
  2. Pacjenci naturalnie mają różne poziomy białek dopełniacza w swojej surowicy. Aby zanegować jakikolwiek wpływ, jaki mogłoby to mieć na test, białka dopełniacza w surowicy pacjenta muszą zostać zniszczone i zastąpione znaną ilością standaryzowanych białek dopełniacza.
    1. Surowica jest podgrzewana w taki sposób, że wszystkie białka dopełniacza – ale żadne z przeciwciał – znajdujące się w niej nie zostają zniszczone. (Jest to możliwe, ponieważ białka dopełniacza są znacznie bardziej podatne na zniszczenie przez ciepło niż przeciwciała.)
    2. Do surowicy dodaje się znaną ilość standardowych białek dopełniacza. (Białka te są często uzyskiwane z surowicy świnki morskiej.)
  3. Do surowicy dodawany jest antygen będący przedmiotem zainteresowania.
  4. Do surowicy dodawane są owcze krwinki czerwone (sRBC), które zostały wstępnie związane z przeciwciałami anty-sRBC. Test jest uważany za negatywny, jeśli roztwór zmienia kolor na różowy w tym momencie i pozytywny w przeciwnym razie.

Jeśli surowica pacjenta zawiera przeciwciała przeciwko antygenowi zainteresowania, połączą się one z antygenem w kroku 3, tworząc kompleksy antygen-przeciwciało. Białka dopełniacza będą reagować z tymi kompleksami i zostaną pozbawione. Tak więc po dodaniu kompleksów sRBC-przeciwciało w etapie 4, w surowicy nie będzie już dopełniacza. Jednakże, jeżeli nie są obecne żadne przeciwciała przeciwko antygenowi, dopełniacz nie zostanie wyczerpany i będzie reagował z kompleksami sRBC-przeciwciało dodanymi w etapie 4, powodując lizę sRBC i wylanie ich zawartości do roztworu, tym samym nadając roztworowi różowy kolor.

.

Dodaj komentarz