Two novel ACE inhibitory peptides isolated from longan seeds: purification, inhibitory kinetics and mechanisms – RSC Advances (RSC Publishing)

Angiotensin converting enzyme (ACE) inhibition offers a useful means of managing hypertension, because ACE inhibitors (ACEIs) are known to serve as agents with antihypertensive properties in addition to generating positive metabolic and cardioprotective outcomes. Jednak obecnie stosowane ACEI wiążą się z niekorzystnymi następstwami, dlatego też istnieje zapotrzebowanie na związki skuteczne, ale bezpieczniejsze, co można osiągnąć poprzez syntezę chemiczną lub izolację naturalnie uzyskanych bioaktywnych cząsteczek. Hydrolizaty białkowe o aktywności ACEI mogą być wytwarzane poprzez łączną proteolizę pepsyny i pankreatyny (w celu naśladowania trawienia w przewodzie pokarmowym) białka nasion longanu. W niniejszej pracy badano hydrolizaty białka nasion longanu, uzyskane w wyniku sekwencyjnego, 3-godzinnego trawienia pepsyną, a następnie pankreatyną. Otrzymany hydrolizat poddano sekwencyjnemu frakcjonowaniu membranowemu metodą ultrafiltracji z odcięciem masy cząsteczkowej (MWCO) 10, 5 i 3 kDa. Permeat uzyskany z MWCO <3 kDa wykazywał najwyższą aktywność ACEI. Permeat ten został następnie poddany rozdzieleniu za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej z odwróconą fazą w celu uzyskania głównych frakcji na podstawie różnych czasów elucji. Następnie określono wartości ACEI IC50 dla tych frakcji. Quadrupolowa tandemowa spektrometria mas typu time-of-flight została zastosowana do określenia masy peptydu dla głównego piku (F5), który okazał się być Glu-Thr-Ser-Gly-Met-Lys-Pro-Thr-Glu-Leu (ETSGMKPTEL) i Ile-Ser-Ser-Met-Gly-Ile-Leu-Val-Cys-Leu (ISSMGILVCL). Te dwa peptydy były stabilne w zakresie temperatur i pH od -20 do 90 °C i od 2 do 12, odpowiednio, przez 60 min. Z wykresu Lineweavera-Burka wynika, że oba peptydy hamowały ACE w sposób niekompetycyjny. Symulacja dockingu molekularnego peptydów z ACE potwierdziła tworzenie wiązań wodorowych przez peptydy z kieszeniami aktywnymi ACE. Badania te wskazują, że może być możliwe wykorzystanie obu tych peptydów lub hydrolizatów białka nasion longanu w celu stworzenia składników żywności funkcjonalnej lub do produkcji produktów farmaceutycznych, zdolnych do obniżania nadciśnienia.

.

Dodaj komentarz