สารบัญ

Categoria Inibidor da Beta-lactamase.

Clavulanato de Potássio contém o equivalente a 75,5% e 92,0% de C8H9NO5, calculados em base anidra.

Acondicionamento e armazenamento O potássio Clavulanate deve ser mantido em recipientes bem fechados e armazenados a uma temperatura entre 2º e 8º.

Rótulo O rótulo no recipiente indica (1) condição de armazenamento; (2) grau parenteral ou não parenteral.

Identificação
A. O cromatograma da preparação do Ensaio obtido conforme orientado no Ensaio exibe um pico maior para o ácido clavulânico, cujo tempo de retenção corresponde ao exibido no cromatograma da preparação Padrão obtido conforme orientado no Ensaio.
B. Produz as reacções características dos sais de potássio (Apêndice 5.1).

pH 5.5 a 8.0, numa solução de 1.0 por cento p/v (Apêndice 4.11).

Água Não superior a 1.5 por cento p/p (Método Karl Fischer, Apêndice 4.12).

Limite de clavam-2-carboxilato de potássio Não superior a 0.01 por cento. Realizar a determinação conforme descrito na “Cromatografia Líquida de Alta Pressão” (Apêndice 3.5).
Fase móvel Preparar 0,1 M de dihidrogenofosfato de sódio, ajustar com ácido fosfórico a um pH de 4,0±0,1, e filtrar através de um filtro de membrana de 0,5 μm ou porosidade mais fina. Faça ajustes, se necessário. Solução padrão Dissolver Clavam-2-Carboxilato de Potássio RS em água para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 40 μg por ml.
Solução de teste Transferir cerca de 100 mg de Clavulanato de Potássio, pesado com precisão, para um balão volumétrico de 10 ml, dissolver e diluir com água até o volume, e misturar.
Solução de resolução Dissolver uma quantidade adequada de Clavulanate Potassium em solução padrão para obter uma solução contendo cerca de 1 mg de clavulanato de potássio e 30 μg de clavam-2-carboxilato de potássio por ml.
Sistema cromatográfico O procedimento cromatográfico pode ser realizado utilizando (a) uma coluna de aço inoxidável (30 cm × 4 mm) embalada com octadecylsilane quimicamente ligado a sílica porosa ou micropartículas cerâmicas (3 a 10 μm) (b) Fase móvel a um caudal de 0,5 ml por minuto, e (c) um fotómetro ultravioleta regulado para 210 nm.
Para determinar a adequação do sistema cromatográfico, solução padrão do cromatógrafo, e registrar as respostas de pico conforme orientado em Procedimento: o fator de simetria não é superior a 1,5 e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 2,0 por cento. Solução de resolução cromatográfica, e registre os picos de resposta conforme orientado em Procedimento: o fator de resolução entre os picos de ácido clavam-2-carboxílico e ácido clavulânico não é inferior a 1,0,
Procedimento Injetar separadamente volumes iguais (cerca de 20 μl) de solução padrão e solução de teste no cromatógrafo, registrar os cromatogramas, e medir as respostas para os picos maiores. Os tempos de retenção relativos são cerca de 0,7 para o ácido clavulanica-2-carboxílico e 1,0 para o ácido clavulânico. Calcular a percentagem de potássio clavam-2-carboxilato de potássio

Limite de metanol e terc-butilamina Não mais de 0,1 por cento p/p de metanol ou não mais de 0,2 por cento p/p de terc-butilamina. Efectuar a determinação conforme descrito na “Cromatografia em fase gasosa” (Apêndice 3.4).
Solução padrão Para um balão volumétrico de 100 ml contendo 50,0 ml de hidróxido de sódio 3 M adicionar cerca de 6 ml de metanol e 12 ml de terc-butilamina, ambos pesados com precisão, diluir com hidróxido de sódio 3 M até
volume e misturar. Transferir 10,0 ml desta solução de reserva para um segundo balão volumétrico de 100 ml, diluir com 3 M de hidróxido de sódio até ao volume e misturar. Transferir 10,0 ml desta solução para um terceiro balão volumétrico de 100 ml, diluir com hidróxido de sódio 3 M até o volume, e misturar. Transferir 7,0 ml desta solução para um quarto balão volumétrico de 100 ml, adicionar 3,0 ml de hidróxido de sódio 3 M, diluir com 4-metil-2-pentanona até o volume e misturar. Deixar separar as fases e utilizar a camada clara de metilisobutilcetona como solução padrão. Esta solução contém cerca de 36,6 μg de metanol e 63,8 μg de tertbutilamina por ml. Utilizar esta solução em 5 horas.
Solução de teste Transferir cerca de 3 g de potássio de Clavulanato, pesado com precisão, para um balão volumétrico de 100 ml, adicionar 10,0 ml de hidróxido de sódio 3 M, e agitar até dissolver. Deixar esfriar em banho de água fria, diluir com 4-metil-2-pentanona até o volume, tapar o frasco e agitar vigorosamente por 3 minutos, com ventilação ocasional. Deixar as fases separarem-se, e utilizar a camada transparente de metilisobutilcetona como solução de teste. Utilizar esta solução em 5 horas.
Sistema cromatográfico O procedimento cromatográfico pode ser realizado utilizando (a) uma coluna de vidro (30 m × 0,32 mm) revestida com dimetilpolissiloxano de fase estacionária e é mantida a 40º, depois programada para aumentar a uma taxa de 55º por minuto até 200º, e mantida a essa temperatura durante 4 minutos, (b) a porta de injeção e o bloco detector são mantidos a 150º, (c) nitrogênio como gás portador, e (d) um detector de ionização de chama. Para determinar a adequação do sistema cromatográfico, solução padrão do cromatógrafo e registrar as respostas de pico de metanol, terc-butilamina e metilisobutilcetona como indicado para o Procedimento: o fator de simetria não é superior a 1.6 para os picos do metanol e da terc-butilamina; a eficiência da coluna não é inferior a 25.000 placas teóricas; o fator de resolução entre o pico do metanol e o pico da terc-butilamina não é inferior a 20 e entre o pico da terc-butilamina e o pico da 4-metil-2-pentanona não é inferior a 10; e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 10 por cento.

Procedimento Injetar separadamente volumes iguais (cerca de 1 μl) de solução padrão e solução de teste no cromatógrafo, registrar os cromatogramas e medir as áreas das respostas dos picos do metanol e da terc-butilamina.
Cálculo Calcular as porcentagens de metanol e de terc-butilamina no Potássio Clavulanato.
Pureza cromatográfica Realizar a determinação conforme descrito na “Cromatografia Líquida de Alta Pressão” (Apêndice 3.5).
Solução A Prepare uma solução de 0,05 M de dihidrogenofosfato de sódio, ajuste com ácido fosfórico a um pH de 4,0±0,1 e filtre através de um filtro de 0,5-μm ou porosidade mais fina.
Solução B Prepare uma mistura de volumes iguais de Solução A e metanol.
Fase móvel Utilize misturas variáveis de Solução A e Solução B como indicado para o sistema Cromatográfico. Prepare uma solução de Clavulanate Lithium RS na Solução A com uma concentração conhecida de cerca de 0,1 mg por ml.
Solução de teste Prepare uma solução de Clavulanate Potassium na Solução A contendo 10.0 mg por ml.
Solução de resolução Preparar uma solução de Clavulanate Lithium RS e amoxicilina na Solução A contendo 0,1 mg de cada uma por ml.
Sistema cromatográfico O procedimento cromatográfico pode ser realizado utilizando (a) uma coluna de aço inoxidável (10 cm × 4.6 mm) embalada com octadecylsilane quimicamente ligado a sílica porosa ou micropartículas cerâmicas (3 a 10 μm) e é mantida a uma temperatura constante de cerca de 40º, (b) fase móvel a um caudal de cerca de 1 ml por minuto, e (c) um fotómetro ultravioleta regulado para 230 nm.
O sistema é programado para fornecer uma fase móvel constituída por misturas variáveis de Solução A e Solução B. O sistema é equilibrado durante 15 minutos com 100% de Solução A, e mantido nessa composição durante 4 minutos após a injecção da solução em teste, após o que a proporção de Solução B é aumentada linearmente de 0 a 50% ao longo de um período de 11 minutos. O sistema é mantido nessa composição durante 3 minutos, sendo depois alterado para 100% da solução A durante 6 minutos. Para determinar a adequação do sistema cromatográfico, cromatografar a solução de resolução e registrar as respostas dos picos como indicado para o procedimento: os tempos de retenção relativos são cerca de 2,5 para amoxicilina e 1,0 para o ácido clavulânico; o fator de simetria para o pico do ácido clavulânico não é maior que 2,0; a eficiência da coluna determinada a partir do pico do ácido clavulânico não é menor que 2000 placas teóricas; e o fator de resolução entre o pico do ácido clavulânico e o pico da amoxicilina não é menor que 13. Cromatógrafo Solução Padrão, e registrar as respostas dos picos como indicado para o Procedimento: o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é superior a 2 por cento.
Procedimento Injetar separadamente volumes iguais (cerca de 20 μl) de solução Padrão e Solução de Teste no cromatógrafo, registrar os cromatogramas, e medir as respostas dos picos.
Cálculo Calcular a percentagem, em termos de equivalente de potássio clavulanato, de cada impureza no Potássio Clavulanato tomada pela expressão:

10(237.3/205.1)(C)(ri/rS),

em que 237.3 é o peso molecular do clavulanato de potássio; 205.1 é o peso molecular do clavulanato de lítio; C é a concentração, em mg por ml, de Clavulanato Potássio RS em solução Padrão; ri é a resposta de pico de um pico de impureza individual no cromatograma obtido da solução Teste; e rS é a resposta de pico de ácido clavulânico no cromatograma obtido da solução Padrão. A soma de todos os picos de impureza não é superior a 2 por cento.

Avaliação Realizar a determinação conforme descrito no “Cromatografia Líquida de Alta Pressão” (Apêndice 3.5).
pH 4.4 Tampão fosfato de sódio Dissolver 7.8 g de dihidrogenofosfato de sódio em 900 ml de água, ajustar com ácido fosfórico ou hidróxido de sódio 10 M a um pH de 4,4±0,1, diluir com água para fazer 1000 ml, e misturar.
Fase móvel Preparar uma mistura adequada de 95 volumes de tampão fosfato de sódio com pH 4,4 e 5 volumes de metanol. Faça ajustes se necessário.
Preparação padrão Dissolva uma quantidade precisa de Clavulanate Lithium RS em água para obter uma solução com uma concentração conhecida de cerca de 250 μg por ml.
Preparação do ensaio Transferir cerca de 50 mg de Clavulanate Potassium, pesados com precisão, para um balão volumétrico de 200 ml, dissolver e diluir com água até ao volume e misturar.
Resolução da solução Dissolver uma quantidade adequada de amoxicilina na preparação padrão para obter uma solução contendo cerca de 0,5 mg de amoxicilina e 250 μg de clavulanate lithium por ml.
Sistema cromatográfico O procedimento cromatográfico pode ser realizado utilizando (a) uma coluna de aço inoxidável (30 cm × 4 mm) embalada com octadecylsilane quimicamente ligado a sílica porosa ou micropartículas cerâmicas (3 a 10 μm), (b) fase móvel com um fluxo de cerca de 2 ml por minuto, e (c) um fotómetro ultravioleta regulado para 220 nm.
Para determinar a adequação do sistema cromatográfico, solução de resolução cromatográfica, e registrar as respostas de pico conforme orientado em Procedimento: o fator de resolução entre os picos de amoxicilina e ácido clavulânico não é inferior a 3,5 e os tempos relativos de retenção são de cerca de 0,5 para ácido clavulânico e 1,0 para amoxicilina. Cromatógrafo Preparação padrão, e registrar as respostas dos picos como indicado em Procedimento: o fator de simetria para o pico do ácido clavulânico não é maior que 1,5 e o desvio padrão relativo para injeções replicadas não é maior que 2,0 por cento.
Procedimento Injetar separadamente volumes iguais (cerca de 20 μl) de preparação padrão e preparação do ensaio no cromatógrafo, registrar os cromatogramas e medir as respostas para os maiores picos.
Cálculo Calcular o conteúdo de C8H9NO5 no Clavulanato de Potássio tomado, usando o conteúdo declarado de C8H9NO5 no Clavulanato de Lítio RS.