Os mutantes met são auxotrofos Met, significando que eles são incapazes de crescer em meios que não contenham Met. Os auxótrofos são microorganismos que são incapazes de sintetizar um nutriente essencial por causa de uma mutação genética. Muitas estirpes de laboratório carregam múltiplas mutações que interferem com a síntese de nutrientes essenciais. Por exemplo, porque a linhagem BY4742 carrega mutações nos genes HIS3, LEU2, LYS2 e URA3, a linhagem só crescerá em meios contendo histidina, leucina, lisina e uracil. As cepas Auxotroficas têm muitos usos na genética. Os pesquisadores frequentemente usam cepas auxotróficas como hospedeiros para a transformação de plasmídeos (Capítulo 12). Os plasmídeos usados para transformação carregam alelos funcionais de um gene defeituoso na estirpe hospedeira, tornando possível selecionar os transformantes pela sua capacidade de crescer em meios sem o nutriente essencial.
Os meios sintéticos são uma ferramenta essencial para cultivar e estudar os auxótrofos, pois todos os componentes são definidos. Os pesquisadores de leveduras desenvolveram uma variedade de formulações diferentes para os meios sintéticos. Todos os meios sintéticos contêm uma fonte de carbono (geralmente D-glucose), uma fonte de nitrogênio, e vitaminas e minerais essenciais. As vitaminas e minerais são normalmente adquiridos
numa formulação conhecida como base de nitrogênio levedura (YNB). Os suplementos adicionados aos meios sintéticos podem ser adaptados para apoiar ou selecionar contra o crescimento de genótipos particulares. Neste curso, usaremos o meio Yeast Complete (YC) que suporta o crescimento da maioria dos S. cerevisia. A taxa de crescimento das estirpes do tipo selvagem na YC é um pouco mais lenta do que a dos meios ricos como a YPD, mas as estirpes são viáveis por longos períodos de tempo. A tabela na página seguinte mostra a composição da YC, que inclui um rico fornecimento de aminoácidos e bases nucleotídicas. Além do meio YC completo, usaremos também meios selectivos nos quais alguns dos componentes foram deixados de fora. Por exemplo, neste laboratório, usaremos o meio YC-Met “drop-out”, que contém todos os componentes do YC na tabela seguinte, exceto metionina.
