Este estudo foi concebido para verificar a aplicabilidade de um teste Apt modificado a manchas de sangue em tecidos e para determinar se o momento do teste afecta a precisão dos resultados. Recolhemos amostras de sangue do cordão umbilical de recém-nascidos a termo (n = 35) e amostras de sangue venoso de fêmeas grávidas (n = 30) e aplicámo-las de forma aleatória com um cotonete de algodão nas fraldas de pano padrão. Um investigador cego aplicou uma solução alcalina em cada mancha e registrou ou mudança de cor ou nenhuma mudança de cor. Além disso, foi realizado um curso de tempo aplicando amostras infantis (n = 4) e adultas (n = 4) em uma fralda de pano em um ponto inicial e variando o tempo de realização do nosso teste modificado em intervalos de até quatro horas. Trinta e quatro das 35 amostras infantis não tiveram alteração de cor, e 29 das 30 amostras adultas tiveram uma alteração de cor facilmente identificada. O curso temporal revelou que as amostras eram indistinguíveis depois de 30 minutos. Portanto, um teste Apt modificado pode ser usado com sucesso para diferenciar as manchas de sangue de adultos e de bebês, de origem não-toólica, somente se realizado dentro de 30 minutos do tempo em que a coloração é produzida. Esta restrição é significativa no ambiente do departamento de emergência.