Propósito: Recentemente várias técnicas de transcrição reversa-PCR provaram ser úteis para a detecção de micrometástases circulantes. No entanto, desta forma não foi possível detectar grupos de células intactas que foram encontradas em experimentos com animais de valor prognóstico. Neste estudo, a avaliação e modificação de um método comercial de separação de células imunomagnéticas à base de citoceratina foi realizada para a detecção de clusters de células intactas em pacientes com carcinoma colorretal.
Desenho experimental: Foram avaliados 32 pacientes com câncer de cólon (6 estavam no estágio B de Dukes, 13 no estágio C e 13 no estágio D) e 20 amostras de doadores saudáveis. A separação das células imunomagnéticas foi realizada a partir da camada de buffy das amostras de sangue periférico (20 ml) utilizando o Kit de Enriquecimento Celular do Carcinoma (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Alemanha), evitando qualquer etapa de filtragem. A fração celular enriquecida foi citocentrifugada e imunocitoquimicamente rotulada usando um anticorpo pancitoqueratina (MNF116; Dako).
Resultados: De 20 amostras saudáveis, 2 continham uma célula citoqueratino-positiva. De 32 amostras individuais de casos malignos, 24 apresentaram células citoqueratinas-positivas. Grupos de células tumorais, duplas de células mistas (uma célula citoqueratina-positiva e -negativa), e grupos de células mistas foram detectados em 22 de 24 pacientes. Em seis casos, células do tipo citoqueratina-positiva dendrítica foram detectadas. Dados de acompanhamento indicam que a quimioterapia não pode destruir todos os aglomerados de células tumorais circulantes.
Conclusões: Usando os métodos apresentados, pudemos detectar células tumorais circulantes do cólon e clusters de células em pacientes com carcinoma do cólon. Estruturas celulares similares foram descritas anteriormente apenas em ratos. Dados atuais comprovam que tais estruturas também estão presentes no câncer colorretal humano.