Citrato sintético

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proteínas

MecanismoEditar

Citrato de sintetizase tem três aminoácidos-chave no seu local ativo (conhecido como tríade catalítica) que catalisam a conversão de acetil…CoA e oxaloacetato em citrato e H-SCoA numa reacção de condensação de aldol. Esta conversão começa com o átomo de oxigênio da cadeia lateral de carboxilato de Asp-375 deprotonando o átomo de carbono alfa de Acetil CoA para formar um ânion enolado que, por sua vez, é neutralizado pela protonação de His-274 para formar um intermediário de enol. Neste ponto, o par único de elétrons epsilon de nitrogênio no His-274 formou na última etapa a abstração do próton de hidroxil enol para reformar um ânion enolado que inicia um ataque nucleófilo sobre o carbonil carbono do oxaloacetato que, por sua vez, desprotonifica o átomo de nitrogênio epsilon do His-320. Esta adição nucleófila resulta na formação do citroil-CoA . Neste ponto, uma molécula de água é deprotonada pelo átomo de nitrogênio epsilon de His-320 e a hidrólise é iniciada. Um dos pares solitários de oxigênio ataca nucleofilicamente o carbono carbonilo do citroil-CoA. Isto forma um intermediário tetraédrico e resulta na ejeção de -SCoA como as reformas carbonílicas. O -SCoA é protonado para formar o HSCoA. Finalmente, o hidroxil adicionado ao carbonilo no passo anterior é desprotonado e o citrato é formado.

Mecanismo para Citrato Sintético (incluindo resíduos envolvidos)

InhibitionEdit

A enzima é inibida por altas proporções de ATP:ADP e NADH:NAD, já que altas concentrações de ATP e NADH mostram que o fornecimento de energia é alto para a célula. Ela também é inibida pela succinil-CoA e propionil-CoA, que se assemelha ao Acetyl-coA e atua como um inibidor competitivo da acetil-CoA e um inibidor não competitivo do oxaloacetato. O citrato inibe a reação e é um exemplo de inibição do produto. A inibição do citrato sintase por análogos de acetil-CoA também tem sido bem documentada e tem sido utilizada para provar a existência de um único local ativo. Estas experiências revelaram que este local único alterna entre duas formas, que participam na actividade da ligase e da hidrolase, respectivamente. Esta proteína pode utilizar o modelo de regulação alostérica da morfedina.