O gene da microcefalia ASPM é expresso em tecidos proliferantes e codifica a proteína do fuso mitótico

A causa mais comum da microcefalia autossômica recessiva primária (MCPH) parece ser mutações no gene ASPM que está envolvido na regulação da neurogênese. O produto gênico previsto contém dois domínios hipotéticos N-terminal da calponina-homologia (CH) e um bloco de domínios hipotéticos de calmodulina-ligação IQ comuns em proteínas actínicas de ligação citoesquelética e de sinalização. Estudos anteriores em ratos sugerem que o ASPM é expresso preferencialmente no cérebro em desenvolvimento. Nossas análises revelam que a ASPM é amplamente expressa em tecidos fetais e adultos e upregulada em células malignas. Foram identificadas várias variantes emendadas que codificam isoformas putativas de ASPM com diferentes números de motivos de QI. A transcrição principal da ASPM contém 81 domínios de QI, a maioria dos quais estão organizados numa estrutura de repetição de ordem superior (HOR). Outra forma proeminente emendada contém uma supressão de exon 18 e codifica 14 domínios de QI não organizados em um HOR. Esta variante é conservada no rato. Outras variantes emendadas sem ambos os domínios CH e uma parte dos motivos de QI também foram detectadas, sugerindo a existência de isoformas com funções potencialmente diferentes. Para elucidar a função bioquímica do ASPM humano, desenvolvemos anticorpos peptídeos específicos para os termini N e C do ASPM. Em uma análise ocidental de proteínas de células humanas e de camundongos cultivados, os anticorpos detectaram bandas com mobilidades correspondentes às isoformas de ASPM previstas. A imunoglobulina de células humanas cultivadas com anticorpos revelou que o ASPM está localizado nos pólos do fuso durante a mitose. Esta descoberta sugere que a MCPH é a consequência de uma deficiência na regulação do fuso mitótico em progenitores corticais devido a mutações na ASPM.

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