Um cromatograma é essencialmente o resultado de uma cromatografia executada. É um arquivo eletrônico ou cópia impressa contendo a informação gerada durante a execução da cromatografia.
Existem muitas variações diferentes sobre o que é mostrado em um cromatograma – dependendo das configurações usadas em cada laboratório e quaisquer requisitos regulamentares. Como exemplo, o mínimo mostrado em uma execução de GC de uma amostra em processo pode ser:
- Amostras de identificação (Produto, número do lote, número do estágio)
- Informação da amostra (peso ou concentração da amostra)
- Data e hora da injeção
- Nome ou identificação do analista
- Identificação do instrumento e nome do método analítico utilizado
- Nome do filme e localização dos dados brutos gerados durante a execução
- Registro do gráfico mostrando os picos gerados e a linha de base, conhecido como traço
- Tabela de resultados (contendo dados brutos e dados calculados)
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Agora hoje em dia é um processo muito automatizado para gerar uma tabela de resultados, mas nem sempre foi assim tão simples…
Papel quadrado e tesoura
Antes da análise de dados e integração digital se tornar o padrão – papel gráfico e tesoura eram encontrados na prateleira de cada analista.
Um registrador de gráficos, ligado ao detector, registrou o traço diretamente no papel quadrado ou papel gráfico usando uma caneta de tinta. A partir do traço, havia dois métodos comumente usados para trabalhar os resultados:
Contagem de quadrados:
O analista usou uma régua e uma caneta para desenhar a melhor forma de pico (triângulo) e linha de base. O número de quadrados em cada triângulo foi então contado. Esta contagem foi então usada juntamente com a atenuação do detector e a composição da amostra foi calculada.
Corte e pesagem:
Uma linha de base foi construída para os picos que foram registrados. Os picos foram então cortados e pesados. A área dos picos sendo proporcional ao peso, desde que a espessura do papel e o teor de humidade sejam uniformes. Truques como fotocopiar o traço e ampliar o traço podem ser usados para aumentar a precisão.
Como pode ser imitado, picos sobrepostos e amostras contendo muitos constituintes diferentes podem causar sérios problemas ao analista. Agora, os computadores ajudam a reduzir os erros.
Lendo um cromatograma
Embora a instrumentação moderna tenha removido grande parte do trabalho de adivinhação dos dias de papel e tesoura, a capacidade de ler e interpretar um cromatograma é tão importante hoje em dia.
O vestígio deve ser sempre verificado, pois esta será a primeira indicação se algo correu mal com a cromatografia. As verificações simples incluem:
- A linha de base parece OK, plana e sem muito ruído?
- As formas dos picos são aceitáveis? Não há demasiada assimetria, bonito e nítido e na escala
- Existe o número certo de picos? Qualquer pico extra ou ausente?
- Os picos de referência e padrão interno são corretamente identificados, e os tempos de retenção OK?
Embora os dados sejam todos registrados e os cálculos feitos para o analista, é tarefa do analista certificar-se de que não foram cometidos erros. Uma discussão sobre a análise de dados em sistemas modernos é encontrada neste artigo: Análise Automatizada de Métricas de Instrumentação HPLC de Acesso Livre.