Kategori Beta-lactamashämmare.
Clavulanatkalium innehåller motsvarande minst 75,5 procent och högst 92,0 procent C8H9NO5, beräknat på vattenfri substans.
Förpackning och förvaring Clavulanatkalium ska förvaras i tätt slutna behållare och förvaras vid en temperatur mellan 2º och 8º.
Märkning Märkningen på behållaren anger (1) förvaringstillstånd; (2) parenteral eller icke-parenteral kvalitet.
Identifiering
A. Kromatogrammet av det preparat för analys som erhållits enligt anvisningarna i analysen uppvisar en huvudtopp för clavulansyra, vars retentionstid motsvarar den som uppvisas i kromatogrammet av det standardpreparat som erhållits enligt anvisningarna i analysen.
B. Det ger de reaktioner som är karakteristiska för kaliumsalter (bilaga 5.1).
pH 5,5 till 8,0, i en 1,0-procentig w/v-lösning (bilaga 4.11).
Vatten Högst 1,5 procent w/w (Karl Fischer-metoden, bilaga 4.12).
Gränsvärde för kaliumkalium clavam-2-carboxylat Högst 0,01 procent. Utför bestämningen enligt beskrivningen i ”Högtrycksvätskekromatografi” (tillägg 3.5).
Mobil fas Bered 0,1 M natriumdihydrogenfosfat, justera med fosforsyra till ett pH på 4,0±0,1 och filtrera genom ett membranfilter med 0,5 μm eller finare porositet. Gör justeringar vid behov. Standardlösning Lös upp Clavam-2-carboxylatkalium RS i vatten för att erhålla en lösning med en känd koncentration på cirka 40 μg per ml.
Testlösning Överför cirka 100 mg Clavulanatkalium, noggrant vägt, till en 10 ml mätkolv, lös upp i och späd med vatten till volym, och blanda.
Upplösningslösning Lös upp en lämplig mängd klavulanatkalium i standardlösningen för att erhålla en lösning som innehåller ca 1 mg klavulanatkalium och 30 μg klavam-2-carboxylatkalium per ml.
Kromatografiskt system Det kromatografiska förfarandet kan utföras med hjälp av a) en kolonn av rostfritt stål (30 cm × 4 mm) packad med oktadekylsilan som är kemiskt bunden till porösa kiseldioxid- eller keramiska mikropartiklar (3 till 10 μm), b) rörlig fas med en flödeshastighet på 0,5 ml per minut och c) en ultraviolett fotometer inställd på 210 nm.
För att bestämma det kromatografiska systemets lämplighet, kromatografera standardlösningen och registrera toppresponserna enligt anvisningarna under Procedur: symmetrifaktorn är högst 1,5 och den relativa standardavvikelsen för upprepade injektioner är högst 2,0 %. Kromatografera upplösningslösningen och registrera toppresponserna enligt anvisningarna i procedur: Upplösningsfaktorn mellan topparna för clavam-2-carboxylsyra och clavulansyra är minst 1,0.
Procedur Injicera separat lika stora volymer (ca 20 μl) av standardlösningen och testlösningen i kromatografen, registrera kromatogrammen och mäta responserna för de viktigaste topparna. De relativa retentionstiderna är cirka 0,7 för clavam-2-carboxylsyra och 1,0 för clavulansyra. Beräkna procentandelen clavam-2-carboxylatkalium
Gränsvärde för metanol och tert-butylamin Högst 0,1 viktprocent metanol eller högst 0,2 viktprocent tert-butylamin. Utför bestämningen enligt beskrivningen i ”Gaskromatografi” (tillägg 3.4).
Standardlösning Till en 100 ml mätkolv som innehåller 50,0 ml 3 M natriumhydroxid tillsätt ca 6 ml metanol och 12 ml tert-butylamin, båda noggrant vägda, späd med 3 M natriumhydroxid till
volym och blanda. Överför 10,0 ml av denna stamlösning till en andra 100 ml mätkolv, späd med 3 M natriumhydroxid till volym och blanda. Överför 10,0 ml av denna lösning till en tredje 100 ml mätkolv, späd med 3 M natriumhydroxid till volym och blanda. Överför 7,0 ml av denna lösning till en fjärde 100 ml mätkolv, tillsätt 3,0 ml 3 M natriumhydroxid, späd med 4-metyl-2-pentanon till volym och blanda. Låt faserna separera och använd det klara skiktet av metylisobutylketon som standardlösning. Denna lösning innehåller cirka 36,6 μg metanol och 63,8 μg tertbutylamin per ml. Använd denna lösning inom 5 timmar.
Testlösning Överför ca 3 g Clavulanatkalium, noggrant vägt, till en 100 ml mätkolv, tillsätt 10,0 ml 3 M natriumhydroxid och skaka tills det är upplöst. Låt svalna i ett kallt vattenbad, späd med 4-metyl-2-pentanon till volymen, tillslut kolven och skaka kraftigt i 3 minuter, med tillfälliga ventileringar. Låt faserna separera och använd det klara skiktet av metylisobutylketon som testlösning. Använd denna lösning inom 5 timmar.
Kromatografiskt system Det kromatografiska förfarandet kan utföras med hjälp av a) en glaskolonn (30 m × 0,32 mm) som är belagd med stationär fas av dimetylpolysiloxanolja och som hålls vid 40º, sedan programmeras för att öka med en hastighet av 55º per minut till 200º och hålls vid denna temperatur i 4 minuter, b) injektionsöppningen och detektorblocket hålls vid 150º, c) kväve som bärargas, och d) en flamjoniseringsdetektor. För att bestämma det kromatografiska systemets lämplighet, kromatografera standardlösningen och registrera toppresponserna för metanol, tert-butylamin och metylisobutylketon enligt anvisningarna för förfarande: symmetrifaktorn är högst 1.6 för metanol- och tert-butylamintopparna, kolonnens effektivitet är minst 25 000 teoretiska plattor, upplösningsfaktorn mellan metanol- och tert-butylamintopparna är minst 20 och mellan tert-butylamintopparna och 4-metyl-2-pentanontopparna är minst 10, och den relativa standardavvikelsen för upprepade injektioner är högst 10 %.
Förfarande Injicera separat lika stora volymer (ca 1 μl) av standardlösningen och testlösningen i kromatografen, registrera kromatogrammen och mät areorna av svaren för metanol- och tert-butylamintopparna.
Beräkning Beräkna procentandelarna metanol och tert-butylamin i Clavulanatkalium.
Kromatografisk renhet Utför bestämningen enligt beskrivningen i ”Högtrycksvätskekromatografi” (bilaga 3).5).
Lösning A Bered en lösning av 0,05 M natriumdihydrogenfosfat, justera med fosforsyra till ett pH på 4,0±0,1 och filtrera genom ett filter med en porositet på 0,5 μm eller finare.
Lösning B Bered en blandning av lika stora volymer av lösning A och metanol.
Mobil fas Använd varierande blandningar av lösning A och lösning B enligt anvisningarna för Kromatografiskt system. Gör justeringar i båda lösningarna vid behov.
Standardlösning Bered en lösning av Clavulanate Lithium RS i lösning A med en känd koncentration på ca 0,1 mg per ml.
Testlösning Bered en lösning av Clavulanate Kalium i lösning A som innehåller 10.0 mg per ml.
Upplösningslösning Bered en lösning av Clavulanate Lithium RS och amoxicillin i lösning A som innehåller 0,1 mg av vardera per ml.
Kromatografiskt system Det kromatografiska förfarandet kan utföras med hjälp av (a) en kolonn av rostfritt stål (10 cm × 4 cm).6 mm) packad med octadecylsilan som är kemiskt bunden till porösa kiseldioxid- eller keramiska mikropartiklar (3 till 10 μm) och hålls vid en konstant temperatur på ca 40º, b) rörlig fas med en flödeshastighet på ca 1 ml per minut, och c) en ultraviolett fotometer inställd på 230 nm.
Systemet är programmerat för att ge en rörlig fas som består av varierande blandningar av lösning A och lösning B. Systemet balanseras under 15 minuter med 100 procent lösning A och hålls i denna sammansättning under 4 minuter efter injektion av den testade lösningen, varefter andelen lösning B ökas linjärt från 0 till 50 procent under en period på 11 minuter. Systemet hålls i denna sammansättning i 3 minuter och byts sedan till 100 % lösning A i 6 minuter. För att bestämma det kromatografiska systemets lämplighet kromatograferas lösningslösningen och toppresponsen registreras enligt anvisningarna för förfarande: de relativa retentionstiderna är cirka 2,5 för amoxicillin och 1,0 för klavulansyra, symmetrifaktorn för klavulansyratoppen är högst 2,0, kolonnens verkningsgrad, bestämd från klavulansyratoppen, är minst 2 000 teoretiska plattor, och upplösningsfaktorn mellan klavulansyratoppen och amoxicillinatoppen är minst 13. Kromatografera standardlösningen och registrera toppresponserna enligt anvisningarna för Förfarande: Den relativa standardavvikelsen för upprepade injektioner är högst 2 %.
Förfarande Injicera separat lika stora volymer (ca 20 μl) av standardlösningen och testlösningen i kromatografen, registrera kromatogrammen och mät toppresponserna.
Beräkning Beräkna den procentuella andelen, uttryckt i clavulanatkaliumekvivalenter, av varje förorening i clavulanatkalium med hjälp av uttrycket:
10(237.3/205,1)(C)(ri/rS),
där 237,3 är molekylvikten för clavulanatkalium, 205.1 är molekylvikten för clavulanatlitium, C är koncentrationen, i mg per ml, av clavulanatkalium RS i standardlösningen, ri är toppresponsen för en enskild föroreningstopp i det kromatogram som erhållits från testlösningen och rS är toppresponsen för clavulansyra i det kromatogram som erhållits från standardlösningen. Summan av alla föroreningstoppar är inte mer än 2 %.
Test Utför bestämningen enligt beskrivningen i ”Högtrycksvätskekromatografi” (bilaga 3.5).
pH 4,4 Natriumfosfatbuffert Lös upp 7.8 g natriumdihydrogenfosfat i 900 ml vatten, justera med fosforsyra eller 10 M natriumhydroxid till ett pH på 4,4±0,1, späd med vatten till 1000 ml och blanda.
Mobil fas Bered en lämplig blandning av 95 volymer pH 4,4 natriumfosfatbuffert och 5 volymer metanol. Gör justeringar vid behov.
Standardberedning Lös upp en noggrant vägd mängd Clavulanate Lithium RS i vatten för att erhålla en lösning med en känd koncentration på cirka 250 μg per ml.
Assayberedning Överför ca 50 mg Clavulanatkalium, noggrant vägt, till en 200 ml mätkolv, lös i och späd med vatten till volym och blanda.
Upplösningslösning Lös en lämplig mängd amoxicillin i Standardberedningen för att erhålla en lösning som innehåller ca 0,5 mg amoxicillin och ca 250 μg clavulanatlithium per ml.
Kromatografiskt system Det kromatografiska förfarandet kan utföras med hjälp av a) en kolonn av rostfritt stål (30 cm × 4 mm) packad med oktadekylsilan som är kemiskt bunden till porösa kiseldioxid- eller keramiska mikropartiklar (3 till 10 μm), b) rörlig fas med en flödeshastighet på cirka 2 ml per minut och c) en ultraviolett fotometer inställd på 220 nm.
För att bestämma det kromatografiska systemets lämplighet, kromatografera lösningslösningen och registrera toppresponserna enligt anvisningarna under Procedur: Upplösningsfaktorn mellan amoxicillin- och klavulansyratopparna är inte mindre än 3,5 och de relativa retentionstiderna är ungefär 0,5 för klavulansyra och 1,0 för amoxicillin. Kromatografera standardpreparatet och registrera toppresponserna enligt anvisningarna under Procedur: symmetrifaktorn för clavulansyratoppen är högst 1,5 och den relativa standardavvikelsen för upprepade injektioner är högst 2,0 %.
Förfarande Injicera separat lika stora volymer (ca 20 μl) av standardpreparatet och analyspreparatet i kromatografen, registrera kromatogrammen och mät svaren för de viktigaste topparna.
Beräkning Beräkna innehållet av C8H9NO5 i den tagna kaliumklorvulanatet med hjälp av det deklarerade innehållet av C8H9NO5 i litiumklorvulanatet RS.