Rening av IgG med hjälp av DEAE-sefaros-kromatografi

Abstract

IgG kan renas från serum med hjälp av en enkel jonbyteskromatografi i ett steg. Metoden är allmänt använd och fungerar enligt principen att IgG har en högre eller mer basisk isoelektrisk punkt än de flesta serumproteiner. Om pH-värdet hålls under den isoelektriska punkten för de flesta antikroppar binder immunoglobulinerna därför inte till en anjonbytare och separeras från majoriteten av de serumproteiner som är bundna till kolonnmatrisen. Den höga kapaciteten hos anjonbytarkolonnerna gör det möjligt att i stor skala rena IgG från serum. Den anjonbytesreaktiva gruppen dietylaminoetyl (DEAE) som är kovalent bunden till Sefarose (t.ex. DEAE Sefarose CL-6B, Pharmacia, Uppsala, Sverige) är användbar för detta ändamål. Den tillhandahålls förvälld och färdig för packning i en kolonn, och den är robust och har hög bindningskapacitet. Dessutom är den relativt stabil mot förändringar i jonstyrka och pH. Andra matriser (t.ex. DEAE-cellulosa) tillhandahålls som fasta ämnen och kräver därför förberedelse och jämvikt (1).

Lämna en kommentar