TEXT
Popis
Aktivace T lymfocytů in vivo i in vitro indukuje expresi CD69. Tato molekula, která je zřejmě nejstarším indukovatelným glykoproteinem buněčného povrchu získaným během aktivace lymfoidů, se podílí na proliferaci lymfocytů a funguje jako receptor přenášející signál v lymfocytech, přirozených zabíječích (NK) buňkách a krevních destičkách (Cambiaggi et al., 1992).
Klonování a exprese
Lopez-Cabrera et al. (1993) identifikovali cDNA pro CD69 s otevřeným čtecím rámcem předpovídajícím 199aminokyselinový protein membránové topologie typu II. Klon CD69 hybridizoval s mRNA o velikosti 1,7 kb, která byla rychle indukována a degradována po stimulaci lymfocytů, což odpovídá přítomnosti signálů rychlé degradace v 3-prime untranslated oblasti. Vyhledávání homologie proteinových sekvencí ukázalo, že CD69 je členem stejné superrodiny transmembránových receptorů typu II jako lektin přirozených zabíječských buněk (NKG2; 161555), který je také mapován na chromozomu 12.
Funkce genu
Shiow et al. (2006) prokázali, že léčba induktorem interferonu alfa/beta (IFN-alfa/beta; 147660, 147640) polyinosin polycytidovou kyselinou inhibuje výstup lymfocytů z lymfoidních orgánů mechanismem, který je částečně vlastní lymfocytům. Transmembránový lektin typu C CD69 byl rychle indukován a CD69-nulové buňky byly špatně zadržovány v lymfoidních tkáních po léčbě polyinosin polycytidovou kyselinou nebo po infekci virem lymfocytární choriomeningitidy. Vystoupení lymfocytů vyžaduje sfingosin-1-fosfátový receptor-1 (S1P1; 601974) a IFN-alfa/beta inhiboval reaktivitu lymfocytů na S1P1. Naproti tomu CD69-nulové buňky si po vystavení IFN-alfa/beta zachovaly funkci S1P1. Při pokusech s koexpresí CD69 inhiboval chemotaktickou funkci S1P1 a vedl ke snížení modulace S1P1. V reportérovém testu vedlo zesíťování ke společnému zesíťování a aktivaci chiméry CD69/CD3-eta. CD69 se koimunoprecipitoval s S1P1, ale ne s příbuzným receptorem S1P3 (601965). Shiow et al. (2006) dospěli k závěru, že CD69 tvoří komplex s S1P1 a negativně jej reguluje a že funguje po IFN-alfa/beta a možná i po dalších aktivačních podnětech, aby podpořil retenci lymfocytů v lymfoidních orgánech.
Mapování
Cambiaggi et al. (1992) vytvořili a charakterizovali mezidruhové somatické buněčné hybridy mezi lidskými aktivovanými zralými T buňkami a myšími thymomovými buňkami BW5147. U hybridů byla pozorována přednostní segregace lidských chromozomů. U klonů zjistili koexpresi antigenů CD4 (186940) a CD69. Molekulární a karyotypové studie hybridů prokázaly, že lokus kódující CD69 se mapuje na lidský chromozom 12, stejně jako lokus pro CD4. Ačkoli exprese antigenu CD69 je časnou událostí po aktivaci T-lymfocytů a rychle klesá při absenci exogenních podnětů, u hybridů, které vyvinuli, byla exprese konstitutivní, podobně jako u časných prekurzorů thymocytů a zralých thymocytů. Toto zjištění naznačuje dominantní vliv genomu myších nádorových buněk odvozených z thymu na řízení konstitutivní exprese CD69.
Analýzou hybridní DNA somatických buněk a fluorescenční in situ hybridizací přiřadili Lopez-Cabrera et al. (1993) gen CD69 do oblasti 12p13-p12.
Zvířecí model
Sancho et al. (2003) analyzovali model kolagenem indukované artritidy u myší divokého typu a myší s deficitem Cd69 a zjistili, že myši s Cd69 -/- vykazovaly vyšší výskyt a závažnost artritidy se zhoršenou imunitní odpovědí T- a B-buněk na kolagen typu II. Hladiny transformujícího růstového faktoru beta-1 (TGFB1; 190180) a TGFB2 (190220), které působí jako ochranné látky při kolagenem indukované artritidě, byly u Cd69-nulových myší sníženy v zánětlivých ložiscích, což koreluje se zvýšením prozánětlivých cytokinů. Lokální injekce blokujících anti-TGF protilátek zvýšila závažnost artritidy a hladiny mRNA prozánětlivých cytokinů u Cd69 divokého typu, ale ne u nulových myší. Sancho et al. (2003) dospěli k závěru, že CD69 je negativním modulátorem autoimunitní reaktivity a zánětu prostřednictvím syntézy TGFB1, cytokinu, který naopak snižuje produkci různých prozánětlivých mediátorů.
Esplugues et al. (2003) pozorovali výrazně snížený růst nádorů s deficitem MHC třídy I u myší s Cd69 -/- ve srovnání s divokým typem. Zvýšená protinádorová odpověď byla spojena se zvýšenou lokální akumulací T a NK lymfocytů a prozánětlivých cytokinů a sníženou produkcí Tgfb. Léčba protilátkami proti NK buňkám obnovila schopnost nádorů růst u myší Cd69 -/-. U myší s deficitem Cd69 i Rag2 (179616) došlo ke zvýšenému narušení růstu nádorů. Esplugues et al. (2003) dospěli k závěru, že CD69 je negativním regulátorem protinádorových reakcí.