Produkce alfa/beta a gama/delta dvojitě negativních (DN) T-buněk a jejich role v udržení těhotenství

Po vystavení hydrokortizonu a dexametazonu se thymocyty stávají apoptotickými a podléhají buněčné smrti . Zda pohlavní steroidy způsobují ztrátu thymocytů apoptózou, bylo zkoumáno v řadě studií, v nichž byla zvířata vystavena podávání estrogenů. Bohužel výsledky se vyznačovaly nedostatkem shody. V některých studiích vedla léčba estrogeny ke zvýšení míry apoptózy thymocytů , zatímco v jiných zprávách léčba estrogeny vedla k malému nebo žádnému důkazu apoptotické smrti . V další studii tohoto fenoménu Zoller et al. zjistili, že u březích myší dochází k rozsáhlému úbytku thymocytů a involuci thymu, aniž by kdy došlo k apoptóze thymocytů. U březích myší se hladiny estrogenů pohybují mezi 7 ng/ml až 13 ng/ml . Ve studiích, které uváděly vysoký výskyt apoptózy thymocytů, byly zvířatům podávány hladiny estrogenů daleko přesahující tyto hodnoty . Bez důkazu, že fyziologické hladiny estrogenu způsobují apoptózu, lze tedy tento proces vyloučit jako příčinu involuce thymu a ztráty thymocytů.

Někteří badatelé navrhli, že ke ztrátě thymocytů dochází proto, že estrogen blokuje produkci T-buněk na úrovni prekurzorů. Tento předpoklad vychází ze studie, v níž léčba estrogeny vedla ke zvýšení hladiny nejranějších CD44+ progenitorů a k vyčerpání všech definovaných podskupin thymocytů CD4+ a CD8+ T-buněk . Jiní výzkumníci navrhli, že involuce thymu je způsobena estrogeny indukovaným snížením počtu časných progenitorů thymu . Tyto studie naznačují možnost, že úbytek thymocytů je důsledkem změny v produkci T-buněk.

Martin a spol. pomocí světelné a elektronové mikroskopie pozorovali estrogenem indukovaný úbytek thymocytů v subkapsulární a hluboké kůře brzlíku potkana. V dřeňové oblasti nalezli důkazy o zvýšení cévní propustnosti cév nacházejících se v blízkosti kortikomedulární spojky. Lymfocyty často migrovaly zvětšenými stěnami těchto cév. Došli k závěru, že „uvolňování lymfocytů z brzlíku se zdá být hlavním faktorem vyvolávajícím involuci brzlíku“. Jiní pozorovali, že lymfatické cévy v involutovaném thymu jsou plné lymfocytů (T-buněk).

Ačkoli nebyly takto identifikovány, tyto lymfatické cévy by musely být eferentní lymfatické cévy, protože thymus postrádá aferentní variety , což je důležitý rozdíl.

Oner a Ozan uvedli, že dlouhodobá léčba samic potkanů testosteronem nebo estrogenem (denně po dobu 3 týdnů) způsobila rozsáhlou involuci thymu. Tato involuce byla doprovázena úbytkem thymocytů v subkapsulární oblasti i v hluboké kůře. Krevní cévy v dřeni thymu byly rovněž zvětšeny, jak bylo zaznamenáno ve zprávě Martina a kol. Nejvýznamnějším nálezem Onera a Ozana však byla identifikace žírných buněk v pojivové tkáni tymické kapsuly a ve stromatu dřeně thymu. U neléčených kontrolních potkanů byly žírné buňky rozmístěny řídce, zatímco u zvířat léčených steroidy byl jejich počet zvýšený a často se nacházely ve shlucích. Skutečnost, že žírné buňky vylučují vazodilatátory, neponechává pochybnosti o příčině zvýšení cévní propustnosti; což může být důvodem, proč byly involutované thymusy plné lymfocytů. Pokud jde o identitu těchto lymfocytů, studie na nahých myších s injekcí estrogenu a s implantovaným thymem ukázaly, že „úbytek thymocytů“ je důsledkem vypuzení dvou podskupin DN T-buněk . Jedna podskupina měla typický αβ T-buněčný receptor (TCR) a druhá měla jedinečný γδ TCR.

T-buněčná produkce

Tymus se skládá ze dvou odlišných laloků, z nichž každý se skládá z centrální dřeně a vnější kůry. Oba laloky obalují dvě vrstvy pojivové tkáně, oddělené dutinou. U většiny druhů dává pouzdro vznik trabekulám, které pronikají kůrou a končí na kortikomedulární spojce, čímž zajišťují strukturální spojení s dření. Bazální membrána podporuje specializovaný zploštělý epitel, který vystýlá subkapsulu a trabekuly. Tepny se pohybují uvnitř kapsuly a poté buď vstupují do kůry jako arterioly, nebo pokračují v trabekulách, dokud nedosáhnou kortikomedulární junkce, kde přecházejí do dřeně. Arterioly se postupně zmenšují a pokračují v celém thymu jako kapiláry, které se nakonec přemění na žilní kapiláry a následně se zvětší a vytvoří postkapilární venuly (PCV). Tyto venuly nakonec vedou k velkým krevním cévám, které se vracejí zpět do trabekul, kde odcházejí v těsné blízkosti vstupujících arterií .

Rozložení krevních a lymfatických cév (LV) není rovnoměrné. Například v kůře chybí PCV, zatímco dřeň jich obsahuje velké množství . Kromě toho kůra obsahuje malý kontingent rozvětvených LV, které se nacházejí hlavně v subkapsulární oblasti . Tyto cévy zasahují do kapsuly a extralobulární oblasti a napojují se na eferentní lymfatické cévy (ELV) . Ve dřeni jsou LVs hojnější a jsou lokalizovány v oblasti kortikomedulární junkce. Ty se spojují s ELV v trabekulách. Žírné buňky v kůře chybí, ale nacházejí se v blízkosti v pojivové tkáni pouzdra . Ve dřeni se žírné buňky nacházejí v blízkosti LVs i PCVs . Pozoruhodné je, že v involutovaném brzlíku je počet žírných buněk výrazně zvýšený .

Progenitoři T-buněk produkovaných v kostní dřeni se do brzlíku dostávají prostřednictvím arteriální větve oběhového systému. Po vstupu do žlázy putují arteriolou i arteriálními a venózními kapilárami, až dorazí do PCV. Poté progenitory přecházejí do stromatu thymu pomocí procesu označovaného jako extravazace nebo diapedéza. Diapedéza probíhá v cévách, které mají stěny z endotelu a postrádají svalovou vrstvu , jako jsou PCV a LV. Endotelové buňky jsou jedinečné v tom, že lymfocyty jsou schopny se vsunout mezi buněčné spoje a poté projít buď do thymického stromatu, nebo z něj ven . Pohyb lymfocytů je podporován žírnými buňkami aktivovanými estrogeny prostřednictvím jejich produkce histaminu a serotoninu, což následně způsobuje rozšíření buněčných spojů endotelových buněk . Diapedéza v PCV je jednosměrná a omezuje se na pohyb lymfocytů z lumen do thymu . Pro přechod z thymu využívají T-buňky LVs , protože ty jsou schopny reverzní diapedézy .

Obrázky 1 a 2 graficky znázorňují vývoj thymocytů u pre- a postpubertálních myší. Na každém obrázku jsou znázorněna čtyři prostorově definovaná vývojová stadia v kůře, která Lind a jeho kolegové zmapovali pomocí progenitorových markerů CD117 a CD25. Diferenciální exprese těchto dvou markerů odráží vývojové změny thymocytů při jejich pohybu směrem ven z kortikomedulárního spojení do kůry. V tomto procesu je pohyb thymocytů z velké části podporován interakcí mezi chemokiny produkovanými kortikálními epiteliálními buňkami ve specifických oblastech kůry a chemokinovými receptory thymocytů . Stádium 1 (CD117+CD25-) začíná v kortikomedulární junkci a je charakterizováno thymocyty s multilineárním potenciálem. Tyto buňky mohou kromě toho, že dávají vzniknout T lymfocytům, se vyvinout také v B lymfocyty, stejně jako v dendritické a NK buňky. Buňky, které dosáhnou stadia 2 (CD117+CD25+), již nemají schopnost stát se B lymfocyty a NK buňkami, ale mohou dát vzniknout αβ T buňkám, γδ T buňkám a dendritickým buňkám. V tomto stadiu je detekován intracelulární protein CD3ε . Kromě toho dochází ve stadiu 2 k významné proliferaci thymocytů. Buňky, které dosáhnou stadia 3 (CD117-CD25+), jsou vázány na linii T-buněk. Intracelulární syntéza proteinu CD3ε pokračuje v nezmenšené míře. V tomto stadiu je poprvé detekován protein TCR β. Buňky, které exprimují produktivní přestavby TCR β s řetězcem α, jsou vybrány k proliferaci a postupují do stadia 4, což je proces označovaný jako β selekce. Ve stádiu 4 (CD117-CD25-) dosáhly thymocyty subkapsulární oblasti kůry se svým TCR na místě a vazebnými složkami γ a δ přidanými ke komplexu CD3. Většina z nich prošla vývojovou cestou αβ TCR a jsou charakterizovány jako αβ CD4-CD8- dvojitě negativní (DN) T-buňky. Thymocyty, které vyvinuly γδ TCR, se označují jako γδ DN T-buňky. Jejich počet tvoří 5-10 % všech DN T-buněk .

DN dráha T-buněk

Gamma/delta T-buňky se v brzlíku po 4. stadiu vývoje nevyskytují . To naznačuje, že : To naznačuje: 1) nepřítomnost tkáně thymu speciálně určené k pokračování jejich cesty usnadněné chemokiny; a 2) velkou pravděpodobnost, že opouštějí thymus bezprostředně po své produkci. Lymfatické cévy nacházející se poblíž v subkapsulární kůře jsou velmi pravděpodobně prostředkem jejich odchodu. U myší je cesta DN funkční krátce po narození, přičemž DN T-buňky se nacházejí v játrech a slezině čtyřdenních zvířat . Pozoruhodné je, že množství αβ DN T-buněk převyšuje množství γδ DN T-buněk v poměru 4:1 . Na obr. 1 jsou znázorněny navrhované výstupní cesty γδ DN T-buněk a αβ DN T-buněk u prepubertálních myší. Jak je naznačeno, většina T-buněk opouští thymus přes ELV umístěné ve dřeni (plné černé šipky). U postpubertálních myší (obr. 2) však velké množství γδ DN T-buněk a αβ DN T-buněk opouští thymus přes ELV umístěné v subkapsulární kůře (plné červené šipky) v důsledku aktivace žírných buněk thymu vyvolané pohlavními steroidy.

Estrogenní aktivace žírných buněk probíhá prostřednictvím membránového (negenomového) estrogenového receptoru-α (ER-α) . Tato aktivace vede k přílivu mimobuněčného vápníku a k syntéze a uvolňování granul histaminu a serotoninu . Aktivace žírných buněk lze dosáhnout při koncentracích estrogenu mezi 10-11 M a 10-9 M (2,7 pg/ml až 270 pg/ml) . Aktivace testosteronem vyžaduje hladiny, které jsou desetkrát vyšší než hladiny estrogenu . Aktivace slabým androgenem, dehydroepiandrosteronem (DHEA), vyžaduje hladiny, které jsou 1000krát vyšší než hladiny estrogenu . Dihydrotestosteron (DHT) je rovněž aktivátorem žírných buněk . Progesteron je inhibitorem aktivace estrogenů .

U postpubertálních zvířat dosahují endogenní pohlavní steroidy hladin, které jsou plně schopny aktivovat thymické žírné buňky. Například cirkulující hladiny testosteronu u samců myší a potkanů dosahují v průměru 18,7 ng/ml a 5,8 ng/ml . U nebřezích samic myší a potkanů jsou hladiny estrogenů 66 pg/ml, resp. 30,6 pg/ml , a u březích myší se hladiny estrogenů pohybují od 7 ng/ml do 13 ng/ml . Silné důkazy o tom, že ER-α hraje roli v estrogeny indukované involuci thymu, naznačují studie na myších s vyřazeným estrogenovým receptorem (ERKO). U těchto zvířat je ER-α nefunkční; v důsledku toho thymus prochází jen minimální involucí vyvolanou estrogeny .

Klasická cesta T-buněk

Na rozdíl od osudu γδ DN T-buněk si αβ DN T-buňky zachovávají možnost pokračovat ve svém vývoji v thymu. Tato volba se uplatní, když jsou exprimovány markery CD4 a CD8, a z αβ DN T-buněk se stanou CD4+ CD8+ dvojitě pozitivní (DP) T-buňky. Při využití této možnosti DP T-buňky zřejmě ztrácejí schopnost přístupu k DN dráze. Je to buď proto, že je jim v tom bráněno, nebo proto, že opustily oblast subkapsulárních LV. Aboova skupina uvádí úplnou absenci DP T-buněk v souboru SP T-buněk a DN T-buněk nalezených v játrech myší, kterým byl aplikován estrogen . V další vývojové fázi procházejí DP T-buňky pozitivní selekcí, což je postup souběžný s tvorbou dvou podskupin MHC omezených T-buňek s jednou pozitivitou (SP). Tyto podskupiny jsou CD4+ (omezené na MHC třídy II) a CD8+ (omezené na MHC třídy I) T-buňky a jako takové pokračují dále do dřeně. Zde procházejí negativní delecí, což je proces, při kterém jsou jejich αβ TCR vystaveny ektopickým vlastním antigenům. Produkce těchto antigenů probíhá pod vedením promotoru autoimunitního regulátoru (Aire) . Plně zralé CD4+ pomocné, CD4+ CD25+ Foxp3+ regulační a CD8+ cytotoxické T-lymfocyty opouštějí thymus přes LV umístěné ve dřeni (obr. 1, plné černé šipky; obr. 2, přerušované červené šipky).

Interakce mezi DN a SP drahami

Je třeba poznamenat, že propustnost všech LV a PCV je zvýšena kombinovaným působením pohlavních steroidů a žírných buněk. To má za následek zvýšený vstup progenitorů T-buněk a zvýšení rychlosti výstupu DN T-buněk. K získání představy o množství thymocytů, které opouštějí thymus cestou DN, stačí změřit celkový počet thymocytů před kastrací a po ní. To naštěstí provedla řada výzkumníků. Například Pešic a kol. uvedli, že množství thymocytů u kastrovaných a intaktních 60denních samců albino-oxfordských potkanů bylo 1050 × 106, resp. 650 × 106 thymocytů. To by naznačovalo, že aktivace žírných buněk usnadnila odchod 38 % celkového počtu thymocytů. Pozoruhodné je, že tyto thymocyty pocházejí z kůry. Ve studii na intaktních a kastrovaných 60denních samicích potkanů Sprague-Dawley , výsledky ukázaly, že estrogeny způsobily, že 44 % všech thymocytů odešlo cestou DN. Výsledky třetí studie na samcích a samicích dospělých potkanů kmene Wistar-albino ukázaly, že testosteron a estrogen ovlivnily snížení celkového počtu thymocytů o 31 %, resp. 30 %. Tyto studie ukazují vliv pohlavních steroidů na změnu dynamiky produkce T-buněk. U kastrovaných zvířat produkuje brzlík především SP T-buňky. Doba jejich produkce trvá 3-5 dní v kůře a 12-16 dní ve dřeni , celkem tedy ~21 dní. U intaktního zvířete opouští thymus značný počet DN T-buněk cestou DN. Celková doba jejich produkce je 3-5 dní. U těchto zvířat zprávy o snížení hladiny thymocytů o ~ 35 % silně naznačují, že výměna progenitorů nedrží krok s produkcí DN T-buněk.

Pesic et al. rovněž měřili hladiny thymocytů v kůře a dřeni intaktních a kastrovaných samců potkanů. Díky těmto informacím jsme mohli zkoumat vliv vypouštění DN T-buněk na změnu hladin SP T-buněk. Například u kastrovaného zvířete (obr. 3) srovnání hladin thymocytů v kůře a dřeni ukazuje, že 2 % všech thymocytů odchází cestou DN a 11 % se dostává do dřeně, kde se z nich stávají SP T-buňky. Bez kastrace (obr. 4) podobné srovnání naznačuje, že 38 % všech thymocytů odchází cestou DN a pouze 7 % se dostane do dřeně. Produkce DN T-buněk je tedy výsledkem příslovečného „rozcestí“ vývoje T-buněk. Thymocyty mohou buď opustit thymus jako DN T-buňky, nebo mohou zůstat v klasické T-buněčné dráze a opustit ji jako SP T-buňky. Cestu jejich vývoje určují pohlavní steroidy. Například během těhotenství, kdy jsou hladiny estrogenů nejvyšší, využívá velké množství T-buněk cestu DN. V důsledku toho je produkce SP T-buněk na svém vrcholu. Odhadujeme, že během těhotenství se do dřeně dostanou pouze 2 % všech thymocytů.

DN T-buňky

DN T-buňky nepodléhají pozitivní selekci (obr. 1 a 2). V důsledku toho jim chybí restrikce MHC. Tento faktor v kombinaci s jejich jedinečným TCR vytváří vazebné vlastnosti γδ DN T-buněk, které se podstatně liší od vazebných vlastností αβ T-buněk s omezením MHC. Pokud se tyto buňky vážou na fragmenty (epitopy) cizího antigenu, které se nacházejí ve štěrbině molekuly MHC I. nebo II. třídy, γδ DN T-buňky tak nečiní. Místo toho je jejich vazba na cizí antigen založena na konformačním tvaru neporušeného antigenu, podobně jako u protilátek, a je nezávislá na zapojení MHC .

Existují tři hlavní podskupiny γδ DN T-buněk, z nichž jedna je cytolytická. U lidí byla tato podmnožina charakterizována prostřednictvím své TCR jako T-buňky Vγ9Vδ2 . Při aktivaci vylučují interleukin-2 (IL-2), interferon-γ (IFN-γ) a tumor nekrotizující faktor-β (TNF-β) . Tyto cytokiny podporují zánět, cytotoxicitu a hypersenzitivitu opožděného typu (DTH) . T-buňky Vγ9Vδ2 jsou nekonvenční v tom, že jejich aktivaci způsobují neproteiny, jako jsou isoprenoidy a alkylaminy . Místem jejich imunologické aktivity je periferní krevní řečiště . Zde mají důležitou úlohu jak v dohledu nad nádorovými buňkami, tak v protiinfekční imunitě . Druhá podskupina γδ DN T-buněk má všechny vlastnosti Vγ9Vδ2 T-buněk, až na to, že nejsou cytolytické. Důvodem, proč nejsou, je to, že mají intermediární a neúplně exprimovaný vazebný komplex TCR/CD3 . Od této chvíle budou označovány jako γδ DN (int TCR/CD3) T-buňky. Spíše než v krevním řečišti se tyto T-buňky nacházejí v intraepiteliálních lymfocytárních kompartmentech specifických tkání, jako je kůže, střevo, dýchací cesty a děloha . Třetí podskupinou γδ DN T-buněk jsou regulační buňky. U myší jsou charakterizovány jako regulační T-buňky Vγ6Vδ1 . Aktivace těchto regulačních T-buněk γδ DN vede k produkci IL-10 a transformujícího růstového faktoru β (TGF-β) . Tyto cytokiny řídí činnost cytotoxických T buněk, NK buněk, makrofágů, dendritických buněk a B buněk . Regulační T-buňky γδ DN jsou také omezeny na intraepiteliální lymfocytární kompartmenty specifických tkání . V děloze hrají významnou roli při udržení těhotenství.

Imunomodulace, DN T-buňky a udržení těhotenství

Udržení těhotenství závisí do značné míry na zamezení rejekce matky. To se řeší vybudováním imunologické bariéry pomocí buněk, které postrádají schopnost exprese klasických produktů HLA-A a HLA-B . Vzniká tak ochranný kokon (trofoblast), v němž chybí nebo nejsou funkční molekuly MHC I. a II. třídy; v důsledku toho nemůže docházet ke zpracování a prezentaci antigenů molekulami MHC. SP T-buňky jsou tedy jako rejekční faktor eliminovány a na trofoblast reagují pouze γδ DN T-buňky. Místo rejekce jsou však tyto T-buňky nezbytné pro udržení těhotenství. Složitost jejich celkové role a potřeba koordinace vyžaduje rozsáhlou komunikaci mezi γδ DN T-buňkami a deciduou a trofoblastem. Trofoblast například iniciuje kontakt s různými imunitními buňkami prostřednictvím své produkce a uvolňování chemokinů. Jedná se o malé proteiny, které působí jako ligandy na receptory imunitních buněk. Vazba těchto jedinečných ligandů na specifické receptory vede k produkci adhezních molekul respondentními buňkami, čímž jim dává možnost přilnout k endotelu cév. Díky této schopnosti jsou schopny sledovat koncentrační gradient chemokinů k jejich zdroji . Cytokiny produkované γδ DN T-buňkami naproti tomu zahrnují širší uplatnění než chemokiny, neboť ovlivňují růst a vnímavost specifických buněčných populací.

Trofoblast přitahuje imunitní buňky na rozhraní plodu a matky prostřednictvím produkce chemokinů CXCL12 a CXCL16. Například CXCL12 rekrutuje NK buňky, které mají receptory CXCR3 a CXCR4 , a CXCL16 rekrutuje αβ T-buňky, γδ DN T-buňky a monocyty prostřednictvím interakce s receptory CXCR6 . Analýzy deciduy během časné až střední fáze těhotenství identifikovaly přítomnost následujících buněk: 1) γδ DN regulačních T-buněk; 2) γδ DN (int TCR/CD3) T-buněk; 3) CD8+ cytotoxických T-buněk; 4) CD4+ CD25+ Foxp3+ regulačních T-buněk; 5) NK buněk; 6) dendritických buněk; 7) makrofágů a 8) neutrofilů . Všechny tyto buňky se do deciduy dostaly přes kardiovaskulární systém, až na dvě výjimky. Těmito výjimkami jsou γδ DN regulační T-buňky a γδ DN (int TCR/CD3) T-buňky. Tyto dvě podskupiny patří do skupiny, která získává přístup ke svým cílovým tkáním prostřednictvím lymfatického systému .

U netěhotných žen, myší, potkanů a králíků lymfatický systém nepřesahuje myometrium . Proto během časného těhotenství nejsou regulační T-buňky γδ DN a T-buňky γδ DN (int TCR/CD3) schopny reagovat na CXCL16, dokud lymfangiogeneze (růst lymfatických cév) nespojí endometrium s lymfatickým systémem. V důsledku toho se tyto T-buňky dostávají na rozhraní mezi plodem a matkou jako poslední. Jejich pozdní příchod naznačuje pravděpodobnost, že lymfangiogeneze nevyžaduje jejich vstup, alespoň v tomto okamžiku. Jejich účast v procesu přichází později a je nezbytná pro udržení těhotenství.

Gamma/delta DN cytolytické T-buňky se nacházejí v děloze v časných fázích těhotenství . Jejich přítomnost v této lokalitě je velmi pravděpodobně způsobena CXCL16. Hlavní funkcí těchto T-buněk je však detekce a ničení bakterií a jsou vysoce cytolytické. Je tedy neobvyklé, aby se tyto buňky nacházely v těsné blízkosti trofoblastu, aniž by způsobily jeho destrukci . Ochrana trofoblastu by mohla být důvodem, proč se v decidue nachází velké množství CD4+ CD25+ Foxp3+ regulačních T-buněk . Tyto regulační T-buňky jsou plně schopny eliminovat cytolytické T-buňky γδ DN . Je pozoruhodné, že regulační T-buňky Foxp3+ patří mezi první imunitní buňky, které vstupují do dělohy, což naznačuje, že jsou na místě před vstupem cytolytických T-buněk γδ DN . Hladiny Foxp3+ regulačních T-buněk se během těhotenství výrazně zvyšují , přičemž hlavním příjemcem jejich zvýšené produkce je decidua . Je třeba poznamenat, že tato forma ochrany trofoblastu má horní hranici, protože nadměrné množství periferních γδ DN cytolytických T-buněk může způsobit potrat . V těchto studiích nebylo uvedeno, zda zvýšení počtu γδ DN cytolytických T-buněk bylo způsobeno akutní bakteriální infekcí . Předpokládaný důkaz o zapojení regulačních T-buněk Foxp3+ do prevence potratů naznačují zprávy, že ženy se sníženou hladinou těchto T-buněk trpí opakovanými potraty .

NK buňky hrají významnou roli při tvorbě krevních a lymfatických cév. Jejich hlavní odpovědností je produkce velkého množství cytokinů. Mezi ně patří například vaskulární endoteliální růstový faktor (VEGF), fibroblastový růstový faktor (FGF), TNF-β, IFN-γ a angiopoetiny . Krevní NK buňky jsou cytolytické a plně schopné ničit trofoblast . Na rozdíl od cytolytických T-buněk γδ DN však nejsou eliminovány. Místo toho jsou přeměněny na necytolytické NK buňky. Tato přeměna probíhá pod kontrolou TGF-β a zahrnuje přeměnu cytolytických CD56dim CD16+ periferních NK buněk (CD16+ pNK buněk) na necytolytické CD56bright CD16- uterinní NK buňky (CD16- uNK buňky) . Výchozím zdrojem TGF-β pro přeměnu pNK buněk je muž a TGF-β se do deciduální oblasti dostává prostřednictvím ejakulátu . TGF-β je rovněž produkován deciduálními stromálními buňkami . Celková zásoba TGF-β však není nevyčerpatelná. Množství TGF-β pocházejícího z ejakulátu je ze zřejmých důvodů omezené a schopnost stromálních buněk produkovat tento cytokin je vážně narušena. Je to proto, že TGF-β se podílí na dvou souběžných a protichůdných operacích. Kromě přeměny pNK buněk na uNK buňky se TGF-β podílí také na implantaci. Jeho úlohou v tomto procesu je iniciovat apoptotickou destrukci deciduálních stromálních buněk.

Shooner a kol. zaznamenali, že stromální buňky březí dělohy potkana procházejí mezi 5. a 14. dnem těhotenství nárůstem apoptózy vyvolaným TGF-β. V tomto období dochází k nárůstu apoptózy. V tomto období koreluje úbytek stromálních buněk se sníženou produkcí dvou izoforem TGF-β1 a TGF-β2. Po 14. dni je přeživšími stromálními buňkami produkováno pouze omezené množství TGF-β. Bez doplnění by pokles TGF-β mohl mít závažný dopad na transformaci pNK buněk na uNK buňky. Red-Horse poznamenal, že lymfatické cévy v oblasti endometria březích myší se začínají vyvíjet mezi embryonálním dnem 9,0 a 9,5 dnem. To by znamenalo, že tyto lymfatické cévy mají ~ 5 dní na dokončení svého vývoje, než dojde k závažnému vyčerpání TGF-β. Tento časový rámec je kritický, protože regulační T-buňky γδ DN, které jsou hlavním zdrojem TGF-β, mohou dosáhnout rozhraní mezi plodem a matkou pouze prostřednictvím nově vytvořených lymfatických cév.

TGF-β je považován za pleiotropní cytokin. Tato vlastnost je zřejmá během udržování těhotenství. Zde má tento cytokin významný vliv na lymfangiogenezi tím, že kontroluje hladiny pNK buněk . Zatímco však TGF-α plní tuto funkci, dochází k jeho sebedestrukci tím, že iniciuje apoptózu deciduálních stromálních buněk . Oba procesy jsou nezbytné pro udržení těhotenství. Perspektiva vyčerpání cytokinů během implantace je znepokojivá. Lze si představit scénáře, v nichž jsou hladiny stromálních buněk nižší než normálně nebo v nichž dochází k rychlejší apoptóze stromálních buněk vyvolané TGF-β . V těchto případech by implantace proběhla úspěšně, zatímco nedostatek TGF-β by mohl změnit tvorbu lymfatických cév. Pokud by k tomu došlo, znemožnilo by to regulačním T-buňkám γδ DN dosáhnout rozhraní mezi plodem a matkou. Ztráta hlavního zdroje TGF-β by mohla bránit přeměně pNK buněk na uNK buňky. Je pozoruhodné, že řada studií uvádí, že nadměrné hladiny pNK u těhotných žen vysoce korelují s opakovanými spontánními potraty .

.