Abstract
IgG lze ze séra purifikovat jednoduchým jednokrokovým postupem iontově-výměnné chromatografie. Metoda je široce používaná a funguje na principu, že IgG má vyšší nebo zásaditější izoelektrický bod než většina sérových proteinů. Pokud se tedy pH udržuje pod izoelektrickým bodem většiny protilátek, imunoglobuliny se nevážou na aniontový výměník a jsou odděleny od většiny sérových proteinů vázaných na matrici kolony. Vysoká kapacita aniontově výměnných kolon umožňuje rozsáhlou purifikaci IgG ze séra. Pro tento účel je užitečná aniontově výměnná reaktivní skupina, diethylaminoethyl (DEAE) kovalentně navázaná na Sepharose (např. DEAE Sepharose CL-6B, Pharmacia, Uppsala, Švédsko). Dodává se přednabobtnalá a připravená k zabalení do kolony, je robustní a má vysokou vazebnou kapacitu. Kromě toho je relativně stabilní vůči změnám iontové síly a pH. Jiné matrice (např. DEAE celulosa) se dodávají jako pevné látky, a proto vyžadují přípravu a ekvilibraci (1).
.