Komplementový systém je systém sérových proteinů, které reagují s komplexy antigen-protilátka. Pokud k této reakci dojde na povrchu buňky, dojde k vytvoření transmembránových pórů, a tedy k destrukci buňky. Základní kroky testu fixace komplementu jsou následující:
- Pacientovi se oddělí sérum.
- Pacienti mají v séru přirozeně různé hladiny proteinů komplementu. Aby se eliminoval jakýkoli vliv, který by to mohlo mít na test, musí se proteiny komplementu v pacientově séru zničit a nahradit známým množstvím standardizovaných proteinů komplementu.
- Sérum se zahřeje takovým způsobem, aby se zničily všechny proteiny komplementu – ale žádné protilátky – v něm. (To je možné, protože proteiny komplementu jsou mnohem náchylnější ke zničení teplem než protilátky.)
- Do séra se přidá známé množství standardních proteinů komplementu. (Tyto proteiny se často získávají ze séra morčat.)
- Do séra se přidá antigen, který je předmětem zájmu.
- Do séra se přidají červené krvinky (sRBC), které byly předem navázány na protilátky proti sRBC. Test je považován za negativní, pokud roztok v tomto bodě zrůžoví, a za pozitivní v opačném případě.
Pokud pacientovo sérum obsahuje protilátky proti zájmovému antigenu, budou se v kroku 3 vázat na antigen a vytvářet komplexy antigen-protilátka. Proteiny komplementu budou s těmito komplexy reagovat a budou vyčerpány. Když se tedy v kroku 4 přidají komplexy sRBC a protilátek, nezůstane v séru žádný komplement. Pokud však nejsou přítomny žádné protilátky proti zájmovému antigenu, komplement se nevyčerpá a bude reagovat s komplexy sRBC a protilátek přidanými v kroku 4, lyzovat sRBC a vylít jejich obsah do roztoku, čímž se roztok změní na růžový.
.