Test fixace komplementu

Komplementový systém je systém sérových proteinů, které reagují s komplexy antigen-protilátka. Pokud k této reakci dojde na povrchu buňky, dojde k vytvoření transmembránových pórů, a tedy k destrukci buňky. Základní kroky testu fixace komplementu jsou následující:

  1. Pacientovi se oddělí sérum.
  2. Pacienti mají v séru přirozeně různé hladiny proteinů komplementu. Aby se eliminoval jakýkoli vliv, který by to mohlo mít na test, musí se proteiny komplementu v pacientově séru zničit a nahradit známým množstvím standardizovaných proteinů komplementu.
    1. Sérum se zahřeje takovým způsobem, aby se zničily všechny proteiny komplementu – ale žádné protilátky – v něm. (To je možné, protože proteiny komplementu jsou mnohem náchylnější ke zničení teplem než protilátky.)
    2. Do séra se přidá známé množství standardních proteinů komplementu. (Tyto proteiny se často získávají ze séra morčat.)
  3. Do séra se přidá antigen, který je předmětem zájmu.
  4. Do séra se přidají červené krvinky (sRBC), které byly předem navázány na protilátky proti sRBC. Test je považován za negativní, pokud roztok v tomto bodě zrůžoví, a za pozitivní v opačném případě.

Pokud pacientovo sérum obsahuje protilátky proti zájmovému antigenu, budou se v kroku 3 vázat na antigen a vytvářet komplexy antigen-protilátka. Proteiny komplementu budou s těmito komplexy reagovat a budou vyčerpány. Když se tedy v kroku 4 přidají komplexy sRBC a protilátek, nezůstane v séru žádný komplement. Pokud však nejsou přítomny žádné protilátky proti zájmovému antigenu, komplement se nevyčerpá a bude reagovat s komplexy sRBC a protilátek přidanými v kroku 4, lyzovat sRBC a vylít jejich obsah do roztoku, čímž se roztok změní na růžový.

.

Napsat komentář