補体固定化試験

補体系とは、抗原抗体複合体に反応する血清タンパク質の体系です。 この反応が細胞表面で起こると、膜貫通孔が形成され、その結果、細胞が破壊されることになる。 補体固定化試験の基本的な手順は次のとおりです。

  1. 患者から血清を分離します。
  2. 患者はもともと血清中の補体タンパクの量が異なります。
    1. 血清は、その中のすべての補体タンパク質(ただし抗体は含まない)が破壊されるように加熱されます。 (補体蛋白は抗体よりも熱による破壊を受けやすいので、このようなことが可能になります)
    2. 血清に既知量の標準的な補体蛋白を添加します。 (
    3. 血清に抗赤血球抗体をあらかじめ結合させたヒツジ赤血球を添加します。 この時点で溶液がピンク色になれば陰性、そうでなければ陽性と判定します。

    患者さんの血清中に目的の抗原に対する抗体があれば、手順3で抗原と結合して抗原抗体複合体が形成されます。 補体蛋白はこの複合体と反応し、枯渇する。 したがって、ステップ4でsRBC-抗体複合体を添加すると、血清中に補体が残らなくなる。 しかし、目的の抗原に対する抗体が存在しない場合、補体は枯渇せず、ステップ4で添加したsRBC-抗体複合体と反応し、sRBCを溶解してその内容物を溶液中に流出させ、溶液をピンク色に変化させる。

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