6.3:従属栄養体と選択培地

メット変異体は、メットを含まない培地で成長できない、つまりメット従属栄養体であることがわかります。 従属栄養細菌とは、遺伝子の変異により必須栄養素を合成できなくなった微生物のことです。 多くの実験室株は、必須栄養素の合成を阻害する変異を複数持っている。 例えば、BY4742株はHIS3、LEU2、LYS2、URA3遺伝子に変異があるため、ヒスチジン、ロイシン、リジン、ウラシルを含む培地でのみ生育することになる。 従属栄養細菌は、遺伝学において多くの用途がある。 研究者は、プラスミド形質転換の宿主として、しばしば補助栄養株を用いる(第12章)。 形質転換に用いるプラスミドは、宿主株で欠損している遺伝子の機能的対立遺伝子を持ち、必須栄養素を欠く培地で生育する能力によって形質転換体を選択することができる

合成培地は、すべての成分が定義されているので、従属栄養生物の培養と研究に不可欠なツールである。 酵母の研究者は、合成培地のために様々な異なる処方を開発してきた。 すべての合成培地は、炭素源(通常はD-グルコース)、窒素源、必須ビタミンやミネラルを含んでいます。 ビタミンとミネラルは通常、酵母窒素ベース(YNB)として知られる製剤で購入する。 合成培地に添加するサプリメントは、特定の遺伝子型の生育を支援したり、逆に選択したりするために調整することができる。 このコースでは、ほとんどのS. cerevisia株の増殖をサポートするYeast Complete (YC) 培地を使用する。 YC 培地での野生型株の増殖速度は、YPD のようなリッチな培地での増殖速度よりやや遅いが、長期間生存可能な菌株が得られる。 次ページの表は、アミノ酸とヌクレオチド塩基を豊富に含むYCの組成を示したものである。 完全なYC培地だけでなく、一部の成分を省いた選択培地も使用します。 例えば、この実験では、メチオニンを除く下表のすべてのYC成分を含むYC-Met「ドロップアウト」培地を使用します

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