CD16

huFcγRIII

huFcγRIII (CD16) はIgG1およびIgG3に約4×106 M-1 (Kurlander and Batker, 1982)で結合し、マクロファージ、NK細胞、好中球、好酸球および一部のT細胞で発現されている (Anderson, 1989)． huFcγRIIIのMrは、50Kから70Kの間で変化する（Fleit et al, 1982）。 huFcγRIII特異的mAbを用いたNKおよび好中球細胞溶解物の免疫沈降研究、続いて脱グリコシル化およびSDS-PAGEにより、2つの細胞タイプにおいて異なるMr値のコアタンパク質が明らかになった (Lanier et al., 1988). その後のcDNAクローニング実験により、NK細胞は好中球のものとは異なるmRNAを転写することが示された（Scallonら、1989；Uedaら、1989；RavetchおよびPerussia、1989；Edbergら、1989；Selvarajら、1989）。 したがって、少なくとも2つの遺伝子がhuFCγRIIIをコードする：好中球上のhuFcγRIII-1とNK細胞およびマクロファージ上のhuFcγRIII-2。

huFcγRIII-1, 他のすべてのFcγRと異なり、GPI連結を介して好中球細胞膜に固定され、ホスホイノシトール特異的ホスホリパーゼCにより細胞膜から解放される（Selvarajら,J． 1989; Edbergら, 1989; Ravetch and Perussia, 1989; Scallonら, 1989; Uedaら, 1989)。 好中球を走化性ペプチドformyl-Met-Leu-Pheで刺激すると、好中球膜からhuFcγRIII-1が放出された（Huizingaら、1988）。 これがタンパク質分解切断によるものか、ホスホリパーゼCの活性化によるものかは明らかでない。 huFcγRIII-1のGPI結合ドメインにおける1つのアミノ酸の改変は、短い細胞質尾部を有するタンゼン膜ドメインによるタンパク質の固定化をもたらす（Kurosaki and Ravetch, 1989; Lanier et al, 1989a）。

huFcγRIIと同様に、huFcγRIII-1は二つの同型（NA1およびNA2）存在する。 これらのアロタイプの違いは、乳児における自己免疫性好中球減少症を引き起こす可能性がある（Lalezariら、1986）。 好中球上の2つのレセプター形態（19および21kDa）は、脱グリコシル化後、SDS-PAGE後に区別された（Edbergら、1989）。 19kDaと21kDaの受容体型の発現パターンは、NA1とNA2のアロタイプマーカーの発現パターンと相関していた。 これらのアロタイプ（NA1およびNA2）間の識別は、それぞれmAbs CLB-GRAN11およびGRM1を用いて可能であった（Huizinga et al, 5149>

Most FcγR-mediated neutrophil functions are believed to be transduced by huFcγRII despite the fact that many huFcγRIII-1 sites, 135,000 sites per neutrophil (Fleit et al., 1982) there than huFcγRII sites,∼10,000 per neutrophil (Anderson, 1989).この事実は、多くのhuFcγRII-1が存在することである。） 抗CEおよび抗huFcγR mAbsのFabフラグメントからなるヘテロ抗体でコートしたニワトリ赤血球のADCCは、好中球上のhuFcγRIIおよびhuFcγRIIIの両方を介して仲介された（グラツィアーノら、1989a）。 しかし、好中球は抗huFcγRIIIハイブリドーマ細胞株を殺すことができなかった。 最近の研究は、huFcγRIII-1が、架橋されると、呼吸バーストではなく、ヒドロラーゼの放出を誘発することを実証した（Huizingaら、1990b）。 5149>

好中球上のhuFcγRIII-1の高い密度は、免疫複合体を細胞表面に集中させ、そこでhuFcγRIIと相互作用して引き金とすることができるかもしれない。 実際、研究（Looneyら、1986b；Tetterooら、1987）は、主としてhuFcγRIIIがIgG被覆赤血球への好中球の付着に関与していることを示唆するものである。 同様に、huFcγRIII-1は小さな免疫複合体の好中球への結合に必須であり、一方、huFcγRIIはこの結合を弱く促進するだけであった（Huizingaら、1989a）。 しかし、huFcγRIII-1のこの本質的な結合の役割は、大きな免疫複合体には及ばず、発作性夜間血尿症患者は、huFcγRIII-1の正常レベルの10％しかないが、IgG-ラテックスに対する正常な代謝応答を有した（Huizingaら, 1989a）。 全身性エリテマトーデス（SLE）の患者が、huFcγRIII-1遺伝子の推定上の欠失のために、彼女の好中球にhuFcγRIII-1を発現しないことが見出された（Clarkら、1990年）。 この患者の好中球は、好中球の機能に関する以前の研究（Looneyら、1986b；Tetterooら、1987）で示唆されたように、IgG被覆赤血球をロゼットする能力が低下していた。 しかし、この患者は細菌感染に対して異常な感受性を示すことはなく、他のGPI結合蛋白やhuFcγRIIのレベルも正常であった。 SLEと診断された他の8人の患者はhuFcγRIII-1のレベルが正常であった。 HIVに感染した男性の好中球のかなりの割合（25％）は、huFcγRIII-1の発現が陰性であったが、他のGPI結合タンパク質およびhuFcγRIIのレベルは正常であった（Borosら、1990b）。 huFcγRIII陰性亜集団は、自己免疫不全症候群（AIDS）診断患者およびHIV感染静注薬物乱用者において、HIV感染同性愛者および非感染対照男性に比べて大きかった。 HuFcγRIII-1の消失のメカニズムや、この発現変化の生理的な影響については、まだ調べられていない。 血清中のhuFcγRIIIのレベルは、AIDSの経過中に変化し、病気の末期には、血清huFcγRIIIレベルが最初に増加し、その後減少することが報告されている（Khayat et al,

huFcγRIII-2は、huFcγRIII-1のコアタンパク質Mrよりわずかに大きく（約24K対約20K）、単一の膜貫通ドメインと細胞質ドメインを持つI型膜糖タンパク質である（Unkeless、1989a）。 huFcγRIII-2はマクロファージとNK細胞に見られるhuFcγRIIIの形態である。 膜貫通ドメインは、moFcγRIIαおよびraFc∈RIのα鎖と非常に相同性が高く、同一の8アミノ酸ストレッチを含む。

NK細胞のhuFcγRIII-2は、架橋後にADCCを仲介する（Werfel et al.） 受容体の免疫複合体架橋はまた、インターロイキン-2受容体、IFN-γ、およびTNF-αの転写を誘導し、これらはすべてNK細胞活性を活性化する（Anegonら、1988年）。 したがって、NK細胞上のhuFcγRIII-2の活性化は、NK細胞のADCCのトリガーとして作用するだけでなく、NK細胞のIg非依存性ナチュラルキラー活性を増強させる。 抗LFA-1（CD11a）抗体がNK細胞によるhuFcγRIII-2媒介ADCCを阻害する能力は、NK媒介ADCC中のエフェクター細胞-標的細胞の付着におけるこの接着受容体の関与を示唆している（Werfelら、1989）。 同様に、リンパ球ではなく単球において、LFA-1の遮断は、huFcγRの架橋を介して媒介されるADCCを阻害した（Grazianoら、1989b）

NK細胞の小さなサブセットは、huFcγRIII-2をほとんどまたは全く発現していない（Lanierら、1986）。 huFcγRIIIの発現レベルは、NK細胞系譜における異なる発生段階を意味する可能性がある。 低レベルまたは非huFcγRIII-2発現NK細胞は、rIL-2に応答して、より広範囲に増殖する（Naglerら、1989）。 低い増殖能力、血中の高い存在量、および高い細胞毒性能に基づく最も成熟した段階は、豊富なhuFcγRIII-2を発現するNK細胞からなる。

多くの研究が、脾臓のマクロファージおよびクッパー細胞上のhuFcγRIII-2は、大きな免疫複合体の除去を担う主要な受容体であると実証している。 チンパンジーにおいて、抗huFcγRIII mAb 3G8は、マイナー血液グループ抗原を指向する抗体でコートされた自己赤血球のin vivoクリアランスを阻害した（Clarksonら、1986b）。 mAb 3G8は、免疫血小板性紫斑病、患者が抗血小板抗体を大量に分泌する疾患に対する治療法の可能性としてテストされてきた（Clarksonら、1986a）。 1人の患者を治療したところ、血小板レベルが劇的に上昇し、2週間以内に正常レベルに戻りました。 残念ながら、2回目の治療では劇的な効果は得られなかった。 培養単球上の

hufcγRIIIは、生化学的にNK細胞のものと区別がつかない（Klaassenら、1990年）。 huFc7RIIIがマクロファージによるADCCのトリガー分子であるかどうかについては、報告が分かれている。 抗huFcγRIII mAb、CLB-FcR-GRAN1の添加は、マウスmAbの異なる同型スイッチ変異体（IgG1、IgG2aおよびIgG2b）の赤血球当たり4×104分子または異なるマウスハイブリドーマ細胞株からの同量のIgG3で感作した赤血球に対する培養単球の溶菌活性を低減しなかった（Klaassen等、1990年）。 mAb CLB-FcR-GRAN1による阻害を検出できるように、培養単球上の他のhuFcγRの最大溶解活性以下で実験が行われることを確認するための措置がとられた。 しかしながら、腹膜マクロファージは、新鮮な単球でさえ、抗FcγRIIIを保有するハイブリドーマ細胞株（HC 3G8）を明らかに殺すことができた（Grazianoら、1989b）。 これは、huFcγRIII-2が新鮮な単球上で機能的に検出可能であることを示す最初の証拠であった。 5149>

FcγRは、抗HIV抗体の存在下でFcγR保有細胞のHIV感染を増悪させる可能性がある。 マクロファージ上に発現したHuFcγRIII-2は、マクロファージの抗体依存的なHIV感染の増強を媒介した（Homsyら、1989）。 huFcγRIII-2に対して向けられた抗体はこの効果をブロックしたが、抗huFcγRIまたは抗huFcγRII抗体はこの効果をブロックしない。 HIV-1感染がCD4-gp120相互作用とは無関係に進行し得るという観察は、ウイルスにコードされたFcγRを発現するサイトメガロウイルス感染線維芽細胞が、HIV-1免疫複合体によって感染し得、この感染がIgG会合体によってブロックされ得るという観察によって強められる（McKeatingら、1990）

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