Svantaggi delle matrici di citochine su membrana e matrici di anticorpi per altri obiettivi
Le matrici di anticorpi sono usate per misurare molte proteine simultaneamente in un esperimento, con molto meno tempo, sforzo e costi rispetto all’esecuzione di molti ELISA o western blot necessari per lo stesso numero di analiti. Rispetto ad altri saggi immunologici multipli, come i saggi basati su microsfere, le matrici di anticorpi a membrana sono molto facili da configurare e sono significativamente più economiche per il confronto di quando è necessario confrontare molte proteine in un piccolo numero di campioni.
Gli array di anticorpi offrono diversi vantaggi:
- Non sono richieste attrezzature speciali
- Il metodo di rilevamento della chemiluminescenza è lo stesso di un western blot
- Adatto a qualsiasi sistema di documentazione dei blot chemiluminescenti
- Film sviluppatore o camera oscura da banco
- Densitometro gratuito e software di analisi per il riconoscimento degli spot
- Disponibile per il download gratuito da NIH
- Adatto all’uso con il sistema di rilevazione Li-Cor® Protocollo di array adattato per Li-Cor®
- Ampio intervallo di rilevamento
- Campo di rilevamento di 10,000 volte la rilevazione (in pg/mL)
- Spot di anticorpi duplicati
- Gli anticorpi di cattura sono individuati in duplicato.
- Kit ottimizzato
- Il nostro kit di array di anticorpi contiene tamponi, anticorpi di rilevazione e membrane.
Come funzionano gli array di anticorpi basati su membrana?
Gli array di anticorpi sono un test basato su coppie di anticorpi, analogo all’ELISA, ma utilizzando una membrana come substrato piuttosto che una piastra. Gli anticorpi di cattura sono forniti allineati/stampati su una membrana con ogni coppia di spot che rappresenta un analita diverso. Viene aggiunto il campione (0,2-1 ml di 1 campione per ogni membrana), e poi gli anticorpi rivelatori biotinilati accoppiati e la streptavidina-HRP.
L’array viene analizzato utilizzando gli stessi metodi di un western blot chemioluminescente. Il confronto tra i campioni può essere fatto ad occhio o utilizzando il software di densitometria per un confronto semi-quantitativo. L’intero test può essere eseguito in un solo giorno o con incubazioni notturne.