Abstract
Le IgG possono essere purificate dal siero mediante una semplice procedura di cromatografia a scambio ionico in un solo passaggio. Il metodo è ampiamente utilizzato e funziona sul principio che IgG ha un punto isoelettrico più alto o più basico rispetto alla maggior parte delle proteine del siero. Pertanto, se il pH viene mantenuto al di sotto del punto isoelettrico della maggior parte degli anticorpi, le immunoglobuline non si legano a uno scambiatore di anioni e vengono separate dalla maggior parte delle proteine del siero legate alla matrice della colonna. L’alta capacità delle colonne a scambio anionico permette la purificazione su larga scala delle IgG dal siero. Il gruppo reattivo di scambio anionico, dietilamminoetile (DEAE) legato covalentemente a Sepharose (ad esempio, DEAE Sepharose CL-6B, Pharmacia, Uppsala, Svezia) 癡 utile per questo scopo. Viene fornito pre-imballato e pronto per l’imballaggio in una colonna, ed è robusto e ha un’alta capacità di legame. Inoltre, è relativamente stabile ai cambiamenti di forza ionica e di pH. Altre matrici (ad esempio, la cellulosa DEAE) sono fornite come solidi, e quindi richiedono preparazione ed equilibratura (1).