สารบัญ

Categoria Inhibitor de beta-lactamază.

Clavulanat de potasiu conține echivalentul a nu mai puțin de 75,5 % și nu mai mult de 92,0 % de C8H9NO5, calculat pe bază anhidră.

Condiționare și depozitare Clavulanatul de potasiu se păstrează în recipiente bine închise și se depozitează la o temperatură cuprinsă între 2º și 8º.

Etichetare Eticheta de pe recipient menționează: (1) condițiile de depozitare; (2) calitatea parenterală sau non-parenterală.

Identificare
A. Cromatograma preparatului de analiză obținut conform instrucțiunilor din cadrul analizei prezintă un vârf major pentru acidul clavulanic, al cărui timp de retenție corespunde celui prezentat în cromatograma preparatului standard obținut conform instrucțiunilor din cadrul analizei.
B. Produce reacțiile caracteristice sărurilor de potasiu (apendicele 5.1).

pH 5,5-8,0, într-o soluție de 1,0 % p/v (apendicele 4.11).

Apă Nu mai mult de 1,5 % p/p (metoda Karl Fischer, apendicele 4.12).

Limită de clavam-2-carboxilat de potasiu Nu mai mult de 0,01 %. Efectuați determinarea așa cum este descrisă în „Cromatografia lichidă de înaltă presiune” (apendicele 3.5).
Faza mobilă Se prepară dihidrogenfosfat de sodiu 0,1 M, se ajustează cu acid fosforic la un pH de 4,0±0,1 și se filtrează printr-un filtru cu membrană de 0,5 μm sau mai fină porozitate. Se fac ajustări dacă este necesar. Soluție etalon Se dizolvă Clavam-2-carboxilat de potasiu RS în apă pentru a obține o soluție cu o concentrație cunoscută de aproximativ 40 μg pe ml.
Soluție de testare Se transferă aproximativ 100 mg de Clavulanat de potasiu, cântărit cu precizie, într-un balon cotat de 10 ml, se dizolvă în și se diluează cu apă până la volum și se amestecă.
Soluția de rezoluție Se dizolvă o cantitate adecvată de clavulanat de potasiu în soluția standard pentru a obține o soluție care să conțină aproximativ 1 mg de clavulanat de potasiu și 30 μg de clavam-2-carboxilat de potasiu pe ml.
Sistem cromatografic Procedura cromatografică poate fi efectuată folosind (a) o coloană din oțel inoxidabil (30 cm × 4 mm) umplută cu octadecilsilan legat chimic de microparticule poroase de silice sau ceramică (3 până la 10 μm) (b) fază mobilă la un debit de 0,5 ml pe minut și (c) un fotometru cu ultraviolete setat la 210 nm.
Pentru a determina adecvarea sistemului cromatografic, se cromatografiază soluția standard și se înregistrează răspunsurile la vârfuri conform indicațiilor de la Procedură: factorul de simetrie nu este mai mare de 1,5 și abaterea standard relativă pentru injecțiile repetate nu este mai mare de 2,0 %. Cromatografia Soluția de rezoluție și înregistrarea răspunsurilor la vârfuri conform procedurii: factorul de rezoluție între vârfurile acidului clavam-2-carboxilic și acidului clavulanic nu este mai mic de 1,0.
Procedură Se injectează separat volume egale (aproximativ 20 μl) de soluție standard și soluție de testare în cromatograf, se înregistrează cromatogramele și se măsoară răspunsurile pentru vârfurile majore. Timpii de retenție relativi sunt de aproximativ 0,7 pentru acidul clavam-2-carboxilic și de 1,0 pentru acidul clavulanic. Calculați procentul de clavam-2-carboxilat de potasiu

Limită de metanol și terț-butilamină Nu mai mult de 0,1 % p/p de metanol sau nu mai mult de 0,2 % p/p de terț-butilamină. Efectuați determinarea așa cum este descrisă în „Cromatografia în fază gazoasă” (apendicele 3.4).
Soluție standard Într-un balon cotat de 100 ml care conține 50,0 ml de hidroxid de sodiu 3 M se adaugă aproximativ 6 ml de metanol și 12 ml de terț-butilamină, ambele cântărite cu precizie, se diluează cu hidroxid de sodiu 3 M până la
volum și se amestecă. Se transferă 10,0 ml din această soluție stoc într-un al doilea balon volumetric de 100 ml, se diluează cu hidroxid de sodiu 3 M până la volum și se amestecă. Se transferă 10,0 ml din această soluție într-un al treilea balon cotat de 100 ml, se diluează cu hidroxid de sodiu 3 M până la volum și se amestecă. Se transferă 7,0 ml din această soluție într-un al patrulea balon cotat de 100 ml, se adaugă 3,0 ml de hidroxid de sodiu 3 M, se diluează cu 4-metil-2-pentanonă până la volum și se amestecă. Se lasă fazele să se separe și se utilizează stratul limpede de metil-izobutilcetonă ca soluție etalon. Această soluție conține aproximativ 36,6 μg de metanol și 63,8 μg de tertbutilamină pe ml. Se utilizează această soluție în termen de 5 ore.
Soluția de testare Se transferă aproximativ 3 g de clavulanat de potasiu, cântărit cu precizie, într-un balon cotat de 100 ml, se adaugă 10,0 ml de hidroxid de sodiu 3 M și se agită până la dizolvare. Se lasă să se răcească într-o baie de apă rece, se diluează cu 4-metil-2-pentanonă până la volum, se astupă balonul și se agită energic timp de 3 minute, cu aerisire ocazională. Se lasă fazele să se separe și se utilizează stratul limpede de metil-izobutilcetonă ca soluție de testare. Utilizați această soluție în termen de 5 ore.
Sistem cromatografic Procedura cromatografică poate fi efectuată utilizând (a) o coloană de sticlă (30 m × 0,32 mm) acoperită cu o fază staționară de ulei de dimetilpolisiloxan și este menținută la 40º, apoi programată să crească cu o rată de 55º pe minut până la 200º și menținută la această temperatură timp de 4 minute, (b) portul de injecție și blocul detector sunt menținute la 150º, (c) azot ca gaz purtător și (d) un detector de ionizare cu flacără. Pentru a determina caracterul adecvat al sistemului cromatografic, se cromatografiază soluția standard și se înregistrează răspunsurile vârfurilor de metanol, terț-butilamină și metil-izobutilcetonă, conform instrucțiunilor pentru Procedură: factorul de simetrie nu este mai mare de 1.6 pentru vârfurile de metanol și terț-butilamină; eficiența coloanei nu este mai mică de 25 000 de plăci teoretice; factorul de rezoluție între vârful de metanol și vârful de terț-butilamină nu este mai mic de 20 și între vârful de terț-butilamină și vârful de 4-metil-2-pentanonă nu este mai mic de 10; și abaterea standard relativă pentru injecțiile repetate nu este mai mare de 10 %.

Procedură Se injectează separat volume egale (aproximativ 1 μl) de soluție standard și de soluție de test în cromatograf, se înregistrează cromatogramele și se măsoară suprafețele răspunsurilor vârfurilor de metanol și de tert-butilamină.
Calculare Se calculează procentele de metanol și de tert-butilamină din Clavulanat de potasiu.
Puritate cromatografică Se efectuează determinarea așa cum este descrisă în „Cromatografia lichidă de înaltă presiune” (apendicele 3.
).5).
Soluția A Se prepară o soluție de dihidrogenfosfat de sodiu 0,05 M, se ajustează cu acid fosforic la un pH de 4,0±0,1 și se filtrează printr-un filtru cu porozitatea de 0,5μm sau mai fină.
Soluția B Se prepară un amestec de volume egale de soluție A și metanol.
Fază mobilă Se folosesc amestecuri variabile de soluție A și soluție B conform indicațiilor pentru Sistemul cromatografic. Efectuați ajustări la oricare dintre soluții, după cum este necesar.
Soluție standard Pregătiți o soluție de Clavulanat de litiu RS în Soluția A având o concentrație cunoscută de aproximativ 0,1 mg pe ml.
Soluție de testare Pregătiți o soluție de Clavulanat de potasiu în Soluția A care conține 10.0 mg pe ml.
Soluție de rezoluție Se prepară o soluție de Clavulanat de litiu RS și amoxicilină în Soluția A conținând 0,1 mg din fiecare pe ml.
Sistem cromatografic Procedura cromatografică poate fi efectuată folosind (a) o coloană din oțel inoxidabil (10 cm × 4.6 mm) umplută cu octadecilsilan legat chimic de microparticule poroase de silice sau ceramică (3 până la 10 μm) și este menținută la o temperatură constantă de aproximativ 40º, (b) fază mobilă la un debit de aproximativ 1 ml pe minut și (c) un fotometru cu ultraviolete setat la 230 nm.
Sistemul este programat pentru a furniza o fază mobilă compusă din amestecuri variabile de soluție A și soluție B. Sistemul este echilibrat timp de 15 minute cu 100 % soluție A și este menținut în această compoziție timp de 4 minute după injectarea soluției de testat, după care proporția de soluție B este crescută liniar de la 0 la 50 % pe o perioadă de 11 minute. Sistemul este menținut în această compoziție timp de 3 minute, după care se trece la 100 % soluție A timp de 6 minute. Pentru a determina adecvarea sistemului cromatografic, se cromatografiază soluția de rezoluție ș i se înregistrează răspunsurile la vârfuri conform procedurii: timpii de retenție relativi sunt de aproximativ 2,5 pentru amoxicilină ș i 1,0 pentru acidul clavulanic; factorul de simetrie pentru vârful acidului clavulanic nu este mai mare de 2,0; eficiența coloanei determinată pe baza vârfului acidului clavulanic nu este mai mică de 2000 de plăci teoretice; factorul de rezoluție între vârful acidului clavulanic ș i vârful amoxicilinei nu este mai mic de 13. Se cromatografiază soluția standard și se înregistrează răspunsurile la vârfuri conform instrucțiunilor pentru Procedură: abaterea standard relativă pentru injecțiile repetate nu este mai mare de 2 %.
Procedură Se injectează separat volume egale (aproximativ 20 μl) de soluție standard și soluție de test în cromatograf, se înregistrează cromatogramele și se măsoară răspunsurile la vârfuri.
Calculare Se calculează procentul, în termeni de echivalent de clavulanat de potasiu, al fiecărei impurități din clavulanat de potasiu luat prin expresia:

10(237.3/205.1)(C)(ri/rS),

în care 237.3 este greutatea moleculară a clavulanatului de potasiu; 205.1 este greutatea moleculară a clavulanatului de litiu; C este concentrația, în mg pe ml, de clavulanat de potasiu RS în soluția etalon; ri este răspunsul la vârf al unui vârf individual de impuritate în cromatograma obținută din soluția de test; și rS este răspunsul la vârf al acidului clavulanic în cromatograma obținută din soluția etalon. Suma tuturor vârfurilor de impuritate nu este mai mare de 2 %.

Analiză Efectuați determinarea așa cum este descrisă în „Cromatografia lichidă de înaltă presiune” (apendicele 3.5).
pH 4,4 Tampon de fosfat de sodiu Se dizolvă 7.Se dizolvă 8 g de dihidrogenfosfat de sodiu în 900 ml de apă, se ajustează cu acid fosforic sau hidroxid de sodiu 10 M până la un pH de 4,4±0,1, se diluează cu apă până la 1000 ml și se amestecă.
Fază mobilă Se prepară un amestec adecvat din 95 de volume de tampon de fosfat de sodiu pH 4,4 și 5 volume de metanol. Se fac ajustări dacă este necesar.
Preparat standard Se dizolvă o cantitate cântărită cu precizie de Clavulanat de litiu RS în apă pentru a obține o soluție cu o concentrație cunoscută de aproximativ 250 μg pe ml.
Preparat de analiză Transferați aproximativ 50 mg de Clavulanat de potasiu, cântărite cu precizie, într-un balon cotat de 200 ml, dizolvați și diluați cu apă până la volum și amestecați.
Soluție de rezoluție Dizolvați o cantitate adecvată de amoxicilină în preparatul standard pentru a obține o soluție care să conțină aproximativ 0,5 mg de amoxicilină și 250 μg de clavulanat de litiu pe ml.
Sistem cromatografic Procedura cromatografică poate fi efectuată utilizând (a) o coloană din oțel inoxidabil (30 cm × 4 mm) umplută cu octadecilsilan legat chimic de microparticule poroase de silice sau ceramică (3 până la 10 μm), (b) fază mobilă la un debit de aproximativ 2 ml pe minut și (c) un fotometru cu ultraviolete setat la 220 nm.
Pentru a determina adecvarea sistemului cromatografic, se cromatografiază soluția de rezoluție și se înregistrează răspunsurile vârfurilor conform indicațiilor de la Procedură: factorul de rezoluție între vârfurile amoxicilinei și acidului clavulanic nu este mai mic de 3,5, iar timpii de retenție relativi sunt de aproximativ 0,5 pentru acidul clavulanic și 1,0 pentru amoxicilină. Se cromatografiază preparatul standard și se înregistrează răspunsurile la vârfuri conform indicațiilor de la Procedură: factorul de simetrie pentru vârful acidului clavulanic nu este mai mare de 1,5, iar abaterea standard relativă pentru injecțiile repetate nu este mai mare de 2,0 %.
Procedură Se injectează separat volume egale (aproximativ 20 μl) de preparat standard și de preparat de analiză în cromatograf, se înregistrează cromatogramele și se măsoară răspunsurile pentru vârfurile majore.
Calculare Se calculează conținutul de C8H9NO5 din Clavulanat de potasiu prelevat, folosind conținutul declarat de C8H9NO5 din Clavulanat de litiu RS.

.