Purificarea IgG folosind cromatografia DEAE-Sepharoză

Abstract

IgG poate fi purificată din ser printr-o procedură simplă de cromatografie de schimb de ioni într-o singură etapă. Metoda este utilizată pe scară largă și funcționează pe principiul că IgG are un punct izoelectric mai mare sau mai bazic decât majoritatea proteinelor serice. Prin urmare, dacă pH-ul este menținut sub punctul izoelectric al majorității anticorpilor, imunoglobulinele nu se leagă de un schimbător de anioni și sunt separate de majoritatea proteinelor serice legate de matricea coloanei. Capacitatea mare a coloanelor schimbătoare de anioni permite purificarea pe scară largă a IgG din ser. Grupul reactiv schimbător de anioni, dietilaminoetil (DEAE) legat covalent la Sefarose (de exemplu, DEAE Sepharose CL-6B, Pharmacia, Uppsala, Suedia) este util în acest scop. Aceasta este furnizată preumflată și gata pentru a fi introdusă într-o coloană, este robustă și are o capacitate de legare ridicată. În plus, este relativ stabilă la schimbările de forță ionică și de pH. Alte matrici (de exemplu, DEAE celuloza) sunt furnizate sub formă de solide și, prin urmare, vor necesita pregătire și echilibrare (1).

.

Lasă un comentariu