Bei Atlas Antibodies haben wir uns schon immer intensiv mit der Validierung von Antikörpern und der Herstellung hochgradig charakterisierter Antikörper beschäftigt, denen unsere Kunden vertrauen können.
Alle unsere Antikörper werden rigoros auf Spezifität und Leistung geprüft und in mehreren Anwendungen charakterisiert. Die zweite Stufe der Validierung, die Enhanced Validation, wird nach den Empfehlungen der International Working Group for Antibody Validation (IWGAV ) durchgeführt, die in Nature Methods veröffentlicht wurden. Lesen Sie weiter, um mehr über die Konzepte der Enhanced Validation zu erfahren und darüber, wie die Methoden eingesetzt werden, um die Spezifität unserer Antikörper zu gewährleisten.
Charakterisierung und Validierung von Antikörpern
Antigen-Design
Bei unseren Antikörpern beginnt die Spezifität mit dem Design. Die Antikörper werden gegen rekombinante menschliche Protein-Epitop-Signatur-Tags (PrESTs) von etwa 50 bis 150 Aminosäuren entwickelt. Die PrEST-Sequenzen sind so konzipiert, dass sie die geringstmögliche Identität mit anderen menschlichen Proteinen aufweisen.
Protein-Array
Die Spezifität und Reinheit werden durch einen Protein-Array gegen 364 menschliche rekombinante Proteinfragmente validiert.
Funktionelle Validierung und Charakterisierung
Alle Triple A Polyklonale und PrecisA Monoklonale, die von Atlas Antibodies angeboten werden, sind validiert und charakterisiert in jeder Anwendung, für die der spezifische Antikörper zugelassen ist (IHC, ICC-IF, WB), in den meisten normalen und krebsartigen menschlichen Geweben sowie auf subzellulärer Ebene. Zu jedem Antikörper gibt es im Humanen Proteinatlas eine große Anzahl von Bildern, die die Ergebnisse dieser Validierungstests zeigen und von den Forschern manuell kommentiert werden. Bei der IHC wird jeder Antikörper in 44 normalen Geweben und den 20 häufigsten Krebsarten untersucht.
- Erfahren Sie mehr über die Charakterisierung und Validierung in IHC, WB und ICC-IF.
Antikörper-Zulassung
Die Antikörperspezifität wird weiter bewertet und die endgültige Zulassung berücksichtigt die Literatur, Bioinformatik und RNA-Sequenzierungsdaten.
Transparenz
Wir glauben, dass Transparenz und offener Zugang für die Forschung entscheidend sind. Alle Charakterisierungsdaten, einschließlich der Bilder, werden auf den Websites von Atlas Antibodies und dem Human Protein Atlas präsentiert. Im Gegensatz zu den meisten Anbietern von Antikörpern stellen wir Ihnen die genaue Sequenz des Immunogens zur Verfügung, das zur Herstellung des Antikörpers verwendet wurde.
Erweiterte Validierung
Zusätzlich zu der umfassenden Validierung und Charakterisierung, die wir stets für unsere Antikörper durchführen, führen wir eine anwendungsspezifische erweiterte Validierung durch. Die erweiterte Validierung folgt den Richtlinien, die von der International Working Group for Antibody Validation (IWGAV) in Nature Methods vorgeschlagen wurden.
Die Arbeitsgruppe wurde von angesehenen Forschern aus der ganzen Welt gebildet, um „die besten Ansätze für die Validierung von Antikörpern zu formulieren, die in gängigen Forschungsanwendungen verwendet werden, und Richtlinien bereitzustellen, die die Reproduzierbarkeit von Antikörpern gewährleisten „1. Die IWGAV schlug fünf konzeptionelle Säulen für die Antikörpervalidierung vor, die anwendungsspezifisch eingesetzt werden sollen. Mindestens eine der Säulen muss verwendet werden, damit ein Antikörper für eine bestimmte Anwendung validiert werden kann. Bei Atlas Antibodies stützen wir uns bei der Enhanced Validation auf die Auslegung dieser Säulen durch Human Protein Atlas, die hier erläutert wird.
Erfahren Sie mehr über Enhanced Validation
Die Enhanced Validation bietet eine erhöhte Sicherheit der Antikörperspezifität in einem bestimmten Kontext. Dies wird durch die Verwendung der relevantesten Validierungsmethode für jede Kombination von Protein, Probe und Anwendung gewährleistet.
Mehr erfahren
Reproduzierbarkeit
Neben einer gründlichen Validierung ist es von entscheidender Bedeutung, die Reproduzierbarkeit der Antikörper sicherzustellen. Jede neue Charge eines Antikörpers muss im Vergleich zu einer früheren Charge gleich gut abschneiden, damit die Experimente mit dem Antikörper mit den gleichen Ergebnissen wiederholt werden können. Bei Atlas Antibodies testen wir alle neuen Antikörperchargen parallel zu bestehenden Chargen in einer großen Anzahl von Proben.
- Erfahren Sie, wie wir die Reproduzierbarkeit von Antikörpern sicherstellen
1 Die Gruppe angesehener Forscher der Stanford University, der Yale University, des MIT, des UCSD und des NIH in den USA, der University of Toronto in Kanada, dem EMBL in Deutschland, der Universität Niigata in Japan und dem Science for Life Laboratory in Schweden wurde gebildet, um formale Richtlinien für die Validierung und Reproduzierbarkeit von Antikörpern zu entwickeln, die von Antikörperherstellern verwendet werden können, um Antikörper auf standardisierte Weise zu validieren (Nature Methods, September 2016).