抗体バリデーション

Atlas Antibodiesでは、常に抗体バリデーションに幅広く取り組み、お客様が信頼できる特性値の高い抗体の生産に努めています。

私たちのすべての抗体は、特異性と性能を厳密に評価され、いくつかのアプリケーションで特性評価されています。 バリデーションの第二段階であるエンハンストバリデーションは、Nature Methodsに掲載されたInternational Working Group for Antibody Validation (IWGAV )の勧告に従って実施されています。 エンハンストバリデーションの概念と、当社の抗体の特異性を保証するためにどのような方法が採用されているかについては、このまま読み進めてください。

Characterization and Validation of Antibodies

Antigen Design

当社の抗体の場合、特異性は設計から始まります。 抗体は、約50~150アミノ酸からなるリコンビナントヒトのProtein Epitope Signature Tag(PrESTs)に対して開発されています。 PrESTの配列は、他のヒトタンパク質との同一性が可能な限り低くなるように設計されています。

Protein Array

364のヒト組換えタンパク質断片に対するプロテインアレイにより、特異性と純度が検証されています。

Functional validation and characterization

Atlas Antibodiesが提供するすべてのTriple A PolyclonalsとPrecisA Monoclonalsは、特定の抗体が承認されている各アプリケーション(IHC, ICC-IF, WB)で、正常およびがんのヒト組織の大部分と同様にサブセルレベルで検証および特性評価されています。 各抗体は、Human Protein Atlas上でこれらのバリデーションアッセイの結果を示す多数の画像を添付しており、それぞれ研究者によって手動で注釈がつけられています。 IHCでは、44の正常組織と20の最も一般的な癌において、各抗体が評価されています。

  • IHC、WB、ICC-IFにおける特性評価とバリデーションの詳細はこちら

抗体の承認

抗体の特異性はさらに評価され、最終承認には文献、バイオインフォマティクス、RNAシーケンスデータが考慮されます

透明性

私たちは透明性とオープンアクセスが研究に不可欠であると信じています。 画像を含むすべての特性データは、Atlas Antibodies および Human Protein Atlas のウェブサイトにて公開されています。 また、多くの抗体メーカーとは異なり、抗体作製に使用した正確な免疫原シークエンスを提供しています。

Enhanced Validation

当社の抗体に対して常に行われている広範なバリデーションと特性評価に加え、アプリケーション固有のEnhanced Validationも行っています。 IWGAVは、「一般的な研究用途で使用される抗体のバリデーションに最適なアプローチを策定し、抗体の再現性を保証するガイドラインを提供する」ことを目的に、世界中の著名な研究者によって結成されました1 IWGAVは、アプリケーション固有の方法で使用する、抗体バリデーションの5つのコンセプト柱を提案しました。 この5つの柱のうち少なくとも1つは、特定の用途でバリデートされる抗体のために使用されなければなりません。 Atlas Antibodies では、Human Protein Atlas のこれらの柱の解釈に基づいて、エンハンスト・バリデーションを実施しています。

Enhanced Validation

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Ehanced Validation は、定められた状況における抗体の特異性をより確実にするものです。 これは、タンパク質、サンプル、アプリケーションの各組み合わせに最も適したバリデーション方法を使用することによって保証されます。

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Reproducibility

徹底したバリデーションの実施に加えて、抗体の再現性を確保することが極めて重要です。 その抗体を用いた実験を繰り返しても同じ結果が得られるように、新しいロットは前のロットと比較して同等の性能を有していなければなりません。 Atlas Antibodies では、すべての新しいロットの抗体を、既存のロットと並行して、大量のサンプルでテストしています。

  • Learn about how we ensure antibody reproducibility

1 米国スタンフォード大学、イェール大学、MIT、UCSD、NIH、カナダトロント大学から優れた研究者のグループが参加しています。 ドイツのEMBL、日本の新潟大学、スウェーデンのScience for Life Laboratoryを結成し、抗体メーカーが標準的な方法で抗体の検証を行うために使用する、抗体の検証および再現性に関する公式ガイドラインを開発しました(Nature Methods, September 2016)。

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