A Atlas Antibodies, abbiamo sempre lavorato molto sulla convalida degli anticorpi e sulla produzione di anticorpi altamente caratterizzati di cui i nostri clienti possono fidarsi.
Tutti i nostri anticorpi sono rigorosamente valutati per specificità e performance e sono caratterizzati in diverse applicazioni. Il secondo livello di convalida, Enhanced Validation, viene eseguito seguendo le raccomandazioni dell’International Working Group for Antibody Validation (IWGAV) pubblicate su Nature Methods. Continua a leggere per conoscere i concetti di Enhanced Validation e come i metodi sono impiegati per garantire la specificità dei nostri anticorpi.
Caratterizzazione e convalida degli anticorpi
Design dell’antigene
Per i nostri anticorpi, la specificità inizia con il design. Gli anticorpi sono sviluppati contro le proteine umane ricombinanti PrEST (Protein Epitope Signature Tags) di circa 50-150 aminoacidi. Le sequenze PrEST sono progettate per avere la più bassa identità possibile con altre proteine umane.
Protein Array
La specificità e la purezza sono convalidate dal protein array contro 364 frammenti di proteine umane ricombinanti.
Convalida e caratterizzazione funzionale
Tutti i Triple A Polyclonals e i PrecisA Monoclonals offerti da Atlas Antibodies sono convalidati e caratterizzati in ogni applicazione per cui l’anticorpo specifico è approvato (IHC, ICC-IF, WB), nella maggior parte dei tessuti umani normali e cancerosi e a livello subcellulare. Ogni anticorpo è accompagnato da un gran numero di immagini sull’Atlante delle proteine umane che mostrano il risultato di questi test di convalida, ciascuno annotato manualmente dai ricercatori. In IHC, ogni anticorpo è valutato in 44 tessuti normali e nei 20 tumori più comuni.
- Scopri di più sulla caratterizzazione e la convalida in IHC, WB e ICC-IF.
Approvazione degli anticorpi
La specificità degli anticorpi viene ulteriormente valutata e l’approvazione finale prende in considerazione la letteratura, la bioinformatica e i dati di sequenziamento dell’RNA.
Trasparenza
Noi crediamo che la trasparenza e l’accesso aperto siano fondamentali per la ricerca. Tutti i dati di caratterizzazione, comprese le immagini, sono presentati sui siti web Atlas Antibodies e Human Protein Atlas. A differenza della maggior parte dei fornitori di anticorpi, forniamo l’esatta sequenza dell’immunogeno utilizzato per aumentare l’anticorpo.
Convalida potenziata
In aggiunta all’ampia convalida e caratterizzazione sempre eseguita per i nostri anticorpi, eseguiamo una convalida potenziata specifica per l’applicazione. La convalida avanzata segue le linee guida proposte dall’International Working Group for Antibody Validation (IWGAV) in Nature Methods.
Il gruppo di lavoro è stato formato da illustri ricercatori di tutto il mondo per “formulare i migliori approcci per la convalida degli anticorpi utilizzati nelle comuni applicazioni di ricerca e per fornire linee guida che garantiscano la riproducibilità degli anticorpi. “1 IWGAV ha proposto cinque pilastri concettuali per la convalida degli anticorpi, da utilizzare in modo specifico per le applicazioni. Almeno uno dei pilastri deve essere usato perché un anticorpo sia validato in una specifica applicazione. Noi di Atlas Antibodies, basiamo la Enhanced Validation sull’interpretazione di questi pilastri da parte di Human Protein Atlas, spiegata qui.
Impara la Enhanced Validation
La Enhanced Validation offre una maggiore sicurezza della specificità degli anticorpi in un contesto definito. Ciò è garantito dall’utilizzo del metodo di validazione più pertinente per ogni combinazione di proteina, campione e applicazione.
Per saperne di più
Riproducibilità
Oltre a eseguire una validazione approfondita, è di vitale importanza garantire la riproducibilità degli anticorpi. Ogni nuovo lotto di un anticorpo deve avere le stesse prestazioni rispetto al lotto precedente in modo che gli esperimenti che utilizzano l’anticorpo possano essere ripetuti con gli stessi risultati. Alla Atlas Antibodies testiamo tutti i nuovi lotti di anticorpi in parallelo ai lotti esistenti in un ampio set di campioni.
- Scopri come garantiamo la riproducibilità degli anticorpi
1 Il gruppo di illustri ricercatori dell’Università di Stanford, dell’Università di Yale, del MIT, dell’UCSD e del NIH negli USA, dell’Università di Toronto in Canada, l’EMBL in Germania, l’Università di Niigata in Giappone e il Science for Life Laboratory in Svezia, è stato formato per sviluppare linee guida formali per la convalida e la riproducibilità degli anticorpi da utilizzare dai produttori di anticorpi per convalidare gli anticorpi in modo standardizzato (Nature Methods, settembre 2016).