Atlas Antibodies on aina työskennellyt laajasti vasta-aineiden validoinnin parissa ja tuottanut hyvin karakterisoituja vasta-aineita, joihin asiakkaamme voivat luottaa.
Kaikki vasta-aineemme arvioidaan tiukasti spesifisyyden ja suorituskyvyn osalta, ja ne karakterisoidaan useissa sovelluksissa. Validoinnin toinen taso, Enhanced Validation, suoritetaan Nature Methods -lehdessä julkaistujen International Working Group for Antibody Validation (IWGAV ) -suositusten mukaisesti. Jatka lukemista ja tutustu tehostetun validoinnin käsitteisiin ja siihen, miten menetelmiä käytetään vasta-aineidemme spesifisyyden varmistamiseksi.
Vasta-aineiden karakterisointi ja validointi
Antigeenin suunnittelu
Vasta-aineidemme spesifisyys alkaa suunnittelusta. Vasta-aineet kehitetään noin 50-150 aminohapon pituisia ihmisen rekombinanttisia proteiiniepitooppisignaattoreita (PrEST) vastaan. PrEST-sekvenssit on suunniteltu siten, että ne ovat mahdollisimman vähän identtisiä muiden ihmisproteiinien kanssa.
Proteiiniarray
Spesifisyys ja puhtaus validoidaan proteiiniarrayllä 364 ihmisen rekombinanttiproteiinifragmenttia vastaan.
Funktionaalinen validointi ja karakterisointi
Kaikki Atlas-vasta-aineiden tarjoamat Triple A-polyklonaalit ja PrecisA-monoklonaalit on validoitu ja karakterisoitu jokaisessa sovelluksessa, johon kyseinen vasta-aine on hyväksytty (IHC, ICC-IF, WB), useimmissa normaaleissa ja syöpäkasvaimen aiheuttamissa ihmiskudoksissa sekä alisolutasolla. Jokaisen vasta-aineen mukana on Human Protein Atlas -palvelussa suuri määrä kuvia, jotka osoittavat näiden validointitutkimusten tulokset ja jotka tutkijat ovat kommentoineet käsin. IHC:ssä kukin vasta-aine arvioidaan 44 normaalissa kudoksessa ja 20 yleisimmässä syöpäkudoksessa.
- Lue lisää karakterisoinnista ja validoinnista IHC:ssä, WB:ssä ja ICC-IF:ssä.
Vasta-aineen hyväksyntä
Vasta-aineen spesifisyys arvioidaan tarkemmin, ja lopullisessa hyväksynnässä otetaan huomioon kirjallisuus-, bioinformatiikka- ja RNA-sekvensointitieto.
Transparenssi
Me uskomme läpinäkyvyyteen ja avoimeen pääsyyn olevan ratkaisevan tärkeää tutkimukselle. Kaikki karakterisointitiedot, mukaan lukien kuvat, esitetään Atlas Antibodies- ja Human Protein Atlas -verkkosivuilla. Toisin kuin useimmat vasta-aineiden toimittajat, me annamme sinulle tarkan immunogeenisekvenssin, jota on käytetty vasta-aineen kasvattamiseen.
Vahvistettu validointi
Vastaaineillemme aina suoritettavan laajan validoinnin ja karakterisoinnin lisäksi suoritamme sovelluskohtaista tehostettua validointia. Tehostetussa validoinnissa noudatetaan Kansainvälisen vasta-aineiden validointityöryhmän (International Working Group for Antibody Validation, IWGAV) Nature Methods -lehdessä ehdottamia ohjeita.
Työryhmä muodostettiin arvostetuista tutkijoista eri puolilta maailmaa, ja sen tehtävänä oli ”laatia parhaat lähestymistavat tavallisissa tutkimussovelluksissa käytettävien vasta-aineiden validointiin ja antaa ohjeita, joilla varmistetaan vasta-aineiden toistettavuus. ”1 IWGAV ehdotti vasta-aineiden validoinnille viittä käsitteellistä pylvästä, joita on tarkoitus käyttää sovelluskohtaisesti. Vähintään yhtä pilarista on käytettävä, jotta vasta-aine voidaan validoida tietyssä sovelluksessa. Me Atlas-vasta-aineissa perustamme tehostetun validoinnin Human Protein Atlaksen tulkintaan näistä pilareista, jotka on selitetty tässä.
Learn about Enhanced Validation
Vahvistetussa validoinnissa tarjotaan lisääntynyt varmuus vasta-aineen spesifisyydestä määritellyssä kontekstissa. Tämä varmistetaan käyttämällä kullekin proteiinin, näytteen ja sovelluksen yhdistelmälle sopivinta validointimenetelmää.
Opi lisää
Vasta-aineen toistettavuus
Huolellisen validoinnin suorittamisen lisäksi vasta-aineen toistettavuuden varmistaminen on elintärkeää. Jokaisen uuden vasta-aine-erän on suoriuduttava yhtä hyvin verrattuna edelliseen erään, jotta vasta-ainetta käyttävät kokeet voidaan toistaa samoilla tuloksilla. Atlas Antibodies testaa kaikki uudet vasta-aine-erät rinnakkain olemassa olevien erien kanssa laajalla näytemäärällä.
- Tutustu siihen, miten varmistamme vasta-aineiden toistettavuuden
1 Ryhmä ansioituneita tutkijoita Stanfordin yliopistosta, Yale-yliopistosta, MIT:stä, MIT:stä, UCSD:stä ja NIH:stä (NIH) USA:ssa sekä Toronton yliopistosta Kanadassa, EMBL:stä Saksassa, Niigatan yliopistosta Japanissa ja Science for Life -laboratoriosta Ruotsissa, muodostettiin kehittämään vasta-aineiden validointia ja toistettavuutta koskevia virallisia ohjeita, joita vasta-ainevalmistajat voivat käyttää vasta-aineiden validointiin standardoidulla tavalla (Nature Methods, syyskuu 2016).