Atlas Antibodies, nous avons toujours travaillé de manière intensive avec la validation d’anticorps et avec la production d’anticorps hautement caractérisés auxquels nos clients peuvent faire confiance.
Tous nos anticorps sont rigoureusement évalués pour leur spécificité et leur performance et sont caractérisés dans plusieurs applications. La deuxième couche de validation, la validation améliorée, est effectuée en suivant les recommandations du groupe de travail international pour la validation des anticorps (IWGAV ) publiées dans Nature Methods. Poursuivez votre lecture pour découvrir les concepts de la validation améliorée et la manière dont les méthodes sont employées pour garantir la spécificité de nos anticorps.
Caractérisation et validation des anticorps
Conception des antigènes
Pour nos anticorps, la spécificité commence par la conception. Les anticorps sont développés contre des étiquettes de signature d’épitopes protéiques (PrEST) humaines recombinantes d’environ 50 à 150 acides aminés. Les séquences PrEST sont conçues pour avoir la plus faible identité possible avec d’autres protéines humaines.
Protein Array
La spécificité et la pureté sont validées par protein array contre 364 fragments de protéines recombinantes humaines.
Validation et caractérisation fonctionnelle
Tous les Polyclonaux Triple A et Monoclonaux PrecisA proposés par Atlas Antibodies sont validés et caractérisés dans chaque application pour laquelle l’anticorps spécifique est approuvé (IHC, ICC-IF, WB), dans la majorité des tissus humains normaux et cancéreux ainsi qu’au niveau subcellulaire. Chaque anticorps est accompagné d’un grand nombre d’images sur l’Atlas des protéines humaines montrant le résultat de ces essais de validation, chacune annotée manuellement par les chercheurs. En IHC, chaque anticorps est évalué dans 44 tissus normaux et les 20 cancers les plus courants.
- En savoir plus sur la caractérisation et la validation en IHC, WB et ICC-IF.
Approbation de l’anticorps
La spécificité de l’anticorps est évaluée plus avant et l’approbation finale prend en compte la littérature, la bioinformatique et les données de séquençage de l’ARN.
Transparence
Nous pensons que la transparence et l’accès ouvert sont cruciaux pour la recherche. Toutes les données de caractérisation, y compris les images, sont présentées sur les sites Web Atlas Antibodies et Human Protein Atlas. Contrairement à la plupart des fournisseurs d’anticorps, nous vous fournissons la séquence immunogène exacte utilisée pour élever l’anticorps.
Validation améliorée
En plus de la validation et de la caractérisation étendues toujours effectuées pour nos anticorps, nous effectuons une validation améliorée spécifique à l’application. La validation renforcée suit les directives proposées par le Groupe de travail international pour la validation des anticorps (IWGAV) dans Nature Methods.
Le groupe de travail a été formé par d’éminents chercheurs du monde entier pour « formuler les meilleures approches pour valider les anticorps utilisés dans les applications de recherche communes et pour fournir des directives qui garantissent la reproductibilité des anticorps. « 1 L’IWGAV a proposé cinq piliers conceptuels pour la validation des anticorps, à utiliser de manière spécifique à l’application. Au moins un des piliers doit être utilisé pour qu’un anticorps soit validé dans une application spécifique. Chez Atlas Antibodies, nous basons la validation améliorée sur l’interprétation de ces piliers par Human Protein Atlas, expliquée ici.
Learn about Enhanced Validation
La validation améliorée offre une sécurité accrue de la spécificité des anticorps dans un contexte défini. Elle est assurée par l’utilisation de la méthode de validation la plus pertinente pour chaque combinaison de protéine, d’échantillon et d’application.
En savoir plus
Reproductibilité
En plus d’effectuer une validation approfondie, il est d’une importance vitale d’assurer la reproductibilité des anticorps. Chaque nouveau lot d’un anticorps doit avoir les mêmes performances par rapport à un lot précédent afin que les expériences utilisant l’anticorps puissent être répétées avec les mêmes résultats. Chez Atlas Antibodies, nous testons tous les nouveaux lots d’anticorps en parallèle avec les lots existants dans un grand ensemble d’échantillons.
- Découvrez comment nous assurons la reproductibilité des anticorps
1 Le groupe d’éminents chercheurs de l’université de Stanford, de l’université de Yale, du MIT, de l’UCSD et du NIH aux États-Unis, de l’université de Toronto au Canada, de l’EMBL en Allemagne, de l’Université de Niigata au Japon et du Science for Life Laboratory en Suède, a été formé pour élaborer des lignes directrices officielles pour la validation et la reproductibilité des anticorps qui seront utilisées par les fabricants d’anticorps pour valider les anticorps de manière standardisée (Nature Methods, septembre 2016).